公共文化服务平台

共 7 条记录，以下是 1-9

全选清除导出

排序方式：

利什曼原虫减毒活疫苗研究进展被引量：1: 2015年; 利什曼原虫减毒活疫苗因其保留了大部分免疫原性,能感染巨噬细胞,诱发与自然感染类似的免疫应答而受到众多科学家的青睐。本文综述了近年来减毒活疫苗的研究进展。; 刘鹏敬保迁; 关键词：利什曼病

重组杜氏利什曼原虫延伸因子1-α与β-微管蛋白诱导BALB/c小鼠Th2型免疫应答的研究被引量：1: 2018年; 目的评价重组杜氏利什曼原虫延伸因子1-α(recombinant Elongation factor 1-α,rEF 1-α)和β-微管蛋白(recombinantβ-tubulin,rβ-tubulin)的免疫刺激效应及诱导免疫应答类型。方法从杜氏利什曼原虫四川人分离株基因组中扩增EF 1-α、β-tubulin基因,以分子克隆技术构建pQE30-EF 1-α、pQE30-β-tubulin重组质粒。将酶切与测序鉴定正确的重组子转化E.coil M15菌株,用IPTG诱导表达rEF 1-α和rβ-tubulin,表达产物经镍柱亲和层析纯化后辅以弗氏佐剂制成疫苗免疫BALB/c小鼠,采用Western blot法检测小鼠抗血清的特异性,ELISA法检测抗血清效价。分离各组小鼠脾细胞,体外培养60h后再次接受相同抗原刺激,检测IL-4、IL-12、IFN-γ水平。结果重组菌表达的rEF 1-α、rβ-tubulin均以包涵体形式存在,两表达产物免疫小鼠后获得的抗血清均具有特异性,效价分别为1∶800和1∶1 600。rEF 1-α、rβ-tubulin免疫小鼠脾细胞培养上清IL-4含量均高于对照组(P<0.05),IL-12、IFN-γ与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论成功表达了杜氏利什曼原虫rEF 1-α、rβ-tubulin,两种重组蛋白均可诱导Th2型免疫应答。; 刘鹏姚梦杨健敬保迁; 关键词：杜氏利什曼原虫重组蛋白

重组杜氏利什曼原虫Pxn1、TryP、假定蛋白CAJ07026和GDPMP蛋白刺激BALB/c小鼠的免疫应答状态被引量：3: 2017年; 目的观察重组杜氏利什曼原虫(Leishmania donovani)过氧化物还原酶1(peroxidoxin-1,Pxn1)、锥虫氧化还原过氧化物酶(tryparedoxin peroxidase,Try P)、假定蛋白CAJ07026(hypothetical protein CAJ07026.1,Hyp07026)和甘露糖-1-磷酸胍氨酸转移酶(GDP-mannose pyrophosphorylase,GDPMP)蛋白刺激BALB/c小鼠免疫应答状况。方法逆转录PCR(RT-PCR)分别扩增杜氏利什曼原虫Pxn1、Try P、Hyp07026和GDPMP编码基因,克隆入质粒p QE30,构建重组质粒p QE30-Pxn1、p QE30-Try P、p QE30-Hyp07026和p QE30-GDPMP,转化至大肠埃希菌,以异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导表达。采用NTA-Ni盐凝胶层析柱,自然条件方式纯化重组蛋白rPxn1和rTry P,变性条件方式纯化重组蛋白rHyp07026和rGDPMP。25只BALB/c小鼠随机均分成5组,即rPxn1、rTry P、rHyp07026、rGDPMP免疫组及PBS对照组,免疫组小鼠分别以相应重组蛋白进行免疫,第1周免疫组小鼠皮下注射100μg相应的重组蛋白,隔周以50μg相应的重组蛋白加强免疫3次,对照组小鼠注射等量PBS。第3次加强免疫后1周,将各组小鼠脱颈处死,制备单个脾细胞,提取抗原刺激后小鼠脾细胞总RNA,用q RT-PCR微阵列检测抗原刺激后小鼠脾细胞内反映免疫应答的细胞因子转录水平表达谱。结果Pxn1、Try P、Hyp07026和GDPMP编码基因经PCR扩增,其产物大小分别为570、610、1 040和1 200 bp;经测序证实,与Gen Bank中的相关序列一致。重组质粒p QE30-Pxn1、p QE30-Try P、p QE30-Hyp07026和p QE30-GDPMP经IPTG诱导后均可在大肠埃希菌内高效表达,rGDPMP、rPXNT1、rTXNT和rHyp07026蛋白相对分子质量(Mr)分别为45 000、22 000、23 000和38 000。rGDPMP、rPXNT1、rTXNT和rHyp07026免疫小鼠的脾细胞内84个细胞因子基因的m RNA表达中,与PBS对照小鼠脾细胞比较,高水平表达的IL-1f6分别是对照组的96.22、271.54、108.51和250.15倍,IL-17f分别是对照组的105.54、35.71、53.38和53.57倍,IL-10分别是对照组的21.68、27.51、24.45�; 敬保迁谢勇恩胡为民杨健王朝莉冯莉; 关键词：杜氏利什曼原虫

