国家自然科学基金(31171528)
- 作品数：17 被引量：70H指数：7
- 相关作者：刘国振李莉云窦世娟刘丽娟关明俐更多>>
- 相关机构：河北农业大学中国科学院河北北方学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家教育部博士点基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 水稻病程相关蛋白质在逆境胁迫下的表达研究被引量：6
- 2013年
- 植物病程相关(PR)基因一般在病原物侵染过程中受诱导发生转录上调.目前有证据提示植物PR基因在非生物逆境胁迫下也发生转录变化,但其蛋白质的表达变化情况还鲜有报道.为了解水稻PR蛋白质在逆境胁迫下的表达特征,本文采用免疫印迹技术(Western blotting,WB)调查了8个PR蛋白质在冷、热、旱、淹和盐等5种胁迫下的表达谱.结果表明:在冷胁迫下PR8表达上调,在热胁迫下PR1a、PR3、PR5和PR16表达下调;在旱胁迫下PR1a、PR2和PR8表达上调,而PR5和PR16表达下调,在淹胁迫下PR1、PR2和PR15表达上调,PR1a、PR3、PR5和PR8表达下调;在盐胁迫下PR2和PR3表达上调,而PR1a、PR5、PR8和PR16表达下调.另外,对这些PR基因的上游启动子区进行分析,发现存在与胁迫响应相关的调控元件,其中脱落酸反应元件(ABRE)、TC-rich repeats和HSE的出现频率较高.这些蛋白质表达数据进一步佐证了PR蛋白在逆境胁迫反应中发挥着重要且不尽相同的作用.
- 高庆华曾祥然贾霖牛东东李雪姣关明俐贾盟兰金苹窦世娟李莉云刘丽娟刘国振
- 关键词：水稻免疫印迹逆境胁迫启动子
- 蛋白质印迹技术升级版（WB 2.0）的概念与设想被引量：4
- 2019年
- 蛋白质印迹技术(Western blot,WB)基于抗体的特异性了解蛋白质的表达特征.该技术已经成为生命科学基础与应用研究的最常用技术之一.但目前WB手工操作多、实验流程难规范、一般只能用于同一WB分析内不同样品中目标蛋白质丰度的定性或相对定量,难以在不同实验室间进行WB数据比较.本文简要回顾了WB发展的历程,提出了升级版蛋白质印迹(WB 2.0)的概念,介绍了包括数字化、标准化、自动化、微量化、通量化以及基于内参的归一化建立数据库等为核心内容的设想.展望了WB 2.0的应用前景,提出在WB 2.0技术大规模应用的基础上,逐步建立开放的蛋白质表达特征数据库,成为继基因组、转录组等数据库之后生命科学领域的又一支撑平台.
- 张柳史佳楠刘国振
- 关键词：蛋白质印迹抗体蛋白质组学
- 水稻几丁质酶基因的转录与表达特征被引量：7
- 2014年
- 几丁质酶与植物的生长发育、抗逆和防御反应相关。水稻PR3家族几丁质酶编码基因有19个成员,本文分析其转录特征,了解到有些基因属于组成型转录,有些基因属于组织特异型转录,分析几丁质酶蛋白质的结构域,并对其进行聚类和亚家族分类。利用免疫印迹技术分析几丁质酶蛋白质的表达谱,发现CHIT5的表达量在水稻叶片生长过程中下调,而CHIT6、CHIT14、CHITC1和CHITC2的表达量上调。在水稻与白叶枯病菌(Xoo)的不亲和反应中,CHIT1、CHIT2、CHIT5、CHIT6、CHIT10、CHIT15和CHIT16的表达量上调,CHIT14、CHITC1和CHITC2的表达下调。进一步比较几丁质酶蛋白质在水稻-Xoo不同互作反应中的表达,发现其在亲和及不亲和反应中的表达模式类似,但一般在亲和反应中强度变化较大。此外,CHIT6蛋白质在对照反应中的表达量上调,提示CHIT6的表达受创伤的诱导。本文比较系统地揭示了水稻PR3家族几丁质酶编码基因的转录和蛋白质表达特征,为其功能解析提供了线索。
- 范伟李雪姣关明俐缪刘杨史佳楠窦世娟刘丽娟李莉云刘国振
