江苏省自然科学基金(BK2009031)
- 作品数：8 被引量：25H指数：3
- 相关作者：马正良顾小萍刘成龙张娟任炳旭更多>>
- 相关机构：南京大学医学院附属鼓楼医院南京中医药大学南京医科大学更多>>
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- 鞘内注射不同剂量硫酸镁对小鼠骨癌痛的影响被引量：3
- 2012年
- 目的评价鞘内注射注射不同剂量硫酸镁对小鼠骨癌痛的影响。方法雄性C3H／HeJ小鼠288只，8～10周，体重18～22g，采用随机数字表法，将其随机分为6组（n=48）：对照组（c组）、假手术组（S组）、骨癌痛＋5出人工脑脊液组（BCP组）、骨癌痛＋14．4ugMgSO4组（M1组）、骨癌痛＋43．2ugMgSO4组（M2组）和骨癌痛＋86．4ugMgSO4组（M3组）。S组右侧股骨骨髓腔内仅注入20ul a-MEM；BCP组、M1组、M2组和M，组注入含有2×10^5个肿瘤细胞的20ul a-MEM制备小鼠骨癌痛模型，各组在接种肿瘤细胞后第14天分别定时鞘内注射人工脑脊液5ul、MgSO4 14．4ug／5ul、43．2ug/5ul、86．4ug／5ul。分别于给药前0．5h（T0）、给药后0．5、2、4、8h（T1～4）时测定机械缩足反射阈值（PWMT）和热缩足反射潜伏期（PWTL），于T0-4时各组随机取8只小鼠处死取脊髓腰膨大，采用免疫组化法检测脊髓含2B亚基的NMDA受体（NR2B）的表达。结果与C组和s组比较，BCP组、M1组、M2组和M1组T0-4时PWMT和PWTL降低，脊髓NR2B表达上调（P〈0．05）；与BCP组比较，M2组和M，组T1-3时PWMT和PWTL升高，脊髓NR2B表达下调（P〈0．05）；与M2组比较，M3组T1～3时PWMT和PWTL升高，脊髓NR2B表达下调（P〈0．05）。结论鞘内注射硫酸镁可减轻小鼠骨癌痛，其效应呈剂量依赖性。
- 孙玉娥马正良郑亚国张娟顾小萍
- 关键词：硫酸镁骨肿瘤疼痛
- 大麻素CB2受体在小鼠骨癌痛形成中的作用被引量：3
- 2012年
- 目的 探讨大麻素CB2受体在小鼠骨癌痛形成中的作用.方法 将C3H/HeJ小鼠84只以数字随机法分为肿瘤组（T组,n =30）、给药组（J组,n=12）、溶媒组（D组,n=12）和假手术组（S组,n =30）.将含2×105个NCTC2472纤维肉瘤细胞的混悬液（含最低有效培养基α-MEM）注射到C3H/HeJ小鼠右侧股骨远端骨髓腔制作骨癌痛模型,S组小鼠注入不含肿瘤细胞的α-MEM.所有小鼠均于接种前及接种后第5、7、10、14天检测疼痛行为学指标,包括机械缩足阈值（PWMT）和热缩足潜伏期（PWTL）.J组和D组分别于鞘内注射2μg大麻素CB2受体激动剂JWH015和4％二甲基亚砜（DMSO）,注药体积均为5.0μl.两组于鞘内注射后1、6、12、24、48和72 h测定痛行为学.选取接种后5、7、10、14 d和给药后12 h的各组小鼠提取脊髓腰膨大进行免疫印迹检测CB2表达水平,取材均于行为学测定后进行.结果 （1）行为学测定：小鼠于接种后7d,PWMT为（1.27±0.28）g（P＜0.05）,此后逐渐下降,于接种后14 d达到（0.53±0.20）g,鞘内注射JWH015后6 h PWMT升高至（1.00±0.20）g（P＜0.05）,12 h达到高峰,PWMT为（1.40±0.39）g,48 h后逐渐衰减,72 h回复至给药前水平；小鼠于接种后10 d出现热痛敏,PWTL为（16.9±0.4）s（P＜0.05）,接种后14 d为（11.5±0.7）s,鞘内注射JWH015后6 hPWTL回升至（15.7±1.9） g（P＜0.05）,12 h达到（18.6±2.3）g,72 h回复至给药前水平（12.8±0.6）g（P＞0.05）.（2） Western印迹结果：从接种后5d开始,CB2与β-肌动蛋白比值逐渐增高.与接种后5 d CB2/β-肌动蛋白（0.190±0.010）相比,接种后14 d比值增加到0.660±0.010 （P ＜0.05）；与D组0.903±0.006比较,鞘内注射JWH015后12hJ组CB2/β-肌动蛋白降低至0.510±0.010 （P ＜0.05）.结论 大麻素CB2受体在骨癌痛形成中具有重要作用.
