国家自然科学基金(39570392)
- 作品数：10 被引量：21H指数：2
- 相关作者：周清华周宏远陈蔚蔚严军熊小熊更多>>
- 相关机构：华西医科大学附属第一医院第三军医大学四川大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 恶性肿瘤细胞株端粒酶活性的研究被引量：1
- 2000年
- 目的 :探讨非放射性定量的端粒重复序列扩增法(TRAP)在检测人类恶性肿瘤细胞株端粒酶活性中的应用价值。方法 :采用银染定量的TRAP方法检测SMMC 7721、K562、CNE 1、A549、HL 60细胞株的端粒酶活性。结果 :9株人类恶性肿瘤细胞株中8株呈端粒酶的阳性而其经热处理的标本均为阴性。结论 :非放射性银染定量的TRAP方法具有高可信度、特异性及敏感性 ,且8株人类恶性肿瘤细胞株均有端粒酶活性表达。
- 陈蔚蔚周宏远张洁王艳萍陈晓禾
- 关键词：端粒酶
- 肺癌组织中端粒酶基因与端粒酶活性关系的研究被引量：2
- 2002年
- 目的 探讨肺癌组织中端粒酶基因hTR、hTERT与端粒酶活性的表达是否与肺癌的发生发展有关 ,深入了解端粒酶基因对端粒酶活性的调控是在基因水平还是在转录水平。方法 采用TRAP PCR和RT PCR方法分别检测 68例肺癌组织及相应癌旁肺组织中端粒酶活性、端粒酶基因hTR和hTERT的表达。结果 68例肺癌组织中端粒酶阳性率为 79.4 % (54/ 68) ,hTR阳性率为 98.5% (67/ 68) ,hTERT阳性率为 91 .2 % (62 /68)。68例癌旁组织中无一例表达端粒酶阳性 ,但大多数癌旁组织均表达hTR(62 / 68,91 .2 % ) ,仅 7例hTERT表达阳性 (1 0 .3 % )。与hTR相比 ,hTERT同端粒酶具有更高的一致性 ,其一致率为 89.0 % (1 2 1 / 1 36) ,而hTR与端粒酶的一致率为 43 .4 % (59/ 1 36)。结论 端粒酶的活性可能在肺癌发生发展中起重要的作用。hTR与hTERT可能是在转录后或翻译后水平对端粒酶进行调控的。
- 陈蔚蔚熊小熊周宏远周清华
- 关键词：端粒酶基因端粒酶活性端粒酶HTRHTERT肺癌
- 毕赤酵母表达HWTX-Ⅰ的不均一性分析被引量：5
- 2006年
- 为了寻找毕赤酵母表达虎纹捕鸟蛛毒素-Ⅰ(HWTX-Ⅰ)时产生不均一性表达产物的原因,应用阳离子交换层析、反相HPLC、Tricine SDS-PAGE电泳、质谱等技术,对基因工程菌Pichia pastorisGS115/HWTX-Ⅰ表达的不均一产物进行了分离、纯化和鉴定,并对不均一产物的N端和C端进行测序,结果表明表达产物的不均一性主要体现在重组HWTX-Ⅰ的N端信号肽加工的不完全以及C末端的内部降解。生物学活性分析表明该不均一产物的活性仅为天然HWTX-Ⅰ活性的30%。同时,对如何避免不均一性表达产物的产生提出了相应的对策。
- 聂东宋周延凯曹佐英刘宇
- 关键词：毕赤酵母不均一性基因工程
- 端粒酶基因和抗凋亡基因bcl-2在肺组织中的表达研究被引量：1
- 2002年
- 目的 研究肺癌端粒酶基因和bcl 2的关系 ,以期阐明端粒酶基因及抗凋亡基因对端粒酶的调控机理。方法 采用TRAP、RT PCR及LSAB的方法研究了肺癌端粒酶活性、hTR、hTERT及bcl 2的表达。结果 82 .3%的肺癌组织表达端粒酶阳性 ,38例癌组织中 ,34例表达hTR (89.4 % ) ,36例表达hTERT(94 .7% )。而在相应的癌旁组织中 ,34例表达hTR ,但只有 3例表达hTERT(7.8% )。结论 肺癌组织中具有较高的端粒酶活性 ,在肿瘤组织和正常组织中hTERT的表达有显著的差异 (P <0 .0 5 )。hTR在正常组织和肿瘤组织均有较高的表达 ,bcl 2的表达与端粒酶基因有着较高的相关性。
- 熊小熊陈蔚蔚周宏远周清华王世春
- 关键词：端粒酶基因抗凋亡基因BCL-2基因表达
- 恶性肿瘤染色体端粒行为异常与癌变发生的关系研究被引量：1
- 2001年
- 目的 探讨恶性肿瘤染色体端粒行为异常与癌变发生的关系。方法 粒端联合采用微量全血培养法制备淋巴细胞染色体 ;端粒长度用 Southern杂交法 ;端粒酶活性用 TRAP- PCR法。结果 食管癌、鼻咽癌、肺癌染色体端粒联合率分别为 1 4.38%、35.0 7%、2 4 .40 % ,均高于对照组9.83%、2 0 .2 7%、1 5.60 % (P<0 .0 1 ) ;鼻咽癌、肺癌端粒长度变化分别为伸长 1 6.67%、1 6.67% ,缩短 76.67%、69.0 4 % ,长度无变化 6.66%、1 4.2 9% ;端粒酶活性阳性率为鼻咽癌 82 .1 4% ,肺癌 (非小细胞肺癌 NSCLC 78.3% ,小细胞肺癌 SCLC 1 0 0 % )。结论 端粒联合率的增高、端粒长度的缩短及端粒酶活性表达与细胞癌变密切相关。
