广东省自然科学基金(20013137)
- 作品数：28 被引量：137H指数：8
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- 相关机构：中山大学中山大学附属第三医院上海交通大学更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 阿尔茨海默病患者扣带回后部各向异性与葡萄糖代谢关系研究被引量：4
- 2008年
- 目的用磁共振扩散张量成像(DTI)研究阿尔茨海默病患者扣带回后部各向异性损害的特点及其与葡萄糖代谢改变的关系。方法对16例AD患者和12例年龄及性别相当的健康老年人行DTI、T1液体衰减反转恢复序列(FLAIR)及T2-FLAIR检查,测量扣带回后部部分各向异性分数值(FA)和平均弥散度(MD),分析FA、MD值与MMSE评分之间的相关关系;正电子发射计算机断层摄影(PET)观察扣带回后部葡萄糖代谢改变,并分析FA、MD与葡萄糖代谢改变的关系。结果与对照组相比,AD患者扣带回后部的FA值显著降低(P=0.018),MD值显著升高(P=0.020),葡萄糖代谢率显著降低(P=0.020);MD值与葡萄糖代谢率呈负相关(r=-0.700,P=0.05),而FA值与葡萄糖代谢率无相关关系(r=-0.054,P=0.844)。结论AD患者表现为扣带回后部各向异性损害,且损害程度与葡萄糖代谢率呈负相关;这种损害反应了AD病理机制中皮质-皮质及皮质-皮质下联系的丢失;扣带回后部FA、MD值可以用来监测疾病的进展情况及评价AD治疗药物的临床疗效。
- 段金海汪华侨陈少琼徐杰林贤康庄姚志彬
- 关键词：阿尔茨海默病磁共振扩散张量成像各向异性分数
- Aβ_(42)重组多价DNA疫苗的构建及诱导Aβ抗体的产生被引量：7
- 2005年
- 目的:构建β-淀粉样蛋白(Aβ42)的多价重组DNA疫苗,确定是否诱导较高滴度Aβ抗体的产生.方法:PCR法从Tg2576转基因鼠基因组DNA中扩增人Aβ42基因片段;在Aβ42基因的5′端引物延伸连接IgGк轻链信号肽序列;利用GSGGSGlinker基因串连两段Aβ42基因片段;将产物克隆入pcDNA3.1表达载体,分别构建pcDNA3.1Aβ42,一价分泌型pcDNA3.1-sAβ42,二价分泌型pcDNA3.1-s2×Aβ42载体;转染COS-7细胞,免疫印迹检测Aβ42的表达;im接种BALB/c鼠,ELISA法测定抗体效价;免疫组织化学和Aβ42肽抗原的中和实验检测抗体与Tg2576鼠脑切片中的老年斑的结合.结果:测序证实所构建的pcDNA3.1-Aβ42,pcDNA3.1s-Aβ42,pcDNA3.1-s2×Aβ42载体插入序列正确;WesternBlotting证实在COS-7细胞中表达相应的蛋白.经6轮,22wk加强免疫后,pcDNA3.1-Aβ42疫苗不能产生Aβ抗体、pcDNA3.1sA-β42接种后产生较低的Aβ抗体(<1∶1000),pcDNA3.12×Aβ42第1次加强免疫后即产生抗体,抗体滴度随接种次数增多而升高,22wk时抗体平均滴度达1∶5000以上,可以与转基因鼠Tg2576脑切片中的老年斑结合,并能被Aβ42肽抗原特异性中和.结论:二价分泌型pcDNA3.1-s2×Aβ42疫苗,可在动物体内产生高效价的特异Aβ抗体.
