国家自然科学基金(30901063)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：肖一红王彤彤孔宁高继明马晓春更多>>
- 相关机构：山东农业大学西北农林科技大学潍坊出入境检验检疫局更多>>
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- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 猪波形蛋白对PRRSV感染Marc-145细胞的抑制作用被引量：3
- 2012年
- 为了研究波形蛋白在介导猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)感染细胞过程中的作用,利用RT-PCR方法从PRRSV非易感细胞系猪肾细胞系PK-15细胞中扩增目的基因,克隆入pET-28a(+)载体,转化大肠杆菌BL21(DE3)中进行诱导表达。表达的重组猪波形蛋白经SDS-PAGE和Western blot鉴定和纯化后免疫新西兰大白兔制备多克隆抗体。利用病毒抑制试验检测重组猪波形蛋白及多克隆抗体在PRRSV感染Marc-145细胞过程中的作用。结果表明,成功扩增猪波形蛋白基因并克隆入pET-28a载体,经诱导后得到高效表达,纯化后免疫兔子产生高价血清抗体(105)。病毒阻断结果表明,猪波形蛋白及多克隆抗体均能阻断PRRSV感染Marc-145细胞。这为以波形蛋白为基础的PRRSV受体阻断抑制剂的研究提供了实验依据。
- 马晓春孔宁高继明王彤彤黄柏成赵钦肖一红周恩民
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒波形蛋白病毒抑制受体阻断
- 高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒TA-12株ORF6基因的克隆、鉴定及真核表达
- 2013年
- 旨在获得HP-PRRSV TA-12(GenBank登录号:HQ416720)分离株ORF6蛋白的高效表达,将HP-PRRSV TA-12分离株的ORF6基因克隆到载体PfastBac HTB,并经转座进入E.coli含有杆状病毒质粒Bacmid的DH10BacTM细胞株,通过蓝白斑筛选和PCR鉴定出阳性重组杆粒,再将提取的重组杆粒Bacmid-ORF6转染昆虫细胞sf9,使其表达ORF6蛋白。经Western blot鉴定,在感染重组杆状病毒后第4天ORF6蛋白表达量最大,达到0.05μg/μL。表达的ORF6蛋白主要存在于细胞质中。
- 王彤彤汪晓飞李心安田国宁刘立涛王广文李宁王方昆李红梅赵孝民肖一红
- 关键词：高致病性猪繁殖与呼吸综合征病毒真核表达
- 高致病性PRRSV对妊娠母猪致病性的研究
- 究利用分离纯化的高致病性PRRSV成功感染妊娠不同时期的母猪，高致病性PRRSV感染后不仅能引起妊娠母猪的各系统病变，组织病理学观察发现妊娠中期、后期除神经系统和生殖系统外两个妊娠时期的病变相同，其主要区别是妊娠后期病毒...
- 肖一红周恩民聂丽杨凤王彤彤王莉莉高继明吕军华刘宁宁刘思当
- 关键词：猪繁殖与呼吸综合征病毒妊娠母猪组织病理学
