湖南省卫生厅重点资助项目(Z02-01)
- 作品数：1 被引量：1H指数：1
- 相关作者：贺智敏周敏陈主初杨芳吕辉更多>>
- 相关机构：中南大学更多>>
- 发文基金：湖南省卫生厅重点资助项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人HER2胞外区基因重组及重组蛋白的纯化被引量：1
- 2006年
- 为在体外纯化可溶性HER 2胞外区蛋白并提高其原核表达产量,将多聚酶链式反应(PCR)方法获得的HER 2基因胞外段编码区重组至pGEX-6P-1质粒,转化大肠杆菌BL 21,采用不同的诱导条件分析融合蛋白的表达及其溶解性,不溶的包涵体经变性复性,与裂解液上清分别经G lu tath ione Sepharose 4B亲合纯化融合蛋白。结果发现,重组蛋白在原核细胞中以可溶和不可溶两种表达形式存在,但以不溶的包涵体形式为主。低温(30℃)、较高的细菌密度(A 600=1.8)和适当的培养基添加剂能有利于可溶性融合蛋白的表达。G lu tath ione Sepharose 4B亲合纯化细菌裂解液上清和复性后的融合蛋白,其产量为1.23 m g/L菌液,最大限度地获得了可溶性的HER 2蛋白胞外段,为HER 2特异性抗体的制备及其功能研究打下了良好的基础。
- 刘孝荣贺智敏杨芳余艳辉吕辉周敏陈主初
- 关键词：人表皮生长因子受体2基因重组蛋白纯化