杜氏利什曼原虫无鞭毛体表达抗原的Westernblot和MALDI-TOF／TOF分析被引量：2: 2014年; 目的鉴定体氏利什曼原虫无鞭毛体特异表达抗原。方法培养杜氏利什曼原虫前鞭毛体并体外转化无鞭毛体，其总蛋白经2-DE电泳后以小鼠抗杜氏利什曼原虫无鞭毛体血清进行Western blot，对前鞭毛体与无鞭毛体特砰表达抗原蛋白进行MALDI-TOF／TOE串联质谱鉴定。重组表达无鞭毛体特异表达抗原编码基因，以Westernblot法对重组蛋白进行鉴定。结果等量的杜氏利什曼原虫前鞭毛体与无鞭毛体蛋白经2-DE电泳均可呈现680～742个蛋门点，Westernblot及MALDI-TOF／TOFMS分析甘油醛3-磷酸脱氢酶与延伸因子2为杜氏利什曼原虫前鞭毛体特异表达抗原，核甘二磷酸激酶为无鞭毛体特异表达抗原。重组核苷二磷酸激酶编码基因表达产物经Westernblot证实为朴氏利什曼原虫无鞭毛体特异表达强抗原。结论杜氏利什曼原虫前鞭毛体与无鞭毛体抗原表达存存差异，核甘二磷酸激酶为杜氏利什曼原虫无鞭毛体特异表达强抗原。; 王健关望张仁刚张洁敬保迁; 关键词：杜氏利什曼原虫感染免疫

杜氏利什曼原虫免疫组学分析: ＜正＞利什曼原虫感染人后,可引起无症状感染、皮肤利什曼病、黏膜利什曼病及致死性的内脏利什曼病,适应性免疫应答在疾病的发病和恢复过程中发挥重要作用。为了筛选杜氏利什曼原虫蛋白质组中激发人免疫系统产生强的细胞免疫和体液免疫应...; 敬保迁张洁王朝莉冯丽胡为民谢勇恩潘万龙张仁刚; 文献传递

不同种株利什曼原虫抗原的多样性研究被引量：2: 2013年; 目的观察不同种株利什曼原虫抗原的异质性。方法培养杜氏利什曼原虫、热带利什曼原虫及婴儿利什曼原虫前鞭毛体及体外转化无鞭毛体,提取总蛋白,经SDS-PAGE电泳后,分别以抗杜氏利什曼原虫及热带利什曼原虫前鞭毛体血清进行Western blot,分析抗原的多样性。结果经SDS-PAGE电泳和考马斯亮蓝染色,杜氏利什曼原虫、热带利什曼原虫及婴儿利什曼原虫前鞭毛体及体外转化无鞭毛体总蛋白呈现出分子质量单位为12～150ku的相似蛋白带型;Western blot显示,抗杜氏利什曼原虫前鞭毛体多克隆血清识别的抗原组分与抗热带利什曼原虫前鞭毛体多克隆血清识别的抗原相似;3种利什曼原虫前鞭毛体和无鞭毛体存在48、65及35ku共同抗原,杜氏利什原虫和婴儿利什曼原虫的无鞭毛体存在38ku期特异抗原,热带利什曼原虫的前鞭毛体和无鞭毛体存在45、24ku种特异抗原。结论杜氏利什曼原虫、热带利什曼原虫及婴儿利什曼原虫间存在抗原多样性,为认识利什曼病感染免疫提供了新的视角。; 王健张仁刚张洁敬保迁; 关键词：利什曼原虫感染免疫

