云南省应用基础研究基金(2009ZC190M)
- 作品数：12 被引量：26H指数：3
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- 相关机构：云南烟草科学研究院昆明理工大学更多>>
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- 相关领域：农业科学轻工技术与工程医药卫生生物学更多>>
- 体外微核试验重要影响因素研究被引量：6
- 2013年
- 为了提高体外微核试验结果的可重复性和可比性,通过依据不同判定标准对同一受试物诱发细胞微核率进行统计、检测同一受试物对不同代次CHO细胞的微核率,研究了判定标准、细胞连续传代代次对体外微核试验结果的影响。结果表明,判定标准的不同对同一受试物诱发细胞微核率有显著影响;随细胞连续传代代次的升高,同一受试物对CHO细胞微核率呈上升趋势,连续传代9代以内细胞微核率较为稳定。判定标准、细胞连续传代代次是体外微核试验需要控制的重要因素。
- 管莹高茜朱洲海米其利李雪梅缪明明夭建华
- 关键词：体外微核试验
- 卷烟全烟气直接暴露方法的研究进展
- 2013年
- 综述了卷烟全烟气直接暴露方法的研究现状,分析了全烟气暴露试验的烟气暴露量控制与表征,以及影响该试验的重要影响因素,最后对全烟气直接暴露方法存在的问题进行了讨论和展望。
- 夭建华胡明阳米其利黄海涛唐萍李雪梅缪明明
- 关键词：细胞细菌体外试验
- 卷烟主流烟气细胞毒性在5种细胞系中的反应差异被引量：2
- 2011年
- 为考察不同细胞系对卷烟主流烟气细胞毒性检测结果的影响,为我国进行烟气毒理学评价选用适合的细胞系提供试验依据,选用中国仓鼠卵巢细胞系(CHO)、中国仓鼠肺细胞系(CHL)、中国仓鼠肺成纤维细胞系(V79)、人支气管上皮细胞系(BEAS-2B)和人肝癌细胞系(HepG2)共5种细胞系,采用中性红摄入法检测卷烟主流烟气总粒相物和气相物的细胞毒性。结果表明:5种细胞系对卷烟主流烟气总粒相物和气相物的反应敏感程度存在差异,对于烟气总粒相物,BEAS-2B最为敏感,HepG2最不敏感,CHL、V79和CHO产生的IC50差异无统计学意义;对于烟气气相物,CHO和BEAS-2B较为敏感,CHO产生的细胞抑制率与CHL、V79、BEAS-2B和HepG2的差异有统计学意义。综合考虑各细胞系对烟气总粒相物和气相物的敏感程度以及生长培养特点,认为CHO是较为理想的用于评价卷烟主流烟气细胞毒性的细胞系。
- 夭建华缪明明米其利李雪梅黄海涛唐萍
- 关键词：卷烟主流烟气总粒相物细胞毒性细胞系中性红
- 剑桥滤片-液-液捕集系统各部分烟气捕集物的细胞毒性比较
- 2012年
- 为考察烟气捕集在卷烟主流烟气体外细胞毒性检测中的作用,采用3种捕集系统:剑桥滤片-pH7.0 PBS-丙酮、剑桥滤片-pH7.2 PBS-乙酸乙酯和剑桥滤片-pH7.4 PBS-70%甘油捕集同一卷烟主流烟气的粒相物和气相物,用中性红细胞毒性法检测了各部分烟气捕集物对中国仓鼠卵巢细胞(CHO)的毒性作用,气相色谱-质谱法检测了3种有机溶剂烟气捕集物的化学成分。结果表明:①细胞毒性的大小顺序为:剑桥滤片捕集物>PBS捕集物>有机溶剂捕集物;②在第2级捕集物中,pH7.4 PBS烟气捕集物的细胞毒性显著大于pH7.0和pH7.2 PBS烟气捕集物;③在第3级捕集物中,70%甘油烟气捕集物的细胞毒性最大,丙酮和乙酸乙酯的较小,且二者比较接近;④3种有机溶剂捕集的烟气气相物部分主要是醛类、酯类、烷烃和苯系物,70%甘油捕集了较多的烷烃和苯系物。剑桥滤片捕集的烟气冷凝物反映了部分烟气对CHO细胞的中性红细胞毒性,剑桥滤片-pH7.4 PBS溶液-70%甘油捕集的烟气物质可以较全面地反映烟气的细胞毒性。
- 夭建华米其利耿永勤杨叶昆黄海涛李雪梅缪明明唐萍
- 关键词：丙酮乙酸乙酯细胞毒性中性红
- CHO细胞初始接种密度对细胞毒性试验结果的影响被引量：7
- 2012年
