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利用DNA免疫技术制备抗登革2型病毒NS2B蛋白多克隆抗体被引量：4: 2010年; 目的构建登革2型病毒(dengue virus serotype2,DV2)非结构蛋白NS2B的真核表达质粒pCAGGS-P7/NS2B,进行DNA免疫,制备小鼠抗NS2B特异性多克隆抗体。方法PCR扩增DV2-NS2B基因片段,构建真核表达载体pCAGGS-P7/NS2B,采用脂质体介导的方法转染Vero细胞,检测目标蛋白的表达。用该表达质粒免疫BALB/c小鼠,制备抗NS2B抗血清。结果成功构建真核表达重组质粒pCAGGS-P7/NS2B,该重组质粒具有良好的免疫原性,免疫小鼠后所获的抗血清,抗体效价达1∶3200,Western blot和间接免疫荧光证实抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。结论通过DNA免疫所制备小鼠抗DV2-NS2B抗血清能特异性地识别DV2-NS2B蛋白。; 刘丽梅陈宗涛高娜田衍平陈炜张俊磊王嘉丽安静; 关键词：登革热病毒病毒非结构蛋白质类近交BALBC

登革热病毒SCID-LO2人鼠嵌合模型的建立与评价被引量：1: 2012年; 目的构建登革热病毒(DENV)感染的小动物模型,为阐明其致病机制提供实验材料。方法向严重联合免疫缺陷(SCID)小鼠腹腔内接种人正常肝细胞(LO2)构建"人鼠嵌合体"动物模型,进而腹腔注射DENV,通过检查病毒在体内分布和主要器官的组织学改变,对DENV感染的动物模型进行评价。结果 SCID小鼠成功移植LO2,并且嵌合小鼠感染DENV后出现病毒血症及严重的器官损伤等表现,但无后肢麻痹等无关症状。结论成功构建了SCID-LO2人鼠嵌合模型,嵌合小鼠能够支持DENV复制,并表现出部分人类感染DENV的临床症状,该小鼠感染模型为研究DENV的致病机制提供了有价值的实验材料。; 盛子洋陈艳雷王娟吴娜范东瀛王湘高娜安静; 关键词：登革热病毒动物模型

ICU导管相关性血流感染病原菌分布及耐药性分析被引量：4: 2014年; 目的分析ICU导管相关性血流感染(CRBSI)病原菌分布及耐药性,为临床合理选用抗菌药物提供依据。方法回顾性分析2010年1月-2013年7月ICU导管相关性血流感染患者的病原菌分布和药敏试验资料,比较排位前5位病原菌的耐药性,采用SPSS13.0进行统计处理。结果 52例导管相关性血流感染患者共检出58株病原菌;其中革兰阳性菌34株占58.62%,革兰阴性菌24株占41.38%;引起导管相关性血流感染的病原菌主要是表皮葡萄球菌、大肠埃希菌、鲍氏不动杆菌、肺炎克雷伯菌、金黄色葡萄球菌,分别占20.68%、13.79%、10.34%、6.89%和6.89%;表皮葡萄球菌对多数抗菌药物的耐药率高于金黄色葡萄球菌,鲍氏不动杆菌与大肠埃希菌对大部分抗菌药物的耐药率在80.00%。结论近3年ICU导管相关性血流感染的病原菌中革兰阳性菌比革兰阴性菌略多;而耐药率则革兰阴性菌较革兰阳性菌高,主要病原菌的耐药率平均高达60.00%;在获得药敏结果前的经验性用药应兼顾革兰阳性菌及革兰阴性菌。; 蒋方国胡业刚阚丽丽; 关键词：重症监护病房导管相关性血流感染病原菌耐药性

重组丙型肝炎病毒核心蛋白的原核表达、纯化和抗体制备被引量：1: 2010年; 本文旨在获得纯化丙型肝炎病毒(HCV)核心蛋白(HCV-C)及抗HCV-C多克隆抗体,为深入研究HCV-C与肝细胞相互作用的分子机制奠定基础。首先以HCV1b亚型HC-J4-91全基因组质粒为模板,聚合酶链反应(PCR)扩增HCV-C基因,构建重组质粒pQE31-HCV-C。融合蛋白经原核表达、纯化后,免疫BALB/c小鼠,制备抗HCV-C多克隆抗体。利用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测抗体效价,蛋白免疫印迹(Westernblot)和间接免疫荧光染色鉴定抗体特异性。结果显示,表达HCV-C的原核表达质粒pQE31-HCV-C构建正确,获得相对分子质量约22000的纯化融合蛋白。ELISA检测重组蛋白免疫小鼠的抗血清效价达1:12800。结果显示,自制的抗HCV-C多克隆抗体能特异性识别HCV-C。本研究获得了纯度较好、原核表达的HCV-C,并成功制备了抗HCV-C多克隆抗体,为深入研究HCV-C的致病机制提供了有实用价值的研究工具。; 陈辉高娜范东瀛郑群王娟安静; 关键词：丙型肝炎病毒核心蛋白原核表达抗体制备

利用甲基纤维素改良的病毒噬斑技术被引量：3: 2012年; 目的探究病毒噬斑实验的方法寻找其改良之处,为实验操作提供方便。方法用甲基纤维素代替琼脂糖覆盖病毒感染后的细胞。结果改良后的新方法在进行登革病毒滴度检测时相较于传统方法,可形成均匀、清晰的噬斑,复孔重复性好,而且噬斑在实验后2年内仍保存完好,与背景形成明显对比,便于复查。结论利用甲基纤维素的病毒噬斑技术,省时省力节约成本且便于操作,是一个值得推广的有价值的实验方法。; 盛子洋王娟吴江漫安静范东瀛; 关键词：登革病毒甲基纤维素

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国家自然科学基金(30872227)