广东省自然科学基金(K2070048)
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
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- 相关机构：广州中医药大学第一附属医院武警广东省总队医院更多>>
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- 益气除痰方抑制p-AKT活性诱导A549细胞失巢凋亡的研究被引量：9
- 2014年
- 目的:观察益气除痰方含药血清对肺腺癌A549细胞失巢凋亡的诱导作用以及对P-akt、Pp38蛋白以及下游凋亡相关基因表达的影响。方法:采用软琼脂集落培养实验和poly-HEMA培养检测含药血清对锚定不依赖性增殖和失巢凋亡影响,流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测含药血清对Pakt、P-p38蛋白的影响,RT-PCR测定用药前后调亡相关基因mRNA表达的变化。结果:培养10 d左右,A549细胞在软琼脂可形成明显集落,低、中、高剂量含药血清及阳性组细胞集落形成数较阴性组明显减少(P<0.05);流式细胞仪检测显示,阴性对照组,低、中、高剂量药物组,阳性对照组凋亡率分别为0.57±0.40%,10.23±1.46%、16.30±0.96%、27.10±1.22%,45.80±1.45%,差异有统计学意义(P<0.05);Western blot结果显示:与阴性组相比较,低、中、高剂量组,P-p38蛋白相对表达量分别为1.04、1.11、1.09,未见明显变化;而P-akt蛋白相对表达量分别为0.81、0.58、0.53,明显降低;RTPCR显示益气除痰方可显著上调p53 mRNA、bax mRNA表达,下调bcl-2 mRNA表达。结论:益气除痰方含药血清可诱导A549失巢凋亡,其作用机制可能与降低A549细胞P-akt蛋白表达,进而调控其信号传导通路下游的凋亡相关基因p53、bcl-2、bax的表达有关,而与P-p38蛋白的调控无明显相关。
- 周京旭宋妮孙玲玲林丽珠
- 关键词：非小细胞肺癌失巢凋亡
- 益气除痰方对A549细胞增殖抑制并诱导凋亡的研究
- 2014年
- 目的研究益气除痰方含药血清对肺腺癌A549细胞的增殖抑制作用和诱导凋亡的影响。方法益气除痰方汤剂给大鼠灌胃,制备含药血清;通过MTT比色法观察A549细胞增殖,并确定血清添加量;通过琼脂糖凝胶电泳和流式细胞仪检测A549细胞凋亡。结果益气除痰方含药血清对A549细胞活性具有抑制性,且有时间和浓度依赖性,与空白组比较差异有统计学意义(P<0.05),最终确定10%、20%、30%为实验浓度;琼脂糖凝胶电泳中高剂量组及阳性组可见明显凋亡DNA Ladder条带,而阴性组、低剂量组、中剂量组均未明显特征性凋亡条带出现;流式细胞仪检测结果提示中低、中、高剂量组、阳性组中A549细胞凋亡率分别为(8.40±1.67)%、(15.80±2.95)%、(27.4±0.96)%、(39.00±1.11)%,均高于阴性组,与阴性组比较差异有统计学意义(P<0.01)。结论益气除痰方含药血清对A549细胞具有明显的抑制增殖和诱导凋亡的作用。
- 宋妮周京旭林丽珠
- 关键词：含药血清增殖凋亡