- 关键词：水稻几丁质酶聚类分析白叶枯病菌转录免疫印迹
- 水稻核糖核酸酶T2蛋白质在叶片生长和盐胁迫过程中的表达研究被引量：4
- 2013年
- 核糖核酸酶(Ribonucleases,RNase,RNS)T2普遍存在于各种生物中,其保守性提示了功能的重要性。在水稻基因组中有8个RNase T2成员,本试验采用基于抗体的蛋白质组学策略,用免疫印迹(Western Blotting,WB)技术检测了它们在叶片生长及盐胁迫条件下的表达,发现OsRNS1-OsRNS7蛋白质在叶片中有表达,其中OsRNS4主要在苗期表达,提示其在苗期发挥作用,其它蛋白质主要在成株期表达,但没有检测到OsRNS8的表达;水稻OsRNS4在盐胁迫条件下表达上调,提示其可能在盐胁迫应答过程中发挥作用,其它RNase T2蛋白质的表达大多随盐胁迫时间的延长而下降。将RNase T2蛋白质的表达与转录信号进行比较,发现二者在部分基因中有一定的相关性。本试验获得的数据为揭示水稻RNase T2基因的功能提供了线索。
- 曾祥然魏健贾霖关明俐刘钊兰金苹刘丽娟李莉云刘国振
- 关键词：水稻免疫印迹
- 水稻OsWRKY42是Xa21介导的抗白叶枯病途径新元件被引量：2
- 2021年
- Xa21对白叶枯病菌(Xanthomonas oryzae pv.oryzae,Xoo)具有广谱抗性,是最早被克隆的水稻(Oryza sativa)抗白叶枯病基因。前期研究表明,OsWRKY42可能在Xa21介导的抗病反应中发挥作用。在Xa21基因遗传背景下制备了OsWRKY42的RNA干扰株系,将经免疫印迹确认的转基因株系接种白叶枯病菌,结果表明,与抗病对照4021相比,转基因株系的病斑长度增加,说明OsWRKY42的丰度下调抑制了Xa21对白叶枯病的抗性反应。免疫印迹分析表明,在OsWRKY42-RNAi转基因水稻中,OsPR6、OsPR15和OsPR16的蛋白质丰度降低,OsPR1A、OsPR1B、OsPR2和OsPR10A的蛋白质丰度升高,表明这些病程相关蛋白质可能位于OsWRKY42基因的下游,受OsWRKY42调控并参与Xa21介导的抗病性。研究结果表明,OsWRKY42是Xa21介导的抗白叶枯病途径新元件,增进了对Xa21介导的水稻抗病机理的认识。
- 王田幸子朱峥陈悦刘玉晴燕高伟徐珊张彤马金姣窦世娟李莉云刘国振
- 关键词：水稻白叶枯病WRKY转录因子
- 水稻PP2Ac类磷酸酶蛋白质在盐胁迫下的表达被引量：7
- 2012年
- 【目的】了解重要蛋白质的表达模式进而探讨水稻耐盐的分子机理。【方法】采用基于抗体的蛋白质组学策略,用免疫印迹(western blotting)调查了5个PP2Ac类磷酸酶蛋白质在苗期盐胁迫条件下的表达。【结果】发现在耐盐水稻品种兰胜中,OsPP2Ac-4的表达上调,在盐敏感的水稻品种9311中,OsPP2Ac-2、OsPP2Ac-3和OsPP2Ac-5的表达也发生了上调,但OsPP2Ac-4的表达下调。比较2个品种间PP2Ac蛋白质的表达,发现在正常生长条件下,PP2Ac蛋白质的表达没有显著区别且基本保持恒定,其表达变化仅发生在盐胁迫条件下。分析水稻MPSS数据库提供的苗期盐胁迫的转录数据,发现OsPP2Ac-2、OsPP2Ac-3和OsPP2Ac-5在盐胁迫条件下转录水平下调。【结论】发现了4个盐胁迫条件下表达发生变化的PP2Ac蛋白质。
- 刘钊贾霖贾盟关明俐曹英豪刘丽娟曹振伟李莉云刘国振
- 关键词：水稻盐胁迫免疫印迹
- 8个WRKY转录因子在水稻叶片生长和抗病过程中的表达分析被引量：3
- 2014年