- 王丹任炳旭刘成龙朱洁张娟张威梅凤美顾小萍马正良
- 关键词：受体大麻酚骨肿瘤小鼠
- 鞘内注射钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ抑制剂KN93对骨癌痛小鼠痛行为的影响被引量：5
- 2010年
- 目的 探讨钙/钙调蛋白依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）在骨癌痛发病机制中的作用.方法 雄性C3H/HeN小鼠40只分为5组：假手对照Sham组（S组n=8）,癌痛模型对照Control组（C组n=8）和KN93 Treat组（T1组n=8、T2组n=8、T3组n=8）.C组和T组（T1、T2、T3）小鼠左侧股骨远端骨髓腔接种溶于α-MEM的NCTC 2472纤维肉瘤细胞,建立骨癌痛模型;S组小鼠骨髓腔注入不含NCTC 2472细胞的α-MEM.在术后的第14天S组和C组鞘内注射20%DMSO 5μl,T1、T2、T3组分别鞘内注射溶于20%DMSO的KN93 15 nmol/5μl、30nmol/5μl、60nmol/5μl.各组于给药前及给药后的0.5 h、2h、4h、8 h检测小鼠的自发抬足次数、机械性缩足反射阈值（PWMT）和热缩足反射潜伏期（PWTL）.结果 鞘内给予KN9315 nmol对骨癌痛小鼠痛行为无影响,鞘内给予KN93 30nmol、60nmol能剂量依赖性减轻小鼠痛行为反应,给药后0.5 h 2组小鼠自发抬足次数[（7.25±1.49）次、（4.12±1.36）次]比C组[（11.62±1.92）次]降低,PWMT[（1.28±0.14）g、（1.75＋0.46）g]、PWTL[（14.64±2.12）s、（16.85±1.61）s]比C组[（0.47±0.16）g、（11.32±1.68）s]升高,差异有显著性（P＜0.05）.作用2h达到高峰,维持到4h左右,8 h后基本消失.结论 CaMKⅡ在骨癌痛的发病中起重要作用,鞘内注射KN93能够剂量依赖性改善骨癌痛小鼠的痛行为.
- 刘成龙马正良梁樱彭良玉任炳旭刘晓杰顾小萍
- 关键词：骨癌痛小鼠
- 鞘内注射硫酸镁对骨癌痛小鼠痛行为的影响被引量：4
- 2012年
- 目的观察鞘内注射硫酸镁（MgSO。）对骨癌痛小鼠痛行为的影响。方法雄性C3H／HeJ小鼠56只，8～10周龄，体质量18～22g，随机分为7组（n=8）：假手术Sham组（s组）、癌痛模型对照Con—trol组（C组）和MgSO。及吗啡Treat组（T1—T5组）。C组和T组（T1-T5组）小鼠右侧股骨远端骨髓腔接种含有2×10^5个NCTC2472纤维肉瘤细胞的20μlα—MEM，建立骨癌痛模型；S组小鼠骨髓腔注入不含NCTC2472细胞的20μlα-MEM。在接种肿瘤细胞后第14天s组和C组鞘内注射5μl人工脑脊液，T1-T5组分别鞘内注射溶于人工脑脊液的MgS0414．4μg／5μl、43．2μg／5μl、86．4μg/5μl、吗啡0．36μg／5μl、MgS0414．4μg-吗啡0．36μg／5μl。各组于给药前0．5h及给药后的0．5h、2h、4h、8h检测小鼠的自发抬足次数、机械性缩足反射阈值（PWMT）和热缩足反射潜伏期（PWTL）。结果鞘内给予MgSO4 14．4μg、吗啡0．36μg对骨癌痛小鼠痛行为无影响，鞘内给予MgsO4 43．2μg、86．4μg能剂量依赖性减轻小鼠痛行为反应，同时MgSO。14．4μg．吗啡阈下剂量0．36μg组合也减轻小鼠痛行为反应，给药后0．5h各组小鼠自发抬足次数[（10．08±1．66）次、（7．35±1．36）次、（10．54±1．32）次]比C组[（13．05±2．06）次]降低，PWMT[（0．81±0．22）g、（1．33±0．19）g、（0．93±0．26）g、PWTLI（10．57±1．53）s、（13．12±1．71）s、（11．46±1．83）SI比C组[（0．42±0．23）g、（8．87±1．27）s]升高，差异有统计学意义（P〈0．05）。作用2h达到高峰，维持到4h左右，8h后基本消失。结论鞘内注射MgSO4能够剂量依赖性改善骨癌痛小鼠的痛行为；同时MgSO。可增强阈下剂量吗啡的镇痛作用。
