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以积雪苷为脱色剂的新Kligman配方治疗黄褐斑临床观察被引量：10: 2008年; 目的:Kligman配方是以脱色剂(氢醌或曲酸等)、维A酸和皮质类固醇激素联合外用治疗黄褐斑的有效疗法,我们用积雪苷代替传统脱色剂,观察新Kligman配方治疗黄褐斑的疗效。方法:将黄褐斑患者随机分为三组:传统Kligman配方组:21例,外用4%氢醌+0.1%维A酸+0.1%丁酸氢化可的松;新Kligman配方组:30例,外用0.25%积雪苷+0.1%维A酸+0.1%丁酸氢化可的松;对照组:18例,外用积雪苷乳膏基质+0.1%维A酸+0.1%丁酸氢化可的松,每晚外用一次,分别于第4周、8周观察疗效。结果:4周后三组有效率分别为76.19%、53.33%、6.67%,8周后三组有效率分别为85.71%、83.33%、50.00%,新Kligman配方组疗效与传统Kligman配方疗效差别无统计学意义(P>0.05)。结论:本研究表明以积雪苷为脱色剂的新Kligman配方能有效治疗黄褐斑。; 鲁严吴迪王大光; 关键词：黄褐斑积雪苷

人黑素细胞体外培养条件的研究进展被引量：5: 2011年; 从培养人黑素细胞的基本培养液、添加剂、紫外线以及共培养系统等方面综述安全、有效的黑素细胞体外培养条件的研究进展;同时总结了人毛囊无色素性黑素细胞、永生化黑素细胞的培养条件,对色素疾病的基础研究及临床治疗有重要意义。; 周梅华鲁严; 关键词：黑素细胞

新型黑素细胞涂布法移植卡波姆胶载体制备研究被引量：2: 2012年; 目的制备一种以卡波姆（carbomer）胶为基质的载体用于黑素细胞涂布法移植。方法体外培养正常人的黑素细胞,配制卡波姆胶半固体培养基;分别采用台盼蓝染色、噻唑蓝比色法[3-（4,5-Dimethyl-2-Thiazolyl）-2,5-Diphenyl Tetrazolium Bromide,MTT]检测1%卡波姆胶对黑素细胞毒性和增殖的影响;用Transwell培养板检测1%卡波姆胶对黑素细胞迁移的影响。结果 1%卡波姆胶作用0~36 h对黑素细胞活性和增殖无影响;1%卡波姆胶作用12 h后对黑素细胞迁移无影响（P〉0.05）。结论采用卡波姆胶混合黑素细胞,不影响体外培养的黑素细胞功能,可以作为新型黑素细胞涂布法移植载体。; 鲁严周梅华李雪吴迪王大光朱文元; 关键词：黑素细胞

新型涂布法黑素细胞移植系统治疗白癜风临床观察: 2013年; 目的:观察新型涂布黑素细胞移植系统治疗白癜风的临床疗效。方法:配制以人重组粒细胞集落刺激因子(recombinant human granulocyte colony-stimulating factor,rhG-CSF)为主要生长因子的培养基,混合卡波姆凝胶构成一种涂布载体系统用于黑素细胞移植治疗白癜风,按拟定标准进行疗效评估。结果:所有患者均有>20%以上复色,其中6例复色面积超>90%,11例复色70%～80%,15例复色30%～50%,有效率100%。84.4%的患者呈均匀复色,无明显斑驳现象。所有患者未出现不良反应。结论:新型涂布法黑素细胞移植系统治疗白癜风是一种安全、有效的方法。; 鲁严李雪周梅华孙杰吴迪王大光朱文元; 关键词：黑素细胞白癜风

粒细胞集落刺激因子及其受体对人黑素细胞增殖及酪氨酸酶活性的影响被引量：2: 2012年; 目的探讨粒细胞集落刺激因子受体（G-CSFR）在人黑素细胞中的表达及重组人粒细胞集落刺激因子（rhG-CSF）对人黑素细胞生物学作用的影响。方法分别用普通的合成培养基与添加一定浓度rhG-CSF的合成培养基培养健康人的黑素细胞，并对黑素细胞的生长情况及形态进行观察。应用流式细胞仪检测人黑素细胞、中性粒细胞及红白血病细胞（HEL92．1．7）中G-CSFR的表达率。Western印迹、逆转录聚合酶链反应（RT-PCR）方法分别检测黑素细胞、中性粒细胞及HEL92．1．7中G-CSFR蛋白及G-CSFRmRNA的表达情况；噻唑蓝比色法（MTT法）检测不同浓度rhG-CSF（200、400、600、800μg／L）对黑素细胞增殖作用。多巴氧化法检测黑素细胞的酪氨酸酶活性。结果黑素细胞G-CSFR的表达率（76．81％±10．70％）较HEL92．1．7（2．53％±1．54％）明显升高（P〈0．01），略低于中性粒细胞（85．76％±15．71％，P〈0．05）；黑素细胞可表达G-CSFR蛋白和mRNA，不同浓度rhG-CSF处理组间比较，差异无统计学意义（P〉0．05）。黑素细胞G-CSFR蛋白和mRNA的表达水平明显高于HEL92．1．7（P〈0．01），低于中性粒细胞（P〈0．05或P〈0．01）。rhG-CSF在200-800μg，L时均有促黑素细胞增殖的能力，与空白对照组相比，差异有统计学意义（P〈0．01或P〈0．05）；在200-600μg／L范围内呈浓度依赖性（P〈0．01），600μg/L时的效应（164．04％±13．0％）与20μg，L的TPA作用（165．62％±10．6％）相当（P〉0．05）；200-800μg/L的rhG-CSF对黑素细胞酪氨酸酶活性的影响与空白对照组相比差异无统计学意义（P〉0．05）。结论人黑素细胞可表达G-CSFR；rhG-CSF具有促进黑素细胞增殖的作用，但对酪氨酸酶活性无影响。; 周梅华李雪吴迪朱文元鲁严; 关键词：黑素细胞粒细胞集落刺激因子

