内蒙古自治区自然科学基金(2012ZD05)
- 作品数：6 被引量：33H指数：4
- 相关作者：王迎春郑琳琳王佳贺龙梅特布沁更多>>
- 相关机构：内蒙古大学内蒙古和信园蒙草抗旱绿化股份有限公司更多>>
- 发文基金：内蒙古自治区自然科学基金国家自然科学基金内蒙古自治区教育厅基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 西伯利亚白刺不同成熟阶段果实花青素成分的分析被引量：3
- 2014年
- 为进一步挖掘白刺属植物果实中花青素成分,以采自内蒙古两个地点的西伯利亚白刺果实为材料,利用高效液相色谱(HPLC-DAD)技术,建立了定性定量分析西伯利亚白刺果实中花青素的方法,同时结合离子阱多级质谱(MSn)技术,从西伯利亚白刺果实甲醇提取物中鉴定出12种花青素组分,分别为:矢车菊素3-槐糖苷、矢车菊素3-戊糖苷、矮牵牛素3-芸香糖-葡萄糖苷、芍药素3-槐糖苷、矮牵牛素3-鼠李糖苷、锦葵素3-阿拉伯糖苷、芍药素3-己糖苷、矢车菊素3-顺式-香豆酰二葡萄糖苷、矢车菊素3-反式-香豆酰二葡萄糖苷、天竺葵素3-香豆酰二葡萄糖苷、芍药素3-丙二酰葡萄糖苷、矮牵牛素3-香豆酰葡萄糖苷。利用所建立的方法,分析并比较了3个不同成熟阶段和2个采集点样品中花青素组成和含量的差异。
- 高喆特布沁王佳王迎春
- 关键词：果实花青素高效液相色谱离子阱质谱
- 唐古特白刺质膜Na^+/H^+逆向转运蛋白基因的克隆与表达分析被引量：13
- 2013年
- 土壤中过多的Na+会导致植物产生盐害,严重影响植物的生长和发育。质膜型Na+/H+逆向转运蛋白SOS1介导植物细胞内过量的Na+外排,在植物抵御盐胁迫过程中起着重要的作用。唐古特白刺隶属于蒺藜科白刺属,是中国特有的盐生植物,主要生长于西北地区的荒漠或盐渍化荒漠,具有极强的抗逆能力。应用简并RT-PCR及RACE技术克隆获得唐古特白刺Na+/H+逆向转运蛋白NtSOS1基因(GenBank登录号KC292267)。序列分析显示,该cDNA全长4 008bp,包含3 492bp的开放阅读框,编码分子量为127.59kDa的蛋白质。疏水性分析预测NtSOS1基因编码蛋白N端具有11个跨膜结构域,C端具有一个面向胞质的长亲水尾部,包含保守环核苷酸结合区域、自我抑制基序及磷酸化位点等多个活性调控结构域。NtSOS1氨基酸序列与葡萄、霸王、拟南芥等植物的SOS1序列同源性较高,分别可达71.77%,68.94%,62.65%。系统发育分析表明NtSOS1基因为质膜型Na+/H+逆向转运蛋白,与液泡型Na+/H+逆向转运蛋白属于不同分支。半定量RT-PCR结果显示冷、热、盐和干旱胁迫都可以诱导NtSOS1基因的表达,同时,NtSOS1基因随着盐处理浓度增加呈现出先上升(0～300 mmol/L)后下降(400mmol/L)的趋势。结合植物的生境特点和NtSOS1表达模式分析,该基因表达水平的升高可能在唐古特白刺适应恶劣生境的过程中发挥积极作用。本研究的开展为利用NtSOS1基因进行作物与牧草改良并深入研究唐古特白刺抗逆分子机制奠定了基础。
- 郑琳琳张慧荣贺龙梅王迎春
- 关键词：盐生植物唐古特白刺
- 珍稀泌盐植物长叶红砂两个WRKY转录因子的克隆及表达分析被引量：6
- 2014年