- 孙玉娥马正良郑亚国张娟杨许丽朱洁顾小萍
- 关键词：骨癌痛硫酸镁行为学小鼠
- 脊髓钙／钙调蛋白依赖性蛋白激酶II—NR2B信号通路参与小鼠骨癌痛的形成被引量：6
- 2012年
- 目的探讨鞘内注射钙／钙调蛋白依赖性蛋白激酶II（CaMKII）抑制剂KN93对骨癌痛小鼠脊髓NR2B蛋白表达的影响及机制。方法SPF级雄性C3J／HeJ小鼠36只，采用随机数字表法分为3组：假手术组（S组n=8）、骨癌痛组（BP组n=8）和KN93组（K组n=20）。BP组和K组采用股骨远端骨髓腔注射20μl含NCTC2472纤维肉瘤细胞的α—MEM的方法制备骨癌痛模型，S组骨髓腔注入不含NCTC2472细胞的同体积α—MEM。K组于接种肿瘤细胞后14d鞘内注射溶于20％DMSO的KN9360nmol／5μl，BP组和S组鞘内注射20％DMSO5μl。分别于肿瘤细胞接种前1d、鞘内注射KN93或溶媒前1h、注射后1，2，4，24h（T0-5）时各组随机取8只小鼠，采用vonFrey丝测定机械痛阈，并于各时点随机取3只小鼠处死取脊髓L3～5节段，采用Westernblot法测定NR2B蛋白的表达。结果与s组[机械痛阈（1．78±0．31）g、NR2B（0．33±0．04）]相比，除K组1r3时机械痛阈差异无统计学意义（P〉0．05）外，BP组[（0．50±0．11）g]和K组[（0．52±0．10）g]机械痛阈均降低（P〈0．05），BP组（1．78±0．34）和K组T2～5[分别为（1．11±0．14）、（0．73±0．03）、（1．11±0．15）、（1．89±0．32）]脊髓组织NR2B蛋白表达均上调（P〈0．05）；与BP组相比，K组T2～4机械痛阈升高，NR2B蛋白表达下调；与给药前T1相比，除K组T2～4机械痛阈升高外，各组各时点该指标差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论鞘内注射KN93缓解小鼠骨癌痛的同时降低小鼠脊髓NR2B蛋白表达，CaMKII—NR2B信号通路可能参与了骨癌痛的形成。
- 梁樱刘成龙张娟杨许丽朱洁申艳顾小萍马正良
- 关键词：骨癌痛
- 鞘内注射代谢性谷氨酸受体亚型5拮抗剂对骨癌痛小鼠痛行为及脊髓水平星形胶质细胞活化的影响被引量：3
- 2011年
- 目的 探讨代谢性谷氨酸受体亚型5（mGluR5）拈抗剂MTEP的抗癌痛作用及其机制.方法 C3H/HeNCrlVr雄性小鼠60只,随机分为：（1）正常组：正常饲养21d;（2）MTEP＋Tumor组：癌痛组从第14d开始鞘内注射MTEP150nmol,1次/d,共7次;（3）生理盐水＋Tumor组：以等体积的生理盐水代替MTEP;（4）MTEP＋Sham组：用等剂量MTEP给予假手术组;（5）生理盐水＋Sham组：用等体积的生理盐水给予假手术组.每组12只小鼠.用热辐射刺激仪测定缩足潜伏期（PWTL）.各组小鼠均在第21d行为学测试后取脊髓标本,分别应用Real-time PCR和western blot检测胶质细胞纤维酸性蛋白（GFAP）mRNA及蛋白的表达.结果 各组小鼠基础PWTL差异无统计学意义（P＞0.05）.在术后14d,与正常组相比,假手术组PWTL差异无统计学意义（P＞0.05）,而癌痛组PWTL明显降低（P＜0.05）.在术后21 d,和正常组相比,MTEP＋Sham组、生理盐水＋ShaT组PWTL、脊髓GFAP表达差异均无统计学意义（P＞0.05）;生理盐水＋Tumor组PWTL[（6.18±1.29）s]明显低于正常组[（15.91±1.65）s]、生理盐水＋Sham组[（16.57±1.86）s]和MTEP＋Sham组[（17.05±2.43）s]（P＜0.05）,脊髓水平GFAP表达则高于上述3组;MTEP＋Tumor组PWTL[（9.39±1.94）s]高于生理盐水＋Tumor组,脊髓水平GFAP表达则低于生理盐水＋Tumor组（P＜0.05）.结论 鞘内注射MTEP具有抗癌痛作用,抑制脊髓水平星形胶质细胞活化可能是其机制之一.