杜氏利什曼原虫假定蛋白PA5的原核表达与生物信息学分析: 2018年; 目的扩增杜氏利什曼原虫假定蛋白PA5基因,原核表达该假定蛋白并预测其结构与功能。方法以杜氏利什曼原虫前鞭毛体基因组DNA为模板,巢式PCR法扩增该基因,将其克隆入pQE30质粒构建pQE30-PA5重组质粒,经IPTG诱导表达目的蛋白。采用生物信息学方法对该蛋白进行同源性分析、信号肽及跨膜区预测、蛋白质结构与B细胞抗原肽位点分析。结果成功扩增出PA5基因,序列全长为765 bp,构建的pQE30-PA5重组质粒,经诱导后目的蛋白以包涵体形式表达。所获得的蛋白含254个氨基酸,相对分子质量为27 065,等电点为5.71的亲水性不稳定蛋白,不含信号肽及跨膜区。二级结构以α-螺旋及不规则卷曲为主,共含5个B细胞抗原肽片段。结论成功表达了杜氏利什曼原虫PA5蛋白,该亲水蛋白具有体液免疫刺激潜能,具有利什曼病潜在免疫诊断价值。; 姚梦刘鹏敬保迁; 关键词：杜氏利什曼原虫生物信息学分析

免疫蛋白质组学方法对内脏利什曼病人血清识别主要抗原的鉴定被引量：6: 2017年; 目的鉴定我国内脏利什曼病人血清识别的主要抗原蛋白。方法培养杜氏利什曼原虫前鞭毛体并体外转化成无鞭毛体,提取总蛋白,经2-DE电泳,以内脏利什曼病人血清为一抗进行2-D Western blot,对强免疫识别点相应抗原蛋白进行MALDI-TOF/TOF串联质谱鉴定。结果等量的杜氏利什曼原虫前鞭毛体与无鞭毛体蛋白经2-DE电泳均可呈现约700个蛋白点,内脏利什曼病人血清识别的主要无鞭毛体抗原蛋白为β-微管蛋白、磷酸多糖β-1,3半乳糖基转移酶、PA7为磷酸多糖β-1,3阿拉伯糖基转移酶及延伸因子1等,识别的主要前鞭毛体抗原蛋白为热休克蛋白70及延伸因子1等。结论人内脏利什曼病患者血清能识别多种杜氏利什曼原虫蛋白,有利于筛选抗内脏利什曼病疫苗抗原和新的血清学诊断抗原。; 敬保迁谢勇恩胡为民杨健王朝莉冯莉张洁; 关键词：杜氏利什曼原虫感染免疫

杜氏利什曼原虫ESAG样分子表达及其对原虫生物学特征的影响: ＜正＞杜氏利什曼原虫感染为不产毒素病原体,其致病与相关毒力基因的表达关系密切。我们先前以消减抑制杂交技术克隆到杜氏利什曼原虫ESAG样分子（ESAGL）相关基因,经生物信息分析该分子为II型膜蛋白。本研究中我们一方面以R...; 敬保迁张洁王朝莉冯丽胡为民谢勇恩潘万龙张仁刚; 文献传递

全选清除导出

共1页<1>

国家自然科学基金(30872213)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户反馈

国家自然科学基金(30872213)

文献类型

领域

主题

机构

作者

传媒

年份

用户登录

用户反馈