国家自然科学基金(30770232)
- 作品数：14 被引量：45H指数：4
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- 相关机构：四川大学成都医学院成都医学院第一附属医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学自动化与计算机技术更多>>
- 聚乙二醇修饰对苦瓜籽中RIP抗肿瘤活性及免疫学特性的影响被引量：7
- 2009年
- 目的探讨苦瓜籽核糖体失活蛋白(RIP)经聚乙二醇(PEG)修饰后的体外及动物体内免疫学特性的变化。方法用MTT法测定RIP和RIP-PEG结合物对小鼠黑色素瘤细胞的抑制率;通过间接ELISA法测定RIP和RIP-PEG结合物在小鼠体内的免疫原性;以全身主动过敏实验(ASA)和被动皮肤过敏实验(PCA)来比较二者在豚鼠和大鼠体内的过敏毒性。结果RIP-PEG结合物对小鼠黑色素瘤细胞B16的抑制率约为RIP的70%,产生的特异性IgG与RIP比较显著下降(P<0.01),诱发的过敏反应也显著降低。结论苦瓜籽RIP经PEG修饰后,其抗肿瘤活性、免疫原性和过敏毒性均显著降低。
- 白竹梅沈富兵吴民泸邓缅卞晓晓陈怡雯孟延发
- 关键词：核糖体失活蛋白免疫原性
- 苦瓜蛋白RIP的免疫毒性研究被引量：6
- 2009年
- 目的分离纯化苦瓜籽核糖体失活蛋白(RIP),对RIP在动物体内急性毒性和免疫毒性进行研究。方法采用离子交换层析、凝胶过滤层析等方法提取苦瓜籽RIP,对其进行小鼠急性毒性实验,确定小鼠半数致死量(LD50),并通过豚鼠全身主动过敏试验和大鼠被动皮肤过敏试验,探讨苦瓜籽RIP的免疫毒性。结果苦瓜籽RIP对小鼠的LD50为25.2 mg/kg,全身主动过敏试验中,RIP高、低剂量组豚鼠出现明显过敏反应,多数迅速死亡,被动皮肤过敏试验中,RIP组大鼠皮肤出现明显蓝斑。结论苦瓜籽核糖体失活蛋白具有较强的免疫毒性。
- 万莉孟延发沈富兵郑崛村邓念华张立实
- 关键词：急性毒性试验免疫毒性
- MAP30-PEG结合物对A549体外细胞增殖作用的研究被引量：2
- 2012年
- 目的探讨苦瓜籽核糖体失活蛋白MAP30及其聚乙二醇修饰物对人肺腺癌细胞A549增殖、细胞凋亡的影响和caspase3相关凋亡途径的诱导作用。方法用MTT法测定MAP30和MAP30-PEG结合物对人肺腺癌细胞A549的抑制率;通过Hoechst33258荧光染色观察A549细胞凋亡形态,并用流式细胞术测定细胞凋亡率以及用western blot检测凋亡细胞caspase3表达。结果 MAP30和MAP30-PEG结合物均对A549有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性关系;MAP30-PEG结合物对A549细胞增值抑制率约为MAP30的60%;Hoechst33258荧光染色后均呈典型凋亡形态;流式细胞术检测显示,MAP30和MAP30-PEG结合物作用于A549细胞48 h后均可使A549细胞呈现Sub-G1凋亡峰,凋亡率分别为58.7%、42.7%;MAP30和MAP30-PEG结合物对胞内caspase3在凋亡过程中显示有激活作用。结论 MAP30和MAP30-PEG结合物均对A549增殖有明显的抑制作用;两者均能通过caspase3途径诱导细胞凋亡。
- 邓缅刘双凤孟尧沈富兵吴民泸郑崛村孟延发
- 关键词：CASPASE3
- 聚乙二醇修饰对α-苦瓜素抗肿瘤活性的影响被引量：2
- 2011年
- 目的探讨苦瓜籽核糖体失活蛋白α-苦瓜素(α-MMC)经聚乙二醇(PEG)修饰后,其体外细胞毒性和体内抗肿瘤活性的变化。方法用MTT法测定α-MMC和PEG-α-MMC结合物对小鼠乳腺癌细胞EMT-6的抑制率;通过BALB/C小鼠模型研究药物对EMT-6细胞嫁接瘤生长的抑制作用。结果在相同的条件下,PEG-α-MMC结合物对体外培养的EMT-6细胞生长抑制效果相对α-MMC降低了30%,且两者对肿瘤细胞的毒性呈剂量和时间依赖性。PEG-α-MMC结合物的体内抗肿瘤活性比相同剂量的α-MMC增加约10%,且两者对肿瘤生长的抑制作用呈剂量依赖性。结论α-MMC经PEG修饰后,其体外抗肿瘤活性显著减低,而体内抗肿瘤活性增高,预示PEG-α-MMC结合物具备更好的抗肿瘤潜能。
- 伍黎黎沈富兵刘敏孟延发
- 关键词：聚乙二醇修饰抗肿瘤活性
- 聚乙二醇化促红细胞生成素在猕猴体内的药代动力学分析被引量：2
- 2010年
- 目的分析聚乙二醇(相对分子质量40000)化促红细胞生成素(PEG-EPO)在猕猴体内的药代动力学特征。方法建立检测PEG-EPO的双抗体夹心ELISA方法,并进行验证。用1、3和9mg/kg3个剂量的PEG-EPO经静脉注射猕猴,给药后各时间点检测猕猴体内的血药浓度,用DAS软件获取各剂量组药代动力学参数。结果PEG-EPO在猕猴体内的代谢过程符合二室开放模型,1、3和9mg/kg3个剂量的PEG-EPO的消除半衰期(t1/2β)分别为(51.89300±5.39558)、(42.48550±3.01606)和(56.46130±6.81932)h;AUC0～144分别为(109.32±9.82)、(236.23±36.16)和(722.55±84.31)mg/L·h。结论相对分子质量为40000的PEG修饰的EPO能显著延长其在猕猴体内的半衰期。