- 根据长叶红砂转录组数据信息,选取在盐胁迫处理后表达上调明显且注释结果为WRKY转录因子的两个cDNA片段。通过cDNA末端快速扩增技术（rapid amplification of cDNA ends,RACE）,从长叶红砂中克隆获得2个WRKY基因。在NCBI数据库比对与拟南芥AtWRKY33同源性分别为79%和87%,因此命名为RtWRKY33-1和RtWRKY33-2。其中RtWRKY33-1的cDNA全长2163bp,开放阅读框（open reading frame,ORF）长度为1681bp,编码573个氨基酸;RtWRKY33-2的cDNA全长2155bp,开放阅读框长度为1776bp,编码591个氨基酸。氨基酸序列分析表明这两个基因均具有两个WRKY结构域,属于典型的I类WRKY转录因子。蛋白结构预测分析发现,两个蛋白的一级结构和二级结构在WRKY结构域的氨基酸序列和结构特性的相似性较高,但是在非保守结构域部分,尤其是N末端（1-80aa之间）、第1个WRKY结构域之前（190-240aa之间）和两个WRKY结构域之间（430-450aa之间）等位置的差异明显,可能对两个基因功能有一定影响。半定量RT-PCR分析表明,4种非生物胁迫均能诱导这两个基因的表达,但是盐、冷和ABA对RtWRKY33-2诱导尤为明显,同时RtWRKY33-2对干旱胁迫的响应更快,因此这两个基因在长叶红砂抵御非生物胁迫的应答反应中发挥的作用可能不同。本研究为深入探索WRKY33转录因子在长叶红砂中的作用机制奠定了基础。
- 王佳郑琳琳顾天培王学峰王迎春
- 关键词：长叶红砂WRKY转录因子克隆
- 泌盐植物长叶红砂质膜Na＋/H＋逆向转运蛋白基因(RtSOS1)全长cDNA的克隆及序列分析被引量：4
- 2013年
- 长叶红砂为内蒙古东阿拉善-西鄂尔多斯地区特有珍稀泌盐,强旱生小灌木,对盐渍荒漠环境具有极强适应性。利用RT-PCR和RACE技术从该植物中分离出质膜Na+/H+逆向转运蛋白基因(RtSOS1),该cDNA全长为3 829bp,开放阅读框为3 438 bp,编码一个含1 145个氨基酸的蛋白质,推测分子量为126.76 kDa。氨基酸序列的生物信息学分析推测,该蛋白N端含有11个跨膜结构域,C端为一个长约700个氨基酸的亲水性尾,具有磷酸化和自我抑制结构域。同源性比对和系统发育分析证实,RtSOS1与其他植物的质膜Na+/H+逆向转运蛋白亲缘关系较近。
- 党振华郑琳琳冯智王迎春
- 关键词：长叶红砂全长CDNA克隆
- 唐古特白刺叶和茎黄酮含量分析被引量：7
- 2014年
- 采用高效液相色谱串联质谱技术对唐古特白刺叶和茎中甲醇提取物进行黄酮成分的定性分析,共识别出12种黄酮成分,包括槲皮素衍生物3种、山奈素衍生物2种、异鼠李素衍生物7种。通过标准品进行半定量分析表明,唐古特白刺茎中黄酮含量达到14.44mg/g,叶中黄酮总含量为42.43mg/g。
- 高喆王佳特布沁王迎春
- 关键词：唐古特白刺黄酮
- 唐古特白刺蛋白激酶基因NtCIPK2超表达载体构建及紫花苜蓿转化研究被引量：5
- 2013年
- 环境因素如高盐、干旱或冷冻等严重制约着豆科重要牧草紫花苜蓿的生长发育和产量。根据已发表的盐生植物唐古特白刺蛋白激酶基因NtCIPK2的序列信息(序列号KC823044),利用PCR方法扩增其编码区cDNA,连接pMD-19Tsimple载体并测序,测序结果表明所克隆的DNA片段长度为1362bp,与GenBank上公布的序列完全一致。在此基础上构建植物超表达载体pPZP221-NtCIPK2,采用CaCl2冻融法将该表达载体转入农杆菌GV3101中,然后通过农杆菌介导的方法转化紫花苜蓿的下胚轴,形成愈伤组织后经庆大霉素筛选培养,最终获得7株抗性幼苗。对抗性幼苗进行庆大霉素基因的PCR检测,结果表明,NtCIPK2基因成功整合到紫花苜蓿基因组中,进一步对其进行外源基因的RT-PCR检测,发现只有3株幼苗中的外源基因实现了过量表达,这可能是由于基因插入位点的差异引发的基因沉默所致。本研究的开展为进一步分析转化植株在各种逆境胁迫条件的表现及其遗传稳定性,培育具有多重抗逆能力的苜蓿品种,促进苜蓿产业发展奠定基础。
- 郑琳琳王佳贺龙梅王学峰王迎春
- 关键词：紫花苜蓿
