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湖南省教育厅重点项目(04A064)
作品数:
1
被引量:9
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相关作者:
周小慧
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孙吉康
王义强
陈介南
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中南林业科技大学
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相关领域:
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2009
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银杏雌树成熟叶cDNA文库的构建
被引量:9
2009年
银杏是第四纪冰川时期孑遗的现存地球最古老的植物,为我国特有的经济树种,银杏cDNA文库的构建有助于其分子生物学研究进一步深入.以湖南银杏梅核品种优良单株成熟叶为材料,经变性裂解液分解细胞,提取总RNA,Oligotex mRNA midi kit分离纯化出mRNA,用SuperScipt TM Ⅱ RnaseH2 Reverse Transcriptase将其反转录成cDNA,与EcoRI接头连接后插入pBluescript Ⅱ SK(+)XR载体,电转化感受态细胞DH10B中,进行菌落PCR文库质量检测.结果表明:文库总库容量为8.12×10^5克隆子,重组率为90%,文库插入片段长度约为500~2000bp.构建的银杏雌树成熟叶cDNA文库符合标准,该文库为进一步构建银杏EST文库、筛选目的基因及基因芯片制备等提供了资源基础和有效工具.
王义强
谭晓风
陈介南
周小慧
孙吉康
关键词:
经济林学
CDNA文库
银杏
成熟叶
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