- 任炳旭顾小萍朱炜郑亚国刘成龙王丹马正良
- 关键词：骨癌痛代谢性谷氨酸受体胶质细胞纤维酸性蛋白
- 骨癌痛形成过程中小鼠脊髓水平代谢性谷氨酸受体亚型3和5的表达变化被引量：3
- 2011年
- 目的:研究骨癌痛形成过程中脊髓水平代谢性谷氨酸受体亚型3和5(mGluR3和mGluR5)的表达变化。方法:将C3H/HeNCrlVr雄性小鼠88只,随机分为11组:C组为正常对照组;S4、S7、S10、S14、S21组分别为假手术后4d、7d、10d、14d、21d的假手术组;T4、T7、T10、T14、T21组分别为接种NCTC 2472纤维肉瘤细胞术后4d、7d、10d、14d、21d的肿瘤组。各组小鼠在相应时间点用热辐射刺激仪测定缩足潜伏期(PWL),随后处死大鼠,取腰膨大脊髓标本,分别应用Real-time quan-titative RT-PCR和Western Blot技术研究mGluR3 and 5的表达变化。结果:与正常对照组PWL值(15.92±1.65 s)相比,肿瘤组小鼠的PWL值(4d:13.24±1.02s;7d:11.30±1.09s;10d:9.12±0.54s;14d:7.79±0.77s;21d:6.36±0.59s)随着时间的推移呈进行性下降趋势,脊髓组织mGluR 3和5 mRNA及蛋白表达逐渐增加(P<0.05);而假手术组小鼠的PWL值(4d:13.33±1.44S;7d:11.28±0.61s;10d:15.47±2.46s;14d:15.69±1.98s;21d:15.68±1.68s)仅在术后4d、7d这两个时间点有所降低,并伴有脊髓mGluR 3和5 mRNA及蛋白表达增加(P<0.05);与假手术组相比,肿瘤组小鼠PWL值和脊髓mGluR 3和5 mRNA及蛋白表达水平在术后4d、7d这两个时间点没有明显差异,但在术后10d、14d、21d时间点肿瘤组小鼠PWL值明显低于同时间点的假手术组,同时脊髓组织mGluR 3和5 mRNA及蛋白的表达水平高于假手术组(P<0.05)。结论:在骨癌痛形成过程中脊髓水平mGluR3和5受体激活可能是机体自身调节痛信号转导的机制之一。
- 任炳旭顾小萍刘成龙王丹马正良
- 关键词：骨肿瘤代谢性谷氨酸受体
- KIF17：一个N-甲基-D-天冬氨酸受体的转运蛋白被引量：1
- 2012年
- 背景KIF17属于驱动蛋白2（Kinesin-2）家族成员，是沿微管由负极向正极移动的树突特异性驱动蛋白，可运转多种大分子物质。目的就近几年来关于KIF17转运N-甲基-D-天冬氨酸（N-methyl-D-aspartate，NMDA）受体的具体机制作一简要综述。内容KIF17在神经细胞内的物质转运作用已被广泛研究，其最主要的作用是转运NMDA受体的2B亚基（NR2B）（形成突触可塑性的最主要的物质），KIF17通过碳末端结构域与大型支架蛋白Mintl结合而转运NR2B。到达树突末端后由钙离子／钙调素依赖性蛋白激酶Ⅱ（CaMKⅡ）对KIF17羧基端尾部结构域丝氨酸第1029位点（Ser-1029）的磷酸化可以使KIF1释放出NR2B。另外KIF17还在SpatiM蛋白等的转运、上皮细胞的形态发生中起重要作用。趋向充分了解KIF17与NR2B在疼痛形成中的调节机制可为临床预防和治疗疼痛提供新的思路。
- 朱洁刘成龙马正良
- 关键词：NR2B微管树突
