江苏省高校自然科学研究项目(09KJD310012)
- 作品数：3 被引量：2H指数：1
- 相关作者：周峰史震张海清孙伟郑葵阳更多>>
- 相关机构：徐州医学院更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- β-catenin在IL-24抑制肝癌细胞的血管生成和肿瘤生长中的作用被引量：1
- 2011年
- 目的研究IL-24对肝癌细胞在鸡胚绒毛尿囊膜(chick chorioallantoic membrane,CAM)上的血管生成和肿瘤生长的影响及其机制的初探。方法实验采用病毒感染复数(multiplicity of infection,MOI)为5的重组慢病毒IL-24和慢病毒空载体Mock分别感染肝癌细胞HepG2,24 h后接种于CAM,4 d后观察CAM上形成的肿瘤背面血管数目,并剥离肿瘤组织称其重量,继而进行Western blot检测肿瘤组织中β-catenin的表达。结果 CAM实验显示,与Mock感染的HepG2细胞相比,慢病毒IL-24感染的HepG2细胞形成的肿瘤背面血管分支数目和肿瘤重量明显下降。Western blot结果发现慢病毒IL-24感染的HepG2细胞形成的肿瘤组织中β-catenin显著低于Mock组。结论 IL-24能够抑制肝癌细胞的肿瘤血管生成和肿瘤生长,这种作用可能是通过下调β-catenin的表达来实现的。
- 周峰王杰张海清史震裴冬生郑骏年
- 关键词：IL-24肝癌细胞血管生成肿瘤生长Β-CATENIN
- 融合型自杀基因系统Fcy：：Fur／5-FC对人肝癌细胞株HepG2体外杀伤作用的初步研究
- 2011年
- 目的研究融合型自杀基因Fcy：：Fur联合5-氟胞嘧啶（5-Fc）对人肝癌细胞株HepG2的杀伤作用。方法应用脂质体介导法将Fcy：：Fur基因转染人人肝癌细胞株HepG2，经G418筛选2周后行有限稀释法获得稳定表达Fcy：：Fur基因的单克隆细胞。5-Fc处理后，通过MTF法和AnnexinV—FITC＋PI双标记染色法，检测Fcy：：Fur／5～FC自杀基因系统对人肝癌细胞株HepG2的细胞增殖及凋亡的影响。结果MqT法检测显示稳定表达Fcy：：Fur基因的HepG2单克隆细胞经5-Fc处理后，在1、2、3、4、5天时对细胞的增殖有明显抑制作用。AnnexinV—FITC＋PI双标记染色法检测细胞凋亡率：1天为5．74％，2天为11．04％，3天为17．56％；PBS处理的细胞凋亡率：1天为3．67％，2天为3．68％，3天为4．42％，凋亡率无明显改变。结论Fcy：：Fur／5-FC自杀基因系统对人肝癌细胞株HepG2的增殖有明显的抑制作用，并可促进肿瘤细胞凋亡。
- 张海清周峰孔凡运李向阳史震孙伟郑葵阳汤仁仙
- 关键词：肝癌
- 含IL-24基因重组慢病毒表达载体的构建及其对肝癌细胞生长的抑制作用被引量：1
- 2010年
- 目的探讨白细胞介素(IL)24基因表达目的蛋白IL-24的方法,检测IL-24对肝癌细胞生长的影响。方法自经5μg/ml植物血凝素(PHA)刺激的正常人单个核细胞(PBMCs)中提取总RNA,RT-PCR扩增出IL-24cDNA,插入到pHAGE-CMV-MCS-IzsGreen中构建成慢病毒转移载体pHAGE-IL-24,转染HEK293T细胞。荧光显微镜观察293T细胞中绿色荧光蛋白(GFP)表达;梯度稀释法测定病毒滴度,感染HEK293T细胞48h后进行RT-PCR和Westernblot检测IL-24的基因和蛋白表达;MTT法检测细胞的增殖。结果限制性内切酶检测和基因测序证实成功构建了携带IL-24基因的慢病毒表达载体,滴度为5×106TU/ml。以MOI为5.0的重组慢病毒感染靶细胞HepG248h后,能够检测到外源基因IL-24的蛋白表达。IL-24能够抑制肝癌细胞的生长。结论成功构建了含IL-24基因的慢病毒表达载体,获得的病毒能够有效感染HepG2细胞,并在其中大量表达目的蛋白;IL-24能够抑制肝癌细胞的生长。
- 周峰张海清史震孙伟汤仁仙郑葵阳
- 关键词：慢病毒载体白细胞介素24肝癌
