江苏省“333工程”科研项目(BRA2012213)
- 作品数：3 被引量：6H指数：2
- 相关作者：朱健华盛红专姚健于小红周琴更多>>
- 相关机构：南通大学南通市第二人民医院江苏省神经再生研究重点实验室更多>>
- 发文基金：江苏省“333工程”科研项目国家自然科学基金江苏省“六大人才高峰”高层次人才项目更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 钙调神经磷酸酶在cTnI基因Asp128Tyr突变致心肌肥大中的作用被引量：3
- 2014年
- 目的:探讨钙调神经磷酸酶(CaN)在心肌钙蛋白I(cTnI)基因第128位天冬氨酸→酪氨酸(Asp128Tyr)突变致心肌肥大中的作用。方法:乳鼠心肌细胞,以心钠素(ANF)、脑钠肽(BNP)mRNA表达作为心肌肥大指标,观察含cTnI Asp128Tyr突变基因的腺病毒转染对心肌细胞的作用,并观察CaN抑制剂环孢菌素A(CsA)或FK506对突变基因转染的影响。Real-time PCR检测ANF、BNP和CaN mRNA表达变化,同时行CaN活性测定。结果:转染含cTnI Asp128Tyr突变基因腺病毒的心肌细胞增大,胞内ANF和BNP的mRNA表达较空白对照组、不含任何目的基因的阴性对照腺病毒转染组和转染含野生型cTnI基因的腺病毒组增高(P<0.05)。与含野生型cTnI基因的腺病毒组相比,转染含cTnI Asp128Tyr突变基因的腺病毒组在ANF和BNP mRNA表达升高的同时存在CaN活性升高和CaN mRNA表达上调(P<0.05)。转染含cTnI Asp128Tyr突变基因的腺病毒并用CsA或FK506干预后,心肌细胞缩小,胞内ANF和BNP mRNA表达量较单纯转染含cTnI Asp128Tyr突变基因的腺病毒组降低(P<0.05),同时心肌细胞内CaN活性显著下降(P<0.05),CaN mRNA表达下调(P<0.05)。结论:cTnI Asp128Tyr突变可引起心肌细胞肥大;CaN信号通路参与了cTnI Asp128Tyr突变致心肌肥大过程的调控。
- 周琴姚健朱健华于小红盛红专
- 关键词：心肌钙蛋白I基因突变钙调神经磷酸酶心肌肥大
- 美托洛尔对腹主动脉缩窄大鼠心肌双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A-可变剪接因子-钙／钙调素依赖蛋白激酶Ⅱδ信号通路的影响被引量：3
- 2013年
- 目的以双特异性酪氨酸磷酸化调节激酶1A（Dyrk1A）-可变剪接因子（ASF）-钙／钙调素依赖蛋白激酶Ⅱδ（CaMKⅡδ）信号通路为研究对象，探讨美托洛尔预防腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚的机制。方法健康、雄性SpragueDawley（SD）大鼠30只，采用随机数字表法分为假手术组、腹主动脉缩窄组（模型组）和美托洛尔干预组（美托洛尔组，在腹主动脉缩窄基础上每日予美托洛尔干预）3组，每组10只。检测大鼠血压及心肌肥厚程度，免疫印迹法检测大鼠心肌Dyrk1A、ASF蛋白表达水平，RT—PCR法检测大鼠心肌CaMKⅡδ可变剪接。结果术后4周，模型组和美托洛尔组大鼠动脉收缩压（SBP）、舒张压（DBP）均显著高于假手术组（P均〈0．05），美托洛尔组与模型组比较差异无统计学意义。模型组大鼠左心室质量／体质量（LVW／BW）值较假手术组高36％（P〈0．05），美托洛尔组则显著低于模型组（P〈0．05）。模型组大鼠心肌细胞面积为假手术组的2．14倍（P〈0．05），美托洛尔组则仅为模型组的58．2％（P〈0．05）。模型组大鼠左心室心肌Dyrk1A蛋白表达水平为0．92±0．13，明显高于假手术组的0．33±0．05（P〈0．05），美托洛尔组为0．36±0．09，显著低于模型组（P〈0．05）。模型组大鼠左心室心肌ASF蛋白表达水平为0．133±0．018，显著低于假手术组的0．322±0．012（P〈0．05），美托洛尔组为0．301±0．014，显著高于模型组（P〈0．05）。模型组大鼠左心室心肌CaMKⅡδA、B亚型mRNA表达水平均显著高于假手术组（P均〈0．05），CaMKII6C亚型则显著低于假手术组（P〈0．05）。美托洛尔组大鼠左心室心肌CaMKⅡδA、B亚型mRNA表达则均显著低于模型组（P均〈0．05），CaMKⅡδC亚型则显著高于模型组（P〈0．05）。结论Dyrk1A经ASF调控CaMKⅡδ可变剪接参与了腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚的发�
- 姚健盛红专陆晓晨顾青青朱健华
- 关键词：美托洛尔
- 大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ Asp128Tyr基因突变重组腺病毒载体的构建
- 2013年
- 目的:构建SD大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ(cardiac troponinⅠ,cTnⅠ)天冬氨酸(Asp,D)128酪氨酸(Tyr,Y)突变(cTnⅠD128Y)重组腺病毒载体,并鉴定。方法:构建野生型SD大鼠cTnⅠ基因全长ORF区克隆,在此基础上,采用PCR定点突变方法对cTnⅠ第128位氨基酸位点引入D128Y突变,将野生型和突变型cTnⅠ基因亚克隆至Adeno-X腺病毒载体,转染HEK 293细胞,包装形成野生型和突变型(Ad-cTnⅠD128Y)重组腺病毒载体;并采用DNA测序、免疫印迹和细胞培养等方法进行鉴定。结果:PCR及测序结果表明,重组腺病毒克隆载体序列正确,免疫印迹证明有融合突变蛋白表达,该突变病毒转染心肌细胞见绿色荧光蛋白表达。结论:本研究成功构建了大鼠cTnⅠD128Y突变重组腺病毒载体,为探讨该突变致心肌肥大的胞内信号通路研究提供了基础。
- 姚健刘梅朱健华盛红专
- 关键词：基因突变定点突变重组腺病毒