- WRKY是植物体内最大的转录因子家族之一,其成员在植物生长发育和抗逆过程中发挥重要作用。为了解水稻WRKY的功能,本研究利用蛋白质免疫印迹(w estern blotting,WB)技术,检测了8个WRKY转录因子在水稻叶片生长和Xa21介导的抗白叶枯病过程中的表达丰度变化。结果表明:OsWRKY12、43、55和86在苗期表达量较低,随叶片的生长表达逐步增加;OsWRKY50和84在苗期叶片中的表达量相对较高,成熟期下降;未检测到OsWRKY40/64和52在叶片中的表达。在Xa21介导的白叶枯病抗性反应中,OsWRKY40/64、50和52受白叶枯病菌诱导表达,OsWRKY84受侵染后表达量上调,OsWRKY12、43、55和86在抗病过程中没有检测到表达丰度的变化。进一步比较这些转录因子在抗、感和对照(Mock)反应中的表达,发现抗、感反应间蛋白质的表达变化是相似的。研究结果提示:OsWRKY12、43、55和86可能在叶片正常生长中发挥作用;OsWRKY40/64和52可能在水稻-白叶枯病菌互作过程中发挥作用;OsWRKY50和84则在叶片生长和抗白叶枯病过程中都有一定的功能。
- 史佳楠李莉云徐文静关明俐李雪姣牛东东兰金苹窦世娟刘丽娟刘国振
- 关键词：WRKY水稻免疫印迹白叶枯病转录因子
- 基于转录特征的水稻WRKY转录因子功能注释被引量：2
- 2016年
- 转录水平的变化是转录因子功能发挥的重要体现形式,高通量测序技术的发展和应用揭示了丰富的转录数据,对转录数据的深度分析有助于基因的注释和功能研究。本文以水稻WRKY转录因子家族为对象,在总结WRKY基因功能的基础上,对生物和非生物胁迫、发育、营养和激素处理等不同生物学过程中的转录数据进行了系统的整理和挖掘,获得了不同反应中转录变化的特定WRKY基因清单,丰富了水稻WRKY转录因子家族成员的注释信息,以期这些信息为后续的功能研究提供有价值的参考。
- 李莉云史佳楠杨烁孙财强刘国振
- 关键词：WRKY转录因子水稻注释转基因
- 水稻类钙调磷酸酶亚基B蛋白质在叶片生长和白叶枯病抗性反应中的表达被引量：7
- 2012年
- 钙信号介导植物对多种外部刺激的反应并参与调控广泛的生理学过程。钙离子结合蛋白质,如类钙调磷酸酶亚基B蛋白质(calcineurin B-like protein,CBL),对感受和传递钙信号具有重要作用。根据基因组测序及注释分析,水稻(Oryzasativa)基因组中有10个CBL家族成员。采用基于抗体的蛋白质组学策略,利用免疫印迹方法研究了水稻CBL蛋白质在叶片生长不同时期的表达,揭示了其在正常发育过程中的表达模式。然后对Xa21介导的水稻白叶枯病抗性反应不同时间点的蛋白质表达进行检测,发现OsCBL-1、OsCBL-3、OsCBL-5、OsCBL-9和OsCBL-10这5个蛋白质的表达发生了变化;进一步比较它们在抗病、感病和对照处理中的表达情况,发现其在不同反应间的表达也有区别,提示了CBL蛋白质在水稻-白叶枯病菌互作过程中的功能。该研究为深入了解水稻CBL蛋白质的功能提供了有价值的线索。
- 刘雨萌兰金苹曹英豪刘钊刘丽娟李莉云曹振伟刘国振
- 水稻类钙调磷酸酶亚基B蛋白质在逆境胁迫下的表达被引量：7
- 2013年
- 【目的】了解水稻CBL蛋白质在逆境胁迫下的表达模式进而探讨水稻耐逆的分子机理。【方法】采用基于抗体的蛋白质组学策略,以超级杂交稻父本9311为材料,采用免疫印迹(western blotting,WB)技术调查了CBL家族主要成员在冷、热、旱、淹和盐胁迫等5种逆境中的表达特征。【结果】发现CBL1、CBL5和CBL6在冷胁迫中表达下调,CBL1和CBL2在热胁迫中表达下调,CBL1和CBL5在旱胁迫中表现下调,而CBL6、CBL8和CBL10在旱胁迫中表现上调,CBL1、CBL5、CBL6、CBL8和CBL10在淹涝胁迫中表达上调,而CBL2表现下调。【结论】鉴定了水稻在重要逆境胁迫下发生丰度变化的6个CBL蛋白质。
- 贾霖刘雨萌范伟关明俐贾盟窦世娟魏健彭业博刘丽娟李莉云刘国振
- 关键词：水稻免疫印迹逆境胁迫蛋白质表达
