国家自然科学基金(31072162) 作品数:11 被引量:77 H指数:5 相关作者: 李建喜 杨志强 张景艳 王学智 孟嘉仁 更多>> 相关机构: 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所 兰州理工大学 更多>> 发文基金: 国家自然科学基金 公益性行业(农业)科研专项 中央级公益性科研院所基本科研业务费专项 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
肝纤维化过程中抑制肝星状细胞活性的影响因素 肝纤维化是肝损伤之后的一种病理修复反应,表现为肝内胶原纤维异常增生,是慢性肝病发展至肝便化的必经阶段。HSCs的活化和增殖对于肝纤维化的发生、发展起到关键作用。抑制HSCs的活性及促进其凋亡的发生是切断肝纤维化的重要途径... 秦哲 杨志强 李建喜 张凯 张锦艳 王磊 郝桂娟 邓慧媛 王国庆关键词:肝纤维化 肝星状细胞 凋亡 文献传递 利用iCODEHOP设计简并引物克隆益生菌FGM通透酶基因片段 被引量:1 2012年 作者通过iCODEHOP在线设计细菌通透酶的简并引物,以发酵黄芪菌FGM基因组DNA为模板进行TouchdownPCR扩增,得到740 bp PCR产物,将产物经pGEM-T Easy载体连接,转化至JM109中,筛选阳性株并测序。序列通过BLAST x检索与GenBank进行同源性比对后,结果表明,此DNA产物序列与其他菌属来源的通透酶蛋白序列具有相似性,所克隆的序列即为FGM通透酶基因片段。用iCODEHOP在线设计的简并引物可信性强,阳性率高。FGM通透酶基因的成功克隆为细菌发酵黄芪机理研究提供了依据。 王龙 张凯 王旭荣 张景艳 孟嘉仁 郝桂娟 杨志强 李建喜关键词:益生菌 益生菌FGM葡萄糖激酶基因(glcK)在黄芪发酵中的表达 2013年 旨在分析益生菌FGM在黄芪发酵过程中的生长动态,为阐述其作用机理奠定基础。采用平板计数法对益生菌FGM在黄芪发酵中的生长动态进行检测,同源克隆法克隆糖酵解途径中的限速酶葡萄糖激酶glcK基因序列,并运用SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR技术分析其在黄芪发酵不同阶段的表达水平。结果表明:成功克隆得到glcK基因一段382bp的片段(GenBank登录号JX976291),其序列一致性为83%~85%。实时荧光定量PCR结果显示,在FGM发酵6h内,glcK基因表达上调且呈逐渐上升趋势,至对数期后期6h表达水平达到最高(4.63倍);稳定期初期8h时表达水平显著下降(P<0.05),10h至发酵结束基因表达下调。可见:在黄芪发酵6h内FGM处于对数生长期,葡萄糖经糖酵解途径代谢产生ATP供细菌生长代谢利用,10h后开始进入稳定期并进行次级代谢。 郝桂娟 王龙 张凯 张景艳 王学智 孟嘉仁 杨志强 李建喜关键词:发酵 葡萄糖激酶 实时荧光定量PCR 奶牛瘤胃液中浸麻类芽孢杆菌的分离鉴定 被引量:2 2013年 采用平板划线分离法从健康奶牛瘤胃液中分离得到1株细菌Y-1,体外模拟瘤胃环境增殖Y-1,进行形态学观察、生化反应和16SrDNA基因同源性比较,并对其进行系统发育树的构建等系统鉴定。结果表明,该细菌为浸麻类芽孢杆菌(Paenibacillus macerans),本研究还对瘤胃液中存在该菌的原因做了分析。 邓慧媛 李志忠 张凯 李建喜关键词:形态学鉴定 发酵型黄芪提取物对肉仔鸡生产性能及血液生化指标的影响 被引量:21 2011年 将192只体重均一的21日龄肉仔鸡随机分成4组,分别饲喂正常日粮、含黄芪生药(RA)日粮、含发酵型黄芪提取物(FRAE)日粮和含黄芪多糖(AP)日粮,试验期28 d。测定肉仔鸡全程饲料利用率、日增重;50日龄心脏采血制备血清,测定其中乳酸脱氢酶、丙氨酸氨基转移酶、碱性磷酸酶、天冬氨酸氨基转移酶、γ-谷氨酸转肽酶的酶活性,尿酸的含量。扑杀后测定器官指数,并做组织切片镜检。结果表明:①经过28 d试验,RA组的平均日增重和日采食量明显下降(P<0.05),FRAE组饲料转化率明显下降(P<0.05);②和RA组相比,FRAE组的乳酸脱氢酶活性明显降低(P<0.05),和对照组相比,RA组的γ-谷氨酸转肽酶活性明显降低(P<0.05);③显微镜下观察各组织无病理变化。结果显示,在试验期内发酵型黄芪提取物对肉仔鸡的生产性能和健康状况有明显促进作用。 张凯 李建喜 杨志强 王学智 孟嘉仁 张景艳 秦俊杰 王龙关键词:血清生化 肉仔鸡 α-半乳糖苷酶的研究进展 被引量:15 2013年 α-半乳糖苷酶催化α-半乳糖苷键的水解,可将饲料及豆制食品中的抗营养因子α-半乳糖苷类转化分解,改善其营养成分。α-半乳糖苷酶在底物浓度富集的情况下还具有转半乳糖基作用,这一特点可用于低聚糖的合成及环糊精的改造。