- 张革邹俊涛汪华侨李国营姚志彬
- 关键词：淀粉样Β蛋白疫苗DNA
- Aβ_(1-15)肽疫苗接种改善AD转基因模型Tg2576鼠的学习记忆能力被引量：3
- 2006年
- 目的探讨Aβ1-15亚单位疫苗接种对AD转基因模型鼠学习记忆能力的影响。方法将24只AD转基因模型鼠(Tg2576鼠)随机分为Aβ1-15组、Aβ42组和对照组,每组8只。9月龄开始分别皮下接种相应的疫苗,每只鼠共6次(抗原量0.1mg/次),接种时程6个月;对照组皮下注射等量PBS加佐剂。疫苗接种前用Y-迷宫作行为学测试,接种后用Morris水迷宫测作行为学测试。结果疫苗接种前,各组Tg2576鼠的空间学习记忆能力无显著性差异(P>0.05);疫苗接种6个月后,Aβ1-15组,Aβ42组鼠的空间学习记忆能力明显高于对照组鼠(P<0.01);Aβ1-15组鼠与Aβ42组鼠相比差异无显著性(P>0.05)。结论Aβ1-15亚单位疫苗接种和其全肽疫苗一样可以改善Tg2576鼠的学习记忆能力,因而可以替代其全肽疫苗用于AD免疫治疗的进一步研究。
- 李国营汪华侨胡金家徐杰姚志彬
- 关键词：老年性痴呆Β-淀粉样蛋白行为学测试
- 阿尔茨海默病的免疫治疗被引量：1
- 2006年
- 阿尔茨海默病(AlzheimerIsdisease,AD)是一种中枢神经系统退行性疾病,不仅导致患者的认知、行为、生活能力的全面障碍,严重影响生活质量,也为家庭和社会带来沉重的负担。迄今为止,AD一直缺乏有效的治疗方法。1999年出现的免疫治疗为AD病人带来了希望,本文综述了AD免疫治疗的方法,机制和不同阶段的认识,展望了免疫治疗的进一步发展。
- 吕晓汪华侨姚志彬
- 关键词：阿尔茨海默病Β淀粉样蛋白疫苗免疫治疗
- Aβ1-15疫苗预防Tg2576小鼠脑病理变化和认知退化的研究被引量：3
- 2008年
- 探讨Aβ亚单位疫苗接种后对Tg2576小鼠脑病理变化和认知退化的预防作用．32只5月龄Tg2576小鼠随机分成4组：对照组（只接种佐剂），Aβ42组（接种Aβ42疫苗），Aβ1-15小组（接种Aβ1-15疫苗）和Aβ36-42组（接种Aβ36-42疫苗），每组8只,3组接种疫苗小鼠的血清抗Aβ42抗体滴度比对照组显著增高；脑组织匀浆内也可检测到少量抗体．Morris水迷宫实验结果显示Aβ42组、Aβ1-15小组和Aβ36-42组与对照组小鼠的行为学有明显改善．取各组2只小鼠的脾细胞培养，经Con A或各自抗原刺激后，3组疫苗免疫后小鼠脾细胞增殖显著高于对照组；Aβ42组，IL-4和IL-10相对较高，而IL-2和INF-γ相对较低；Aβ1-15小组中IL-4和IL-10较高；Aβ36-42组IL-2和INF-γ较高．免疫组织化学法显示对照组小鼠脑皮质与海马部位有大量老年斑，而Aβ42组和Aβ1-15组脑内无老年斑出现，Aβ36-42组小鼠脑内有少量老年斑．实验证明Aβ1-15亚单位疫苗可防止Tg2576小鼠认知行为的退化，阻止Tg2576小鼠脑内Aβ沉积和老年斑的形成．
- 胡金家李国营汪华侨林贤姚志彬
- 关键词：Β-淀粉样肽老年斑
- 以β-淀粉样蛋白为靶的单价及二价真核表达载体的构建和表达被引量：2
- 2006年
- 目的构建以β-淀粉样蛋白为靶单价及二价真核表达载体pcDNA3.1-Aβ1-42、pcDNA3.1-Aβ42×2,并在真核细胞中表达目的蛋白。方法PCR法扩增编码β-淀粉样蛋白的目的基因,利用基因克隆技术构建单价及二价真核表达载体;应用酶切及测序鉴定真核表达载体构建成功后,用Westernblot和细胞免疫组化染色检测其在真核细胞中的表达。结果相应的双酶酶切能够获得插入的目的基因片段(分别为137bp和269bp),测序未发现突变;Westernblot结果可见两条约为4ku和8ku的条带,细胞免疫组化染色可见阳性细胞。结论单价及二价真核表达载体构建成功;真核表达载体能在真核细胞中表达出目的蛋白。
- 王烈峰汪华侨张革邹俊涛谢瑶袁群芳姚志彬
- 关键词：老年性痴呆Β-淀粉样蛋白重组质粒真核表达载体
- Aβ亚单位疫苗接种Tg2576鼠对脑内淀粉样斑块沉积和行为学的影响被引量：7
- 2006年
