广东省自然科学基金(8151064201000068)
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
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- 同安钮夜蛾核型多角体病毒pst I-G片段克隆及序列分析
- 2009年
- 【目的】测定同安钮夜蛾核型多角体病毒(OpdiNPV)pst I-G片断的序列,了解OpdiNPV的遗传结构和与其它昆虫病毒的进化关系。【方法】用pstⅠ酶切病毒基因组,电泳分离并回收pst I-G片段,连接到PUC18,转化入E.coli DH 5α,挑取阳性菌落测序。【结果】该片段长度为5056bp,有4个ORF,分别编码ODV-E66的C末端(EU 623602),P87/VP80的C末端(EU 732665),ODV-Ec43(EU 617337)和Ac108(EU 732666)。ac108基因和odv-ec43起始密码子上游都有1个晚期启动子结构域TAAG,odv-ec43基因起始密码子上游有2个早期转录起始元件CAGT;由odv-ec43推导的蛋白有2个跨膜螺旋、3个N-糖基化位点、1个N端酰基化位点、7个PKC磷酸化位点、1个酪氨酸激酶磷酸化位点和4个CKⅡ磷酸化位点;p87/vp80基因终止密码子下游有polyA信号。【结论】氨基酸序列同源分析和相似性分析显示Ac108、ODV-E66和P87/VP80与其它昆虫病毒差异较大,ODV-Ec43的保守性较高。
- 常润磊林同张宇宏张琪温秀军
- 松褐天牛泛素基因的克隆及表达被引量：4
- 2009年
- 设计一对简并引物,应用RT-PCR技术,从松褐天牛细胞中克隆泛素基因的编码区,GenBank登录号EU433567。序列分析表明:该编码区的长度为228bp,编码76个氨基酸,编码蛋白的相对分子质量为8.49ku,理论等电点为5.83。同源性比较发现,松褐天牛泛素基因与其他10种昆虫泛素基因在氨基酸水平上具有94%～98%的相似性。基于核苷酸水平上的系统发育树显示松褐天牛与斜纹夜蛾、草地贪夜蛾遗传距离较近;通过同源建模获得了松褐天牛泛素基因编码蛋白的理论三维结构。将泛素基因与pET-32a(+)连接,构建原核表达载体pET-32a-ub,经IPTG诱导,松褐天牛泛素基因在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达,并经Westernblotting分析验证该表达,为研究泛素在松褐天牛体内的功能奠定基础。
- 林同张宇宏常润磊张琪温秀军
- 关键词：松褐天牛泛素基因克隆原核表达
- 棉卷叶野螟泛素基因的克隆、序列分析及原核表达被引量：5
- 2008年
- 本研究用RT-PCR方法,克隆了棉卷叶野螟Haritalodes derogata(Fabricius)泛素基因编码区,GenBank登录号为 EU580145。序列分析表明,该编码区长228 bp,编码76个氨基酸,推测的编码蛋白的相对分子质量和等电点分别为 8.53 kD和5.83。同源性比较发现,棉卷叶野螟泛素基因与其他10种昆虫泛素基因在氨基酸水平上具有93 %以上的相似性。系统发育树显示棉卷叶野螟与斜纹夜蛾Spodopteralitura(Fabricius)遗传距离较近,通过同源建模获得了该棉卷叶野螟基因编码蛋白的理论三维结构。将棉卷叶野螟泛素基因与pET-32a(+)连接,构建原核表达载体 pET-32a-ub,经IPTG诱导,棉卷叶野螟泛素基因在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达。本研究成功克隆了棉卷叶野螟泛素基因的编码区,并经Western blotting分析证明实现了该基因的原核表达,为进一步研究其在该昆虫体内的作用机理奠定了基础。
- 张宇宏林同张琪常润磊温秀军
- 关键词：泛素基因克隆基因序列分析原核表达
- 海芒果、夹竹桃、黄婵、乌桕对柳蓝叶甲的毒杀活性被引量：4
- 2009年
- 用索氏提取法获得了海芒果Cerbera manghas、夹竹桃Nerium indicum、黄婵Alamanda cathartica和乌桕Sapium sebiferum的叶片乙醇提取物,在室内分别测定了这4种植物不同浓度提取物对柳蓝叶甲(Pla-giodera versicolora)的防治效果,结果表明:4种植物提取液原液的校正死亡率最终均达到100%,尤以夹竹桃、海芒果处理的效果最为显著,仅1天后,供试昆虫的校正死亡率就达到100%,叶甲的校正死亡率都高于乌桕和黄婵处理的。海芒果和夹竹桃提取物处理后叶甲的校正死亡率曲线呈现平稳上升的趋势,乌桕和黄婵处理后叶甲的校正死亡率曲线趋向于平直。试验结果为进一步在生产实践中有效应用植物杀虫剂提供参考依据。
- 李玉玲陈慧施丘海成林同
- 关键词：柳蓝叶甲夹竹桃乌桕植物杀虫剂