此外,该酶在制药、增稠剂处理和造纸工业也有一定应用。现作者对α-半乳糖苷酶的研究和应用现状,以及α-半乳糖苷酶的研究方向和应用前景进行了总结和评价。 郝桂娟 张凯 王学智 张景艳 孟嘉仁 杨志强 李建喜关键词:Α-半乳糖苷酶 紫外线和亚硝基胍对益生菌FGM发酵提取黄芪多糖的影响 被引量:5 2015年 旨在评价紫外线(UV)和亚硝基胍(NTG)诱变处理对菌株FGM发酵提取黄芪多糖的影响。分别用适量UV、NTG、UV+NTG诱变处理对数生长期的益生菌株FGM,筛选生长性能较好的诱变株发酵中药黄芪,水提醇沉发酵产物中的粗多糖,苯酚―硫酸法测定多糖质量分数。结果显示,UV处理90s得到的诱变菌株U90发酵黄芪后,产物中多糖质量分数比其他诱变剂量较高,为235.51mg/g,与诱变前相比增加58.13%;1.0g/L的NTG处理菌株10min后,得到的诱变株N1-1发酵黄芪后,产物中多糖质量分数比其他剂量高,为161.2mg/g,与诱变前比较增加10.64%;UV照射10s后,再用1.0g/L的NTG处理10min,得到的诱变菌株UN10-1发酵黄芪后,产物中的多糖质量分数为293.39mg/g,较诱变前增加了94.99%;UV照射10~120s所得的菌株发酵黄芪后产物中多糖质量分数均呈升高趋势,而NTG处理所得菌株发酵黄芪后产物中多糖质量分数变化无规律性。由此可见,UV和NTG诱变均有改善益生菌株FGM发酵提取黄芪多糖的作用,但NTG改善菌株发酵性能不明显,适量UV照射结合一定浓度NTG诱变所得的菌株发酵提取黄芪多糖的性能优于UV和NTG单独作用。 陈婕 王旭荣 张景艳 秦哲 王磊 孟嘉仁 尚利明 杨志强 王学智 李建喜关键词:紫外线 亚硝基胍 发酵型黄芪提取物对肉仔鸡生产性能及免疫球蛋白的作用研究 被引量:28 2011年 将192只21日龄肉仔鸡随机分成4组,分别饲喂正常日粮、含黄芪生药(RA)日粮、含发酵型黄芪提取物(FRAE)日粮和含中农华信黄芪多糖(AP)日粮,试验期28d。测定肉仔鸡全程饲料利用率、日增重;50日龄心脏采血制备血清,测定其中免疫球蛋白A(IgA)、免疫球蛋白M(IgM)、免疫球蛋白G(IgG)的含量。扑杀后测定器官指数,并做组织切片镜检。结果表明:经过28d试验后,RA组的平均日增重和日采食量明显下降(P<0.05),FRAE组饲料转化率明显下降(P<0.05);IgA和IgM的含量没有显著性差异(P>0.05)。和对照组比较,AP组和FRAE组的IgG的含量无显著性差异(P>0.05),和对照组、AP组、FRAE组比较,RA组的IgG的含量有显著性的降低(P<0.05)。结果表明,在试验期内发酵型黄芪提取物对肉仔鸡的生产性能和健康状况有明显促进作用。 张凯 杨志强 王学智 孟嘉仁 张景艳 秦哲 王龙 王磊 李建喜关键词:免疫球蛋白 肉仔鸡 种子液传代次数对益生菌FGM株发酵黄芪转化多糖的影响 被引量:8 2014年 益生菌FGM株发酵黄芪后,产物粗多糖得率显著提高。为进一步提高FGM株发酵黄芪转化多糖的稳定性,本试验将连续传代的FGM株种子液接种黄芪进行液体发酵,采用细菌平板计数法和苯酚—硫酸法分别测定发酵前、后的细菌总数和发酵后黄芪多糖的含量,并对结果进行了统计学分析。结果表明菌种在多次连续传代后会产生菌种退化现象,发酵产物中多糖含量与种子液细菌总数呈极显著相关(P=0.007),其中第4代种子液发酵黄芪转化多糖的性能最高。 尚利明 秦哲 张景艳 王旭荣 王磊 孔晓军 陈婕 杨志强 王学智 李建喜关键词:菌落数 多糖含量 来源于益生菌FGM的aga2基因在黄芪发酵过程中的表达 被引量:1 2013年 通过对益生菌FGM所产α-半乳糖苷酶aga2基因在黄芪发酵不同阶段的表达水平分析,为α-半乳糖苷酶在黄芪发酵过程中的作用及其益生机制探究提供依据。绘制益生菌FGM在黄芪发酵过程中的生长及发酵液pH变化曲线,同源序列法克隆aga2基因,运用SYBR Green I实时荧光定量PCR技术检测aga2基因在黄芪发酵不同阶段表达水平。结果表明,在发酵6h内FGM菌株处于对数生长期,大量产酸使pH由初始7.2迅速下降到5.3;12h后细菌进入稳定期,pH下降到4.5;48h至发酵结束pH稳定在4.0左右。成功克隆到一段648bp的aga2基因片段(GenBank登录号KC202825),序列相似性最高达98%。发酵24h内aga2基因表达逐渐上调并达到最高;36h表达水平下降明显,仅是初始发酵水平的1.28倍,之后至60h又呈上升趋势。上述结果提示,益生菌FGM在黄芪发酵中可产生α-半乳糖苷酶以分解黄芪粉中的抗营养因子α-半乳糖苷类,其分解产物半乳糖通过Leloir途径中间产物UDP-半乳糖可能间接参与胞外多糖合成,为黄芪发酵产物中多糖得率增加起了一定作用。 郝桂娟 张凯 王旭荣 张景艳 王学智 孟嘉仁 杨志强 李建喜关键词:发酵 Α-半乳糖苷酶