国家科技重大专项(2008ZX08012003)
- 作品数：6 被引量：25H指数：3
- 相关作者：王晶隋志伟李亮臧超余笑波更多>>
- 相关机构：中国计量科学研究院中国计量学院北京化工大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：一般工业技术机械工程农业科学轻工技术与工程更多>>
- 转基因植物Real-time PCR方法检出限和定量限的研究
- 2012年
- 目前Real-timePCR(Rt-PCR)方法在转基因植物定量检测中应用最为广泛。有关该方法的检出限和定量限的计算并没有达成统一。本文采用统计模型对三种转基因植物进行实时荧光定量PCR方法检出限和定量限的研究。实验结果表明:转基因玉米NK603检出限5拷贝,定量限14拷贝;转基因棉花Mon15985检出限5拷贝,定量限12拷贝;转基因油菜Oxy235检出限4拷贝,定量限9拷贝。是利用统计学方法对转基因植物荧光定量PCR方法检出限和定量限研究的一个积极尝试,可用于其他转基因植物检测中检出限和定量限的确定。
- 隋志伟王晶李亮谢田法
- 关键词：转基因植物检出限
- 转基因水稻种子核酸提取方法的比较研究被引量：2
- 2011年
- 以转基因水稻克螟稻2号及其受体水稻秀水11的种子为试验材料,将水稻种子脱壳磨成粉末后,称取100mg粉末分别用传统CTAB法和5种核酸提取试剂盒进行水稻基因组DNA的提取,其中试剂盒A和试剂盒B为磁珠法,其余为硅胶过柱法,将提取的基因组DNA通过琼脂糖凝胶电泳、紫外分光光度计、荧光定量PCR等3种检测方法比较其提取效果,并结合提取时间和提取成本的比较,以期找到性价比最佳的提取方法。结果表明,试剂盒A和试剂盒B提取的基因组DNA完整性最好、纯度和提取效率最高,综合提取效果、耗时及成本等因素考虑,试剂盒B的性价比最佳。本研究为转基因水稻种子的检测和研究奠定了基础。
- 隋志伟余笑波王晶李亮臧超叶子弘
- 关键词：转基因水稻基因组DNA
- TaqmanMGB探针冻融稳定性研究
- 2011年
- TaqmanMGB探针的稳定性是实时荧光定量PCR准确定量的关键因素之一。然而在实验过程中，常常因为运输、实验室保存或使用条件的变化，造成探针的反复冻融，影响实验结果。采用高效液相色谱技术定量研究了反复冻融的MGB探针的稳定性；并比较分析了冻融探针对qPCR的影响程度。结果表明：MGB探针可以耐受30次以内的反复冻融，随着探针浓度的降低，探针反复冻融后qPCR量值波动区间增大，因此，为保证结果稳定性，qPCR实验使用的MGB探针应尽量减少反复冻融次数。
- 臧超王晶李亮隋志伟余笑波黎朋
- 关键词：计量学高效液相色谱实时荧光定量PCR
- 转基因水稻克螟稻标准物质的初制备被引量：4
- 2011年
- 建立了转基因水稻克螟稻基体标准物质的初制备体系。按照0．5％、1％、2％、5％的质量比分别加入阳性粉末和阴性粉末，配制成4个水平的基体标准物质。实验结果表明，所选的阳性粉末和阴性粉末的水分分别为3．288％和4．039％，粒径均小于200斗m。从标识“金粉”的检测结果也可以看出，4个水平的基体标准物质均具有较好的均匀性。克螟稻基体标准物质的前期制备符合转基因基体标准物质的要求，可为后期进一步考察其稳定性和定值等参数提供基础。
- 余笑波叶子弘隋志伟李亮臧超王晶
- 关键词：计量学标准物质转基因水稻克螟稻
- 转基因大豆Mon89788基体标准物质协同实验研究被引量：5
- 2011年
- 对研制的3个含量水平的转基因大豆Mon89788基体标准物质进行多家实验室的验证研究。研究过程包括转基因大豆中基因组DNA的提取和转基因组分的定量PCR方法确认，标准物质的多家实验室协同实验，以及测最的不确定度评估。多家测定分析结果表明，转基因大豆Mon897883种不同外源基因／内源基因含量水平的标准物质参考值和扩展不确定度分别为0．35％±0．17％，0．61％±0．14％，3．17％±1．70％（k=2）。基体为大豆粉的该标准物质可用于转基因大豆含量的定量检测。
- 张玲盛灵慧王晶曹应龙柳方方隋志伟卢长明
- 关键词：计量学转基因大豆实时荧光定量PCR基体标准物质
- 转基因定量检测用质粒分子标准物质研究进展被引量：16
- 2012年
- 近10年来,应用于转基因植物产品定量检测的质粒分子标准物质凭借其易于富集,快捷高效等优点,成为各国检测机构的研究热点。对国内外转基因植物核酸定量检测用的质粒分子标准物质研究进展进行总结和评述,并且对该类标准物质在研制过程中的问题进行分析,同时展望了该类标准物质的发展与应用。
- 李亮王晶隋志伟臧超余笑波
- 关键词：标准物质均匀性稳定性不确定度核酸定量