- 周宏远肖林严军陈蔚蔚刘永惠周清华
- 关键词：恶性肿瘤端粒端粒酶癌变
- 肺癌染色体端粒行为异常与癌变的关系被引量：1
- 2000年
- 严军周宏远肖林周清华王允张文安翟朝阳
- 关键词：肺癌癌变
- 端粒酶基因和bcl-2在肺癌组织和细胞株中的相关性研究被引量：1
- 2002年
- 目的 研究肺癌及相应的癌旁组织、肺癌细胞株中端粒酶基因和抗凋亡基因bcl 2的关系 ,以期阐明端粒酶基因在肺癌的发生、发展中的表达及抗凋亡基因对端粒酶的调控机理 .方法 采用TRAP ,RT PCR及LSAB的方法研究了 38例肺癌及相应的癌旁组织、肺癌细胞株的端粒酶活性、hTR ,hTERT及bcl 2的表达 .结果 82 .3%的肺癌组织及 3种肺癌细胞株均表达端粒酶阳性 ,而癌旁组织及人胚肺成纤维细胞株全为端粒酶阴性 .38例癌组织中 ,34例表达hTR(89.4 %) ,其中 9例hTR在肿瘤组织的表达比其相应的正常组织高 ,其bcl 2表达也较高 .36例表达hTERT(94 .7%) .而在相应的癌旁组织中 ,34例表达hTR ,但只有 3例表达hTERT(7.8%) ,且表达hTERT的 3例患者其癌旁组织的hTERT表达比其相应肿瘤组织低 .hTERT阳性的癌旁组织其bcl 2表达也高于hTERT阴性的癌旁组织 .肺癌细胞株中均有hTR和hTERT的表达 ,而人胚肺成纤维细胞株只表达hTR .结论 肺癌组织中具有较高的端粒酶活性 ,说明端粒酶在肺癌的发生发展中起着重要的作用 .hTERT的表达在肿瘤组织和正常组织中有显著的差异 (P <0 .0 5 ) .hTR在正常组织和肿瘤组织均有较高的表达 ,bcl 2的表达与端粒酶基因有着较高的相关性 .
- 陈蔚蔚周宏远熊小熊覃扬孙芝玲刘渊周清华孙泽芳
- 关键词：端粒酶基因抗凋亡基因肺癌
- 肺癌组织端粒酶活性的定量研究及其临床意义被引量：8
- 2000年
- 目的 研究肺癌组织中端粒酶活性的表达及其临床意义。方法 采用定量放射端粒重复序列扩增法 (TRAP)检测 74例肺组织中 ( 4 5例为NSCLC ,15例SCLC ,结核 7例 ,炎性假瘤 7例 )端粒酶的活性。结果 NSCLC端粒酶阳性率为 73 .3 % ,且活性较弱 ( 172TPG) ,SCLC端粒酶的阳性率为 93 .3 % ,且活性较强 ( 2 88TPG)。结核与炎性假瘤端粒酶活性全为阴性。SCLC端粒酶活性显著高于NSCLC(P <0 .0 5 ) ,且酶的活性水平与肺癌组织分化程度、肿瘤大小、淋巴结转移及临床分期有密切关系 (P <0 .0 5 )。结论 端粒酶可能是判断肺癌预后不良的指标之一。
- 陈蔚蔚周宏远周清华熊小熊张洁
- 关键词：肺肿瘤端粒酶活性
- 人肺癌染色体端粒联合的比较观察被引量：2
- 2000年
- 目的 探讨人肺癌细胞染色体端粒联合异常的规律。方法 应用染色体制备法检测人肺腺癌细胞株A5 49细胞、15例肺癌患者外周血淋巴细胞的端粒联合率 ,并以 15例良性疾病和正常人作对照。结果 肺癌组和非癌对照组的端粒联合率存在显著差异 (P <0 .0 0 5 ) ,人肺腺癌细胞株A5 49中端粒联合率显著高于肺癌组和非癌对照组 (P <0 .0 0 5 ) ;肺癌组细胞染色体中B、C、D组的端粒联合率明显高于非癌对照组 (B组P <0 .0 5 ,C、D组P <0 .0 0 5 )。结论 与非癌对照组比较 ,人肺腺癌细胞株A5 49及肺癌患者外周血淋巴细胞染色体存在着更显著的端粒联合现象 ,且多发于染色体的B、C、D组 ,可为肺癌诊断和预后的进一步研究提供有价值的细胞遗传学资料。
- 严军周宏远肖林周清华吴纯清赵峰王允
- 关键词：肺肿瘤染色体细胞遗传学
- 大鼠睾丸特异表达新基因Lrrc18的克隆及表达谱分析
- 2006年
- 运用数据库消减杂交（Digital Differential Display,DDD）分析方法,从大鼠睾丸组织中分离出了一个新基因-Lrrc18（GenBank登录号：BC081908）.该基因定位于大鼠染色体16p16区带,gDNA在染色体上跨度40900bp,含6个外显子,编码一个含256个氨基酸的蛋白,带有4个LRR（leucire-rich repeat domain）结构域.Northern杂交结果显示Lrrc18只在睾丸中表达.对出生后3～56 d不同时期的大鼠睾丸的Lrrc18基因的表达进行检测,结果表明在大鼠出生后21 d时开始在睾丸组织中可检测到Lrrc18的mRNA表达,以后其表达量逐步上升,到42 d时达到最大值.该结果提示：Lrrc18基因在精子的发生过程中可能起重要作用.
- 周延凯聂东宋
- 关键词：精子发生