- 郑崛村沈富兵邓念华孟延发
- 关键词：聚乙二醇促红细胞生成素药代动力学
- 苦瓜籽核糖体失活蛋白的基本性质研究被引量：3
- 2009年
- 经硫酸铵分级沉淀、SP-Sepharose FF离子交换层析、Blue Sepharose CL-6B亲和层析和Superdex75分子筛层析从苦瓜籽中纯化出苦瓜核糖体失活蛋白．纯化的蛋白经IEF、梯度PAGE、SDS-PAGE和Periodate—Schiff分析均为单一蛋白着色带或单一糖蛋白着色带．根据SDS—PAGE计算其相对分子量为3．0×10^4Da，IEF显示其pI为9．0．N端测序结果为Asp—Val—Ser—Phe-Arg．采用傅里叶变换红外光谱（FTIR）和圆二色谱（CD谱）对纯化RIP的二级结构进行定量分析，结果显示其α-螺旋和β-折叠含量均在30％以上．
- 包凌晟吴民泸聂宇孟延发
- 关键词：核糖体失活蛋白
- α苦瓜素对大鼠长期毒性实验的血液学指标分析
- 2011年
- 目的探讨长期毒性实验中α苦瓜素(α-MMC)对大鼠的血液学影响。方法将SD大鼠随机分为生理盐水对照组、α苦瓜素各剂量组(6.25,2.08,0.70mg/kg),隔日经尾静脉注射给药一次,连续28天,停药后恢复14天,分别在给药期末和恢复期末进行血液常规检查、流式细胞分析和骨髓象检查。结果连续给予大鼠α苦瓜素28天后,随着剂量的增加,WBC、LYM、RBC、HGB逐渐减少,NEU和PLT则逐渐增多。经过14天的恢复期,各血液学指标的异常变化有所改善。结论长期给予α-MMC会引起大鼠以血细胞数量变化为主的血液学毒性变化。
- 唐昆段佳慧郑崛村孟延发沈富兵汪云利
- 关键词：长期毒性实验血液学
- 苦瓜蛋白MAP30的HLA-A2/A3限制性CTL表位预测
- 2010年
- 目的:预测苦瓜蛋白MAP30的HLA-A2/A3限制性CTL表位。方法:应用lasergene7.0和NetCTL-1.2Server对MAP30进行HLA-A2/A3限制性CTL表位预测。结果:MAP30的二级结构含有8个α-螺旋和9个β-折叠股;柔韧性良好氨基酸区域为19-40、99-146、166-273;亲水性指数较高区域为22-45、97-114、117-148、180-198、224-257、265-275;抗原性指数较高区域为19-28、63-71、98-114、118-123、224-246、248-260、262-274;有30个可能CTL表位,综合分析后获得2个HLA-A2和5个HLA-A3限制性CTL表位。结论:MAP30具有潜在的7个HLA-A2/A3限制性CTL表位。
- 郑崛村沈富兵孟延发邓念华
- 关键词：CTL表位预测SERVER
- α-苦瓜素及α-苦瓜素-PEG体外抗HSV-1的研究被引量：7
- 2012年
- 目的研究苦瓜籽核糖体失活蛋白α-苦瓜素(α-MMC)体外抗单纯疱疹病毒(HSV-1)的活性及其聚乙二醇修饰物(α-MMC-PEG)保留这一活性的程度。方法采用MTT法测定α-MMC和α-MMC-PEG对Vero细胞的体外毒性;通过对所培养的上清液中HSV-1囊膜糖蛋白抗原的测定、细胞和病毒的预处理试验,研究了α-MMC和α-MMC-PEG体外抗HSV-1的活性。结果α-MMC和α-MMC-PEG对HSV-1囊膜糖蛋白抗原分泌的抑制作用均呈剂量依赖性,IC50分别为0.67、2.94μmol.L-1;相同剂量下,α-MMC-PEG可保留60%天然α-MMC的抑制活性。3.3μmol.L-1的α-MMC和α-MMC-PEG直接作用病毒后使Vero细胞的存活率分别提高了22%、17%。结论α-MMC经PEG修饰后可保留较高的抗HSV-1活性,修饰前后都对HSV-1有一定的直接灭活作用。
- 黄文虎邓缅孟延发
- 关键词：聚乙二醇修饰单纯疱疹病毒抗病毒活性
- 苦瓜籽α-苦瓜素的分离纯化及其生物活性的研究被引量：3
- 2010年
- 目的建立一种快速、高效制备α-苦瓜素的方法 ,并初步研究其部分生物活性。方法用硫酸铵分级沉淀、SP-Sepharose FF离子交换层析、Sephacryl S-100分子筛层析以及Macrocap SP离子交换层析等方法 ,从苦瓜籽中纯化出苦瓜蛋白(α-MMC);通过MTT实验,研究了α-MMC的抗肿瘤活性;测定HepG2.2.15 cell的培养上清液中HBsAg和HBeAg的含量,研究了α-MMC的抗HBV活性。结果与结论α-MMC具有抑制HBV和肿瘤细胞增殖的作用,呈时效和量效依赖性。
- 刘盛邦吴民沪黄文虎杨梅强邓缅姚兴川孟延发
- 关键词：分离纯化抗肿瘤活性抗病毒活性