- 考察了CHO细胞初始接种密度对体外细胞毒性试验结果的影响。通过细胞倍增试验检测不同初始接种密度下CHO细胞倍增时间的差异,并分别采用中性红比色法及MTT比色法检测CHO细胞初始接种密度对细胞毒性试验结果的影响。结果表明,CHO细胞初始接种密度对细胞毒性试验的结果存在一定影响:以2×104～6×104个·mL-1为细胞初始接种密度,CHO细胞在48h内生长速度较为稳定;以4×104～6×104个·mL-1为细胞初始接种密度,中性红比色法毒性试验结果较为稳定;以2×104～4×104个·mL-1为细胞初始接种密度,MTT比色法细胞毒性试验结果较为稳定。在不同的细胞毒性试验中选择适合的细胞初始接种密度有助于提高细胞毒性试验结果的可重复性。
- 管莹夭建华高茜曾婉俐黄海涛李雪梅缪明明
- 关键词：MTT比色法细胞毒性
- CHO细胞连续传代培养对细胞毒性试验结果的影响
- 2012年
- 研究了CHO细胞连续传代培养对细胞毒性试验结果的影响。对不同代次CHO细胞形态进行观察,并利用中性红比色法、MTT比色法检测同种受试物对不同代次CHO细胞的抑制率是否有显著差异。结果表明:随着细胞代次的升高,细胞的形态、胞浆折光性、边界、排列均发生了改变;同种受试物对CHO细胞的抑制率随细胞代次的升高呈上升趋势;中性红比色法较MTT比色法对细胞的衰老更灵敏。为了提高细胞毒性试验结果的可重复性以及可比性,细胞代次是需要控制的重要因素。
- 夭建华管莹高茜米其利朱洲海李雪梅缪明明
- 关键词：CHO细胞连续传代细胞毒性MTT比色法
- 应用流式细胞仪进行CHO细胞计数及存活率计算被引量：2
- 2012年
- 以CHO生物工程细胞为对象,探索了流式细胞仪在细胞计数和细胞存活率计算方面的应用。通过设定侧向角散射SS、电子体积EV及荧光强度FL3等3个参数,编制CHO细胞计数程序,再应用流式细胞仪进行细胞计数和存活率计算,其结果与血球计数板法基本一致,但操作更迅速、SD值更低,说明流式细胞仪法较血球计数板法更高效稳定。流式细胞仪法提高了生物工程的生产效率和毒理学评价的准确性,可应用于大规模细胞实验中。
- 高茜管莹米其利李雪梅缪明明夭建华
- 关键词：CHO细胞流式细胞仪血球计数板细胞计数细胞存活率
- CHO细胞中性红试验参数研究被引量：2
- 2010年
- 为探讨中性红摄入法测定中国仓鼠卵巢细胞(CHO细胞)活性的有效性,为中性红比色法用于卷烟烟气毒理学评价提供参考.采用中性红吸入法,当中性红质量浓度为50～5000μg/mL,培育时间3h,溶解液pH值为3.0～4.0范围内,吸光值(A540nm)与CHO细胞的活细胞数呈正相关,是较为合适的实验参数.结果表明中性红比色法灵敏准确,结果稳定,操作简便,可以用于卷烟烟气细胞毒性的评价.
- 唐萍米其利倪红梅李祝华夭建华
- 关键词：细胞毒性中性红CHO细胞卷烟
- 溶剂对卷烟烟气气相物捕集和细胞毒性检测的影响被引量：2
- 2010年
- 通过对不同溶剂和溶剂捕集液对卷烟烟气毒理学评价中常用细胞株的毒性作用研究,为卷烟烟气气相物捕集时选择高捕集率、低细胞毒性的溶剂提供依据.采用中性红细胞毒性法,研究了10种常用溶剂对中国仓鼠卵巢细胞的毒性作用,以及细胞毒性作用较小的溶剂的烟气捕集液对5种常用细胞株的毒性作用.在检测剂量范围内对中国仓鼠卵巢细胞的毒性作用结果为:磷酸缓冲液和乙酸乙酯无毒性作用;二甲基亚砜、70%甘油、无水乙醇、甲醇和丙酮的毒性作用较小;正丁醇、异丙醇和二氯甲烷的毒性作用较大.70%甘油、乙酸乙酯和丙酮的烟气气相物捕集液对5种细胞株的毒性作用大小不相同,其中70%甘油对卷烟烟气气相物的捕集效率相对较高,本身毒性较低,是较为理想的卷烟烟气气相物捕集溶剂.
- 米其利唐萍倪红梅黄海涛夭建华
- 关键词：溶剂细胞毒性细胞株中性红
- 卷烟抽吸过程中重金属元素的转移量及转移率研究被引量：7
- 2010年
- 为了解卷烟抽吸过程中重金属元素的转移量和转移率,采用外加法于卷烟样品中添加不同含量的重金属元素标样,抽吸后对样品主流烟气总粒相物、主流烟气气相、灰份和滤嘴中的重金属元素进行分析检测,并进一步研究了重金属元素在不同添加量时向主流烟气总粒相物、主流烟气气相、灰份和滤嘴中的转移量及转移率.结果表明,主流烟气气相中未检测到重金属元素的存在;重金属元素在烟支燃吸过程中大部分均转移至灰份中,只有少量转移至主流烟气总粒相物和滤嘴中;此外,重金属元素向主流烟气总粒相物和滤嘴中的转移具有一定的饱和度.
- 黄海涛夭建华耿永勤缪恩铭李祝华李雪梅
- 关键词：重金属元素转移率灰份