白癜风皮损边缘黑素细胞线粒体超微结构的电镜观察被引量：9: 2013年; 目的探讨白癜风患者皮损边缘黑素细胞线粒体结构的变化。方法在透射电镜下观察健康对照、进展期白癜风及稳定期白癜风患者皮损边缘黑素细胞形态，体视学方法测量线粒体体密度（Vv）、表面积密度（sv）、数密度（Nv）等参数。结果健康对照组黑素细胞可见大量黑素小体（28．57±3．21），以Ⅲ、Ⅳ期为主，线粒体规则分布在细胞内，结构正常、嵴密集，部分细胞胞质内可见自噬小体。进展期和稳定期白癜风黑素细胞内黑素小体数量减少，单位细胞内黑素小体数量分别为22±6．16和17．43±6．24，其中，Ⅲ期黑素小体显著减少，线粒体大小不一、形态多样，大部分线粒体明显肿胀，嵴模糊、排列紊乱甚至断裂，呈空泡状改变，未见线粒体自噬现象。线粒体形态结构定量研究显示，健康对照组Nv、Vv、sv分别为（7．194±1．434）μm^-3、（4．8±1．2）％、（2．42±0．86）μm^-3；进展期白癜风组Nv、Vv、sv分别为（4．055±0．906）μm^-3、（7．4±2．1）％、（3．58±1．15）μm^-3；稳定期白癜风组Nv、Vv、sv分别为（5．311±0．873）μm^-3、（6．5±1．4）％和（2．82±0．94）μm^-3，组间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论白癜风皮损边缘黑素细胞线粒体受损，且进展期损伤程度大于稳定期。; 李雪周梅华吴迪孙杰朱文元赵文娥鲁严; 关键词：白癜风黑素细胞线粒体

雷帕霉素诱导人黑素瘤细胞M14自噬及Bcl-2、Bax表达的变化被引量：1: 2012年; 目的:对雷帕霉素诱导黑素瘤细胞发生自噬的过程进行观察,并初步探讨其可能的机制。方法:不同浓度雷帕霉素(10、50、100 nmol/L)处理黑素瘤细胞M14,采用MDC荧光染色检测自噬囊泡;免疫细胞化学法检测自噬蛋白LC3B的表达;透射电子显微镜观察黑素瘤细胞超微结构的变化;Western blot检测细胞内凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax的表达;采用罗丹明123染色(Rhodamine 123)流式细胞术检测线粒体膜电位的变化;MTT比色法检测雷帕霉素对M14细胞增殖的抑制作用。结果:经不同浓度的雷帕霉素处理后,MDC阳性细胞数增多,M14细胞发生自噬;自噬蛋白LC3B的表达增强;自噬水平随雷帕霉素浓度的升高而逐渐增强。透射电子显微镜观察可见M14细胞质内有大量独立双层膜结构、线粒体肿胀并出现自噬体、自噬溶酶体。Western blot结果显示雷帕霉素可以下调M14细胞中的凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,同时上调凋亡诱导蛋白Bax的表达。雷帕霉素可引起M14细胞的线粒体膜电位下降,与对照组相比差异显著(P<0.05)。10～100 nmol/L的雷帕霉素明显抑制黑素瘤细胞M14的增殖,该作用呈剂量依赖性,随着药物浓度的升高,抑制率增加,与空白对照组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论:10～100 nmol/L的雷帕霉素可诱导黑素瘤细胞发生自噬,抑制细胞的生长。其机制可能与蛋白Bcl-2和Bax表达水平有关。; 沈景刚周梅华李雪吴迪鲁严; 关键词：黑素瘤细胞雷帕霉素自噬 BAX

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江苏省社会发展科技计划(BS2007072)

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