科技部基础研究重大项目前期研究专项(2001CCA00900)
- 作品数：5 被引量：18H指数：3
- 相关作者：程天印周勇志周金林林矫矫施启顺更多>>
- 相关机构：中国农业科学院上海家畜寄生虫病研究所湖南农业大学更多>>
- 发文基金：科技部基础研究重大项目前期研究专项更多>>
- 相关领域：农业科学医药卫生生物学更多>>
- 亚洲璃眼蜱唾液腺一新基因(GP_(29))的原核表达及产物鉴定被引量：1
- 2006年
- 将吸血诱导的亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因GP29的开放性阅读框插入pGEX-4T-1,转化BL21,表达出一相对质量为53 ku的蛋白,其大小与预计结果一致。蛋白质的肽质量图谱和“1381.7511”肽段序列两方面的结果证明,SDS-PAGE胶板上相对质量为53 ku的蛋白就是由目的基因表达的GST融合蛋白。该蛋白与SwissPROT库中的任何蛋白均有较大差别,可能是一个新功能分子。
- 程天印周金林周勇志施启顺林矫矫
- 亚洲璃眼蜱唾液腺新基因GP15的表达和鉴定被引量：3
- 2008年
- 将GP15的阅读框序列插入pET32a(+)制成重组质粒,通过BL21成功表达出相对分子质量为36 000的蛋白。该蛋白可被His.Bind从细菌裂解物纯化出来,也可为抗融合蛋白抗体所识别。表达形式分析显示,融合蛋白以包涵体形式在大肠肝菌内表达。
- 程天印周金林周勇志施启顺林矫矫
- 亚洲璃眼蜱唾液腺差异表达基因GP_(15)的克隆和分析
- 2006年
- 目的通过扩增Ha7.7,获得包含该EST的基因全长,以便研究该基因的生物学功能。方法以Ha7.7-GSP1和Ha7.7-GSP2和Ha7.7-GSP3为引物,RACE法扩增亚洲璃眼蜱雌成蜱唾液腺总RNA,获得基因的5′-端。根据Ha7.7和5′-端序列设计全长引物(Ha7.7-FLP+和Ha7.7-FLP-),扩增cDNA第1链获,得全长cDNA。结果分析表明,基因大小为449bp,由吸血诱导亚洲璃眼蜱成蜱唾液腺表达。结论与数据库资料比对显示,GP15为新纪录(Genbank登录号DQ020265)。
- 程天印周金林周勇志施启顺林矫矫
- 关键词：唾液腺
- 微小牛蜱一个抗菌多肽编码基因的克隆和表达被引量：5
- 2005年
- 为了进行抗蜱及蜱传病疫苗的研究 ,本研究根据微小牛蜱巴西株报道的一种抗菌多肽核苷酸序列设计引物 ,从微小牛蜱中国安徽株克隆到该抗菌多肽基因 ,全长 383bp ,编码 110个氨基酸残基 ,该蛋白预测的分子量为 12 2ku ,等电点为 4 87。经同源性比较 ,该微小牛蜱巴西株抗菌多肽基因有 10 0 %的相同性。经RT_PCR分析表明 ,该基因在微小牛蜱卵、幼蜱、半饱血雌蜱、饱血雌蜱和雄蜱这几个阶段均有表达。将该基因亚克隆到 pET_2 8a(+)表达载体 ,转化BL2 1(DE3)宿主菌 ,经IPTG诱导 ,可成功表达。重组融合蛋白大小为 15ku左右 ,与预期大小一致。初步体外抗菌试验表明 ,重组蛋白具有一定的抗菌活性。Western_blot显示 。
- 白霞周金林程天印周勇志龚海燕
- 关键词：微小牛蜱抗菌多肽CDNA克隆
- 微小牛蜱铁蛋白编码基因的克隆和分析被引量：13
- 2005年
- 从微小牛蜱克隆到1个新的铁蛋白编码基因,cDNA全长642bp,编码区为123 639bp,编码172个氨基酸残基,该蛋白预测的分子量为19 9ku,等电点为4 24。经过分析,其预测氨基酸序列与已报道的变异革蜱、非洲钝缘蜱和蓖子硬蜱铁蛋白同源性分别为93 60%、88 37%和83 72%。且核苷酸序列在mRNA5′未翻译区(5′UTR)的茎环结构存在铁应答元件(IRE),其氨基酸序列上带有典型的亚铁氧化酶中心结构的保守序列。RT PCR分析表明,该基因在微小牛蜱卵、幼蜱、半饱血雌蜱、饱血雌蜱和雄蜱这几个阶段均有表达。
- 白霞周金林程天印周勇志刘毅
- 关键词：铁蛋白微小牛蜱编码区硬蜱保守序列RT-PCR分析
