国家自然科学基金(30570931)
- 作品数：4 被引量：4H指数：1
- 相关作者：宋纯张增岭黄任平石于波宋春芳更多>>
- 相关机构：哈尔滨医科大学哈尔滨工业大学北京协和医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 聚乙醇酸生物支架与胰岛的共培养被引量：1
- 2009年
- 背景:以往的研究表明,胰岛细胞体外培养的时间不宜过长,否则会出现纤维组织过度增生,使胰岛大量死亡,而导致移植失败,所以改善胰岛细胞体外培养环境是非常重要的。目的:将大鼠胰岛种植在聚乙醇酸生物支架上,并进行胰岛与支架共培养,观察支架上胰岛细胞的生长状态、胰岛细胞的形态和胰岛细胞的分泌功能,以寻找胰岛细胞体外生存的良好环境。设计、时间及地点:体外培养,对比观察实验,于2005-06/2008-12在哈尔滨医科大学附属第一医院,卫生部细胞移植重点实验室完成。材料:聚乙醇酸支架纤维直径15μm,网孔100～150μm,空隙率为97%,厚度为1.0～2.0mm。细胞培养前将支架浸泡入体积分数为75%乙醇溶液中30min,PBS冲洗3次,吹干后放入2g/L多聚赖氨酸中浸泡30min,消毒后备用。方法:采用胶原酶Ⅴ分离和消化大鼠胰岛,对照组胰岛加入含体积分数20%胎牛血清、10g/L青霉素-链霉素-两性霉素、10mmol/L Hepes的RPMI-1640培养液;支架组胰岛放在多聚赖氨酸包被的聚乙醇酸支架上,再加入同样的培养基,每个培养皿中细胞浓度为0.6×103,将两组细胞置于体积分数5%CO2、37℃的恒温培养箱中培养。主要观察指标:应用双硫腙胰岛特异性染色,计算胰岛的数量及检测胰岛的纯度;MTT法检测胰岛的成活率;放射免疫法测定胰岛细胞培养上清液中的胰岛素含量;并用扫描电镜对支架上胰岛的黏附生长进行观察。结果:分离和消化后的胰岛被双硫腙染成红色,胰岛外分泌腺不着色,胰岛纯度≥85%;MTT及胰岛功能检测结果显示,支架组的胰岛成活率及胰岛功能明显增高,与对照组相比差异有显著性意义(P<0.05);扫描电镜观察,胰岛紧密黏附在聚乙醇酸支架上,支架上胰岛成三维立体生长。结论:聚乙醇酸支架与大鼠胰岛共培养可改善胰岛的成活率、胰岛的功能及形态,并使胰岛体外生存期延长。
- 宋纯黄玉东侯艳宋一民谢万均黄任平魏争张增岭石于波宋春芳
- 关键词：聚乙醇酸胰岛双硫腙扫描电镜
- PGA细胞支架在大鼠胰岛体外实验中的应用被引量：1
- 2009年
- 应用聚乙醇酸(Polyglycolic acid,PGA)细胞支架与大鼠胰岛细胞共培养,构建胰岛细胞间三维立体的网络结构,观察胰岛细胞在PGA细胞支架三维培养环境中的生存状态。实验结果表明,支架上的胰岛细胞形态良好,细胞数量减少不显著,死亡细胞较少;DTZ胰岛特异性染色胰岛着色显著;AO-PI荧光双染法证实了胰岛细胞活性较强(P<0.05);葡萄糖刺激胰岛素释放功能的检测显示,胰岛细胞的胰岛素分泌功能较强,胰岛素分泌指数明显高于对照组,两组间胰岛素释放指数有显著差异(P<0.05);扫描电镜下胰岛细胞紧密黏附并包绕在PGA细胞支架上,胰岛细胞呈三维立体生长。研究结果表明,大鼠胰岛在PGA细胞支架上能黏附生长,并具有活性及分泌胰岛素的功能,并可延长胰岛在体外的生存时间。
- 宋纯黄玉东姜再兴侯艳石玉波
- 关键词：聚乙醇酸胰岛细胞
- 3D自组装肽纳米纤维支架对胰岛细胞分泌功能的影响被引量：3
- 2011年
- 背景:3D自组装肽纳米纤维支架能很好模拟体内微环境,给予细胞必要的结构模式,促进细胞外基质的正确组成及细胞的生长,改善细胞功能。目的:体外观察3D自组装肽纳米纤维水凝胶支架对胰岛细胞分泌功能的影响。方法:将3D自组装肽纳米纤维水凝胶支架与成年大鼠胰岛细胞共培养,AO-PI荧光染色法检测胰岛细胞的活性及生存率;放射免疫法测定胰岛细胞的分泌功能;扫描电镜观察胰岛细胞包裹在3D纳米支架中成三维立体的生长状态。结果与结论:在3D纳米支架培养环境中胰岛细胞纯度≥80%;3D纳米支架组胰岛生存率及胰岛细胞分泌功能明显高于无支架组(2D培养组)(P<0.05);扫描电镜显示自组装肽纳米纤维支架形成了具有几何形状的纳米级薄层,将胰岛细胞包裹在3D纳米支架中,胰岛细胞成三维立体生长。表明3D自组装肽纳米纤维支架可为胰岛细胞体外生存提供3D培养环境,改善胰岛细胞的活性、分泌功能及形态,延长胰岛细胞体外生存期。
- 黄任平宋纯张增岭范杰后石于波宋春芳
- 关键词：胰岛细胞扫描电镜分泌功能
- 聚乙醇酸-胰岛移植物埋植大鼠腿部肌肉治疗糖尿病
- 2018年
- 背景:胰岛移植是一种比较有效的糖尿病治疗方法,运用生物医学工程技术将生物材料引入胰岛移植,可保持胰岛活力,提高移植效率。目的:将培养的聚乙醇酸-胰岛移植物移植到糖尿病受体大鼠肌肉内,观察聚乙醇酸-胰岛移植物治疗糖尿病的效果。方法:取Wistar大鼠18只,采用腹腔注射链脲菌素方法建立糖尿病模型,建模成功后即刻随机分3组干预,对照组腿部肌肉注射生理盐水,实验1组腿部肌肉注射异种胰岛细胞,实验2组腿部埋植聚乙醇酸-异种胰岛细胞移植物。移植后3,7,14,21,30 d,检测各组大鼠血糖及胰岛素水平;移植后14,30 d,取实验组移植物标本,进行扫描电镜观察。结果与结论:(1)实验1组、实验2组移植后3,7 d的血糖值明显低于对照组(P<0.05),实验2组移植后14,21,30 d的血糖值低于实验1组(P<0.05);(2)实验1组、实验2组移植后3,7 d的胰岛素水平明显高于对照组(P<0.05),实验2组移植后不同时间点的胰岛素水平明显高于实验1组(P<0.05);(3)扫描电镜显示,移植后14 d,实验组可见较多形态良好的胰岛细胞仍黏附于聚乙醇酸纤维支架上,胰岛细胞间可见呈细纤维交织成网状的细胞外基质形成,在胰岛细胞周围可见少量红细胞;随着埋植时间的延长,聚乙醇酸纤维支架开始降解,纤维支架逐渐断裂,长的纤维降解为短的纤维,30 d后最终支架层层脱落成碎片;(4)结果表明,聚乙醇酸-胰岛细胞移植能有效降低糖尿病大鼠的血糖水平,并提高血清胰岛素水平。
- 谢万均魏争宋纯
- 关键词：聚乙醇酸胰岛糖尿病国家自然科学基金聚乙醇酸糖尿病胰岛