- 目的探讨Aβ亚单位疫苗接种对Tg2576鼠淀粉样斑块沉积和行为学损害的影响。方法24只Tg2576鼠随机分为Aβ1-15组、Aβ36-42组、Aβ42组和对照组，9月龄时开始分别接种相应的疫苗，间接ELISA法检测血清和脑匀浆上清液特异性抗体的滴度；免疫组织化学染色观察脑内淀粉样斑块沉积；Morris水迷宫测试行为学变化；组织染色观察脑、肝、脾、肺和肾的组织学变化。结果第2次接种后各实验组即明显有抗Aβ42抗体产生，抗体滴度随接种次数的增加而增加。停止接种，抗体滴度下降。脑匀浆上清液中也检测出低滴度的抗Aβ42抗体；疫苗接种6个月后，Aβ42、Aβ1-15和Aβ36-42组鼠皮层和海马淀粉样斑块沉积量与对照组相比均明显减少（P〈0．01），其认知能力显著高于对照组（P〈0．01）。Aβ1-15组和Aβ42组相比差异无显著性（P〉0．05），但优于Aβ36-42组（P〈0．01）；各组鼠的脑、肝、脾、肺和肾均未发现病理变化。结论邯亚单位疫苗接种能有效阻抑Tg2576鼠淀粉样斑块形成和认知功能退化，未发现不良反应。提示用Aβ1-15疫苗替代其全肽疫苗而用于AD免疫治疗，值得进一步研究。
- 李国营汪华侨胡金家林贤徐杰姚志彬
- 关键词：Β-淀粉样蛋白淀粉样斑块
- Fmoc固相直接法合成Aβ_(1-15)肽疫苗及其免疫活性被引量：5
- 2006年
- 【目的】探讨实验室合成Aβ1-15肽疫苗的方法,并对其进行鉴定。【方法】选取Aβ42主要包含B细胞抗原决定簇的片段Aβ1-15,采用8分支多重抗原肽系统,以Fmoc固相直接法合成MAPAβ1-15;用MAPAβ1-15疫苗免疫接种C57BL/6小鼠,ELISA检测血清特异性抗Aβ抗体。【结果】用Fmoc法直接合成方法成功制备MAPAβ1-15疫苗,质谱检测其主要离子峰的相对分子质量为15458,与理论相对分子质量15451十分接近,但还有其它不同分子质量的离子峰存在。以合成的MAPAβ1-15免疫C57BL/6小鼠后,可产生高滴度的特异性抗Aβ42抗体,第3次接种后抗体平均滴度为1:467±196,第5次免疫接种后,平均滴度为1∶4367±1120。对照组的血清抗体检测基本无明显变化。【结论】Fmoc固相直接法可成功合成出MAPAβ1-15,合成出的MAPAβ1-15具有很好免疫活性。
- 杨学森汪华侨袁群芳谢瑶姚志彬叶小舟吴继明邹爱国
- 关键词：阿尔茨海默病
- 接种Aβ_(42)全肽疫苗恒河猴的特异性体液免疫应答被引量：8
- 2005年
- 目的: 观察恒河猴接种Aβ42肽疫苗后的特异性抗体的产生。方法: 将 5只雄性恒河猴分别在 0、2、6、10、14、18、22wk肌内注射Aβ42肽疫苗; 用ELISA法检测恒河猴血清抗Aβ42抗体水平及IgG亚类; 用Westernblot检测血清抗Aβ42抗体的特异性; 免疫组化染色法观察抗血清对Tg2576转基因小鼠脑组织中Aβ斑的识别。结果: 疫苗接种后第 8周, 恒河猴血清中出现明显的抗Aβ42抗体, 抗体水平随着接种次数的增加而升高, 第 24周达 1∶4 320, 以后抗体水平开始下降。产生的抗Aβ42抗体以IgG1和IgG2为主 (IgG2 /IgG1 >1)。血清抗Aβ42抗体具有高度特异性, 可识别Tg2576转基因小鼠脑组织中的Aβ斑。结论: Aβ42肽疫苗可有效地诱导恒河猴产生特异性体液免疫应答。
- 李少兵汪华侨林贤徐杰姚志彬
- 关键词：阿尔茨海默病Β淀粉样肽体液免疫应答恒河猴
- AD转基因模型Tg2576鼠阳性子鼠的病理和认知行为变化被引量：8
- 2006年
- 为探讨老年性痴呆(AD)转基因模型Tg2576(hAPPSWE)鼠阳性子一代鼠的病理和行为学变化,确定其是否具有亲代的性状,为AD研究提供理想的动物模型。本研究随机选取我室繁育并鉴定的子一代hAPPSWE基因阳性鼠(hAPPSWE+)和hAPPSWE基因阴性鼠(hAPPSWE-),分别在4、7、9月龄时经Y迷宫及15月龄时经水迷宫检测其行为学变化和脑内病理变化,并对皮质和海马的淀粉样斑块进行定量研究。结果显示:(1)4月龄和7月龄的子一代hAPPSWE+鼠的空间辨别学习记忆能力与hAPPSWE-鼠相比,差异无显著性(P>0.05),但9月龄时两者之间的差异有高度显著性(P<0.01);(2)在4月龄和7月龄的子一代hAPPSWE+鼠的脑组织切片上免疫组化染色未观察到淀粉样斑块,9月龄时均观察到明显的淀粉样斑块沉积,但hAP-PSWE-鼠无论在任何1个月龄均未观察到淀粉样斑块沉积;(3)定量结果显示9月龄的子一代hAPPSWE+鼠的皮层淀粉样斑块占整个皮层面积的0.21%,海马的淀粉样斑块占海马面积的0.14%,而15月龄时其淀粉样斑块的数量和面积增加明显,占整个皮层面积的4.26%,海马的淀粉样斑块占海马面积的2.51%。上述结果表明子一代hAPPSWE+鼠的行为学变化及脑内淀粉样斑块出现的时间、部位、类型与亲代一致。因此,子一代hAPPSWE+鼠和其亲代一样可用于AD研究,本实验的定量结果也为评价AD的干预治疗效果提供了参考数据。
- 李国营汪华侨胡金家徐杰姚志彬
- 关键词：ALZHEIMER病动物模型病理
