陕西省自然科学基金(2010JM4005)
- 作品数：3 被引量：6H指数：1
- 相关作者：陈衍刘文超韩晟薛妍更多>>
- 相关机构：第四军医大学西京医院第四军医大学口腔医院第四军医大学更多>>
- 发文基金：陕西省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 人MUC4启动子驱动的HSV-TK重组腺病毒靶向杀伤SGC-7901胃癌细胞的实验研究被引量：1
- 2012年
- 目的:构建人粘蛋白(MUC4)启动子驱动下的单纯疱疹胸苷激酶基因(HSV-TK)重组腺病毒,研究其对SGC-7901胃癌细胞的靶向杀伤作用。方法:克隆MUC4启动子区625bp活性序列,构建重组荧光素酶报告基因载体pGL3-MUC4,检测其在SGC-7901胃癌细胞及NIH3T3成纤维细胞中的转录活性。以AdEasyTM腺病毒系统为载体,构建MUC4启动子驱动下的HSV-TK重组腺病毒rAdeno-MUC4-TK,感染SGC-7901及NIH3T3,经更昔洛韦(GCV)处理,MTT法检测细胞活力,TUNEL法检测细胞凋亡。结果:成功扩增出大小为625bp的MUC4启动子序列。pGL3-MUC4在SGC-7901细胞中具有强转录活性,转录活性高于强启动子SV40 6.6倍,而NIH3T3成纤维细胞系中几乎无转录活性。构建重组腺病毒rAdeno-MUC4-TK,MTT法和TUNEL检测结果显示,其与GCV联合能够诱导SGC-7901细胞凋亡,产生靶向细胞毒作用。结论:人MUC4启动子驱动下的HSV-TK重组腺病毒联合GCV对SGC-7901胃癌细胞具有靶向杀伤作用,MUC4启动子可以作为胃癌靶向基因治疗的工具。
- 陈衍韩晟刘文超
- 关键词：粘蛋白
- 人MUC4启动子驱动HSV-TK腺病毒靶向杀伤胃癌细胞的研究被引量：1
- 2012年
- 目的:构建人MUC4启动子驱动下的HSV-TK重组腺病毒,研究其对胃癌细胞的靶向杀伤作用。方法:免疫荧光法检测MUC4在胃癌细胞系中的表达。克隆MUC4启动子区625bp活性序列,利用重组荧光素酶检测系统检测其在SGC-7901胃腺癌细胞及NUGC4胃印戒细胞癌细胞中的转录活性。以AdEasyTM腺病毒系统为载体,构建MUC4启动子驱动下的HSV-TK重组腺病毒,与前体药物GCV联合,检测其对上述两种胃癌细胞的细胞毒作用。结果:MUC4蛋白在两种胃癌细胞的胞浆和胞膜均有表达,而在成纤维细胞中无表达。克隆的MUC4启动子片段在SGC-7901和NUGC4细胞中具有强转录活性,转录活性高于强启动子SV40,而NIH3T3成纤维细胞系中几乎无转录活性。MUC4启动子驱动下的HSV-TK重组腺病毒与GCV联合能够诱导SGC-7901和NUGC4胃癌细胞凋亡,产生特异性靶向细胞毒作用。结论:人MUC4启动子驱动下的HSV-TK重组腺病毒联合GCV对SGC-7901和NUGC4胃癌细胞具有靶向杀伤作用,MUC4启动子可以作为胃癌靶向基因治疗的工具。
- 陈衍韩晟薛妍刘文超
- 关键词：启动子转录活性腺病毒
- PI3K/AKT/mTOR通路调控乳腺癌细胞FASN过表达的分子机制被引量：4
- 2013年
- 目的:研究PI3K/AKT/mTOR通路在乳腺癌细胞FASN过表达中的作用,研究抑制该通路能否协同FASN抑制剂发挥靶向抗肿瘤作用。方法:荧光素酶检测法检测mTOR抑制剂rapamycin对乳腺癌细胞FASN转录活性的影响。Western blotting检测PI3K抑制剂LY294002及rapamycin对乳腺癌细胞AKT、pAKT、mTOR通路成员以及FASN的表达影响。分别给予乳腺癌细胞FASN抑制剂cerulenin、rapamycin及两者联合给药,MTT法检测不同干预法对细胞存活的影响。结果:Rapamycin可明显降低乳腺癌细胞FASN启动子活性,其中在FASN过表达的SKBR3细胞中最明显。LY294002作用后pAKT、pmTOR、FASN的表达均明显降低。Ra-pamycin作用后mTOR、pmTOR、p4EBP-1、pp70S6K及FASN的表达均明显下调。Cerulenin可对乳腺癌细胞产生细胞毒作用,在SKBR3中更显著。Rapamycin对乳腺癌细胞的细胞毒作用与FASN的表达无关。Rapam-ycin能够协同cerulenