上海市科学技术发展基金(0549090007)
- 作品数：9 被引量：32H指数：3
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- 影响精子胞质内显微受精的关键因素
- 2007年
- 精子胞质内显微受精(ICSI)在人方面已很成熟,但在啮齿类试验动物方面还有待进一步研究,作者就ICSI操作过程中的关键因素作一简要综述。
- 陈浩杰刘丽均李晟阳赵立虎马明仑徐平罗光彬
- 关键词：胞质内显微受精影响因素
- 不同玻璃化冷冻方法对实验兔胚胎超低温保存的影响
- 2007年
- 目的采用不同的抗冷冻液对实验兔桑椹胚的超低温保存进行探索,以达到经济、有效保存实验兔资源的目的。方法选取三个方案进行实验。方案一:采用改良的EFS40(40%乙二醇+180ppm聚蔗糖(w/v)+0.3mol/L蔗糖PB1溶液)溶液mEFS40作为冷冻保护液,胚胎先在mEFS20溶液中平衡2min,然后移入mEFS40中平衡1min,再移入麦管中,麦管在液氮表面预冷却2min后投入液氮中保存。方案二:将冷冻液和平衡液分别替换为EFS40和EFS20,冷冻步骤同方案一。方案三:使用EFS40溶液作为抗冷冻液和平衡液,胚胎在EFS40中冲洗三遍,移入麦管中后将麦管投入液氮中冷冻保存。冷冻胚胎的复苏均采用25℃水浴加温,然后将胚胎置于0.5mol/L的蔗糖溶液中平衡,再转入PB1溶液中进行培养。结果三个不同方案的冷冻胚胎的复苏率分别为17.1%、69.6%和36.1%。结论采用EFS40作为冷冻保护液和EFS20作为平衡液(方案二)可有效保存实验兔胚胎。
- 柴世庆刘丽均郁丽丽柴家前徐平
- 关键词：胚胎
- IVF-20培养液用于四个品系大鼠体外受精的初步研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨人用体外受精液用于实验大鼠体外受精的可行性,为实验大鼠的胚胎保种提供参考。方法选用人体外受精的IVF-20培养液作为大鼠精子获能和受精培养液,对SD、Wistar、GK、F344等四种不同品系的实验大鼠进行体外受精。并用mR1ECM培养液对SD大鼠体外受精所得胚胎进行体外培养试验。结果四个品系大鼠体外受精后的2细胞发育率分别可达83.2%、72.6%、87.8%和71.6%。体外受精的2细胞胚胎能够在体外进一步发育,SD大鼠囊胚发育率为16.7%,与体内受精胚胎在体外培养的囊胚发育率(24.5%)差异不显著。结论用于人体外受精的IVF-20培养液同样适合于实验大鼠精子的体外获能和受精,可以在多种品系获得较高的2细胞发育率,并且所得2细胞能够在体外发育到囊胚。
- 张春燕刘丽均狄敏赵丹凤赵立虎徐平芮荣
- 关键词：体外受精
- 不同剂量孕马血清促性腺激素(PMSG)对未成年大鼠超数排卵效果与质量的影响被引量：16
- 2007年
- 目的建立SD大鼠的有效超数排卵程序,为大鼠胚胎生物工程相关技术的研究提供参考。方法分别用10、203、0、405、0 IU的孕马血清促性腺激素/人绒毛膜促性腺激素(PMSG/hCG)对4～5周龄、6～7周龄、8～9周龄SD大鼠进行超数排卵,比较超排效果,并将超排处理后体内受精的2-细胞胚胎移植给受体雌鼠,观察妊娠产仔情况。结果4～5周龄组SD大鼠在激素剂量为20 IU/只时,平均超排卵54.6枚,明显高于其他组合;6～7周龄组在激素剂量为40 IU/只时超排卵数最多,为32.7枚,但与30 IU和50 IU剂量组差异不显著;8～9周龄组超排效果最差,平均超排卵20枚左右。超排处理的2-细胞胚胎移植给代孕鼠后,妊娠率为63.3%,与对照组(60%)差异不显著。结论SD大鼠的超排效果随着年龄增长而下降,4～5周龄雌鼠超排效果最好,其中激素剂量为20 IU/只时超排卵数最多,且超排的卵子质量正常,受精后可以完成全程发育。
- 张春燕刘丽均狄敏赵丹凤赵立虎陈浩杰徐平芮荣
- 关键词：SD超排卵
- IVF-20培养液用于大鼠体外受精的实验研究被引量：2
- 2007年
- 目的探讨人用体外受精液用于实验大鼠体外受精的可行性,为实验大鼠的胚胎保种提供参考。方法选用人体外受精IVF-20培养液作为大鼠精子获能和受精培养液,对SD、Wistar、GK、F344等四种不同品系的实验大鼠进行体外受精;用mR1ECM培养液对体外受精所得胚胎进行体外培养实验。同时,将所得2-细胞胚胎移植给经假孕处理的受体鼠。结果四个品系大鼠体外受精后的卵裂率分别可达83.2%、72.6%、87.8%和71.6%。体外受精卵裂胚能够在体外进一步发育,SD大鼠囊胚发育率为16.7%,与体内受精胚胎在体外培养的囊胚发育率(24.5%)差异不显著。80枚2-细胞胚胎移植给2只受体鼠后均妊娠成功,产下正常仔鼠10只,产仔率12.5%。结论用于人体外受精的IVF-20培养液同样适合于实验大鼠精子的体外获能和受精,可以在多种品系获得较高的卵裂率,所得卵裂胚能够在体外发育到囊胚,并且所得卵裂胚在移植给受体鼠后能够产下正常仔鼠。
- 张春燕刘丽均狄敏赵丹凤赵立虎徐平芮荣
- 关键词：受精体外
- 不同取卵时间对兔ICSI胚胎体外发育的影响被引量：6
- 2008年
- 目的探讨不同取卵时间对兔ICSI胚胎体外发育的影响。方法采用Piezo操作系统对实验兔进行辅助体外受精。结果hCG注射后14、161、8 h取卵,ICSI后的受精率分别为82.2%、75.9%和0.0%,对受精卵进行体外发育培养,桑椹胚的发育率分别为72.9%、70.0%、0.0%,囊胚的发育率分别为62.2%、53.3%、0.0%。14 h和16 h之间受精率、桑椹胚率、囊胚率差异不显著(p>0.05),但是14 h采卵比16 h要好;18 h和14 h1、6 h之间差异显著(P<0.05)。结论不同取卵时间影响实验兔的ICSI体外受精率及胚胎的体外发育率,hCG注射后14 h取卵最有利于兔ICSI胚胎的发育。
- 陈浩杰刘丽均李晟阳赵立虎徐平罗光彬
- 关键词：受精率
- 实验兔胞内单精子注射技术被引量：2
- 2008年
- 目的建立实验兔胞内单精子注射技术(intracytoplasmic sperminjection,ICSI)。方法实验1比较了hCG注射后不同取卵时间对ICSI胚体外发育的影响。实验2比较了不同的激活方式对ICSI胚体外发育的影响。实验3比较了不同状态的兔精子ICSI胚胎体外发育结果。结果(1)hCG注射后14 h取卵,其卵裂率、桑椹胚率和囊胚率(82.2%、72.9%和62.2%)都比16 h(75.9%、70.0%和53.3%)的高,但是差异无显著性(P>0.05);18 h取的卵注射后不能卵裂。(2)机械刺激组和离子霉素+6-DMAP组,ICSI后其卵裂率分别为82.2%和81.1%(P>0.05),桑椹胚率分别为72.9%和66.2%(P>0.05),囊胚率分别为51.3%和62.3%(P<0.05),机械刺激组和离子霉素组之间卵裂率和桑椹胚率差异无显著性,但是囊胚率差异有显著性。(3)新鲜精子组和冻融活精子组卵裂率(81.1%和68.8%)和囊胚率(62.3%和40.4%)差异有显著性(P<0.05),而桑椹胚率(66.2%和61.9%)差异无显著性(P>0.05)。结论精子冷冻前后,通过ICSI所得的桑椹胚均能孵化,表明已初步建立了实验兔的ICSI技术。
- 陈浩杰刘丽均张春燕李晟阳陈禹雷赵立虎徐平
- 关键词：卵裂率
- 实验用显微操作针的制备被引量：6
- 2007年
- 如今显微操作技术已广泛应用于体细胞核移植、转基因动物生产、人类辅助生殖等胚胎生物工程中,而在这些实验中很重要的一项是要制作出符合要求的显微操作针,本文介绍利用拉针仪、煅烧仪、磨针仪怎样制作符合实验要求的高质量的显微操作针。
- 陈浩杰刘丽均李晟阳徐平罗光彬
- 哺乳动物嵌合体制作及分析进展被引量：1
- 2007年
- 嵌合体技术对研究哺乳动物早期胚胎的发育,探索细胞分化规律,掌握基因的表达调控规律,建立遗传疾病动物模型等具有重要意义。本文分别就近几年来嵌合体动物的制作方法及分析手段作一简要概述。
- 陈浩杰刘丽均李晟阳徐平罗光彬
- 关键词：嵌合体哺乳动物
