目的在粪肠球菌脂磷壁酸(LTA)作用的炎症环境下,研究布鲁顿酪氨酸激酶(BTK)在破骨细胞中的作用,从而为根尖周炎的治疗提供实验依据。方法 PCR检测粪肠球菌LTA刺激破骨细胞后BTK基因水平的表达情况。以浓度300ng/mL的人重组蛋白BTK(recombinant human BTK,rhBTK)刺激破骨细胞,用CCK8法检测破骨细胞增殖和RT-PCR检测破骨细胞分化标志因子TRAP基因水平表达情况。结果破骨前体细胞5d诱导成功。PCR结果发现粪肠球菌LTA刺激后BTK和TRAP的mRNA表达量明显增高;免疫荧光可见LTA刺激后BTK在破骨细胞中的定位情况;300ng/mL rhBTK组可以促进破骨细胞增殖;PCR结果显示,加入rhBTK后,破骨细胞分化标志因子TRAP的mRNA水平升高。结论在粪肠球菌LTA作用的炎症环境下,BTK表达升高;增高BTK后,可以促进破骨细胞的增殖及分化。研究发现BTK参与了破骨细胞的炎症反应进程。
背景:生物活性物质Biodentine具有良好的抗压强度、粘接强度及较少的微渗漏等诸多优点,已被成功应用于多种临床适应证,然而有关Biodentine是否可促进成骨细胞成骨的研究罕见。目的:研究不同浓度Biodentine对人骨肉瘤细胞MG-63增殖及成骨作用的影响。方法:制备不同浓度梯度(1、1/2、1/4、1/8和1/16)的Biodentine浸提液。将人骨肉瘤细胞MG-63分6组培养,分别加入MEM培养液(对照组)及5种浓度的Biodentine浸提液,采用CCK-8法检测培养第1,3,5,7天的细胞增殖,筛选Biodentine浸提液最佳浓度。将人骨肉瘤细胞MG-63分2组培养,分别加入MEM培养液(空白对照组)及最佳浓度的Biodentine材料浸提液(实验组),培养第1,3,5,7天,采用Real-time PCR法检测细胞中成骨因子Runx2 m RNA表达;培养第10,14天行茜素红染色,观察细胞钙化结节形成情况。结果与结论:(1)培养第1,3天时,不同浓度Biodentine材料浸提液组活细胞数量与对照组相比无差异;培养第5天,1浓度材料浸提液组活细胞数量明显低于对照组(P<0.05),1/2、1/4、1/8浓度材料浸提液组活细胞数量与对照组比较无差异,1/16浓度材料浸提液组活细胞数量明显高于对照组(P<0.05),因此实验选择1/16浓度材料浸提液进行后续实验;(2)实验组培养第1,3,5,7天的Runx2 m RNA表达量分别为空白对照组的1.14,5.29,1.08,2.11倍(P均<0.05);(3)培养第10天时,实验组与空白对照组均未见矿化结节;培养第14天,两组均可见矿化结节,实验组的面积更大、颜色更深;(4)结果表明在一定浓度下,Biodentine可促进人骨肉瘤细胞MG-63增殖及成骨活性。
目的研究混合菌在大鼠根尖周炎过程中对Toll样受体2（Toll-like receptors 2,TLR2）的表达影响。方法取20只SD大鼠,随机分为4组,每组5只。对鼠的右侧下颌第一磨牙开髓,A1-A4组封药时间分别为1、2、3和4周。对照为健康的左侧下颌第一磨牙。按照实验设计的时间点处死SD大鼠,提取右下颌第一磨牙根尖区组织,采用Real-time PCR检测TLR2mRNA的表达情况。结果对照中有少量TLR2mRNA表达,A1和A2组TLR2mRNA的表达水平（1.71±0.10 vs 2.49±0.22）呈增高趋势,分别是对照数值（1.00）的1.71倍和2.49倍（P〈0.05）;A3组最高峰（2.94±0.14）为对照（1.00）的2.94倍（P〈0.05）;但A4组（1.79±0.14）开始下降。A2与A3两组（2.49±0.22 vs 2.94±0.14）比较差异有统计学意义。结论 TLR2在大鼠的混合菌感染的根尖周炎全过程中均有所表达,其表达水平在根尖周炎中发挥着重要作用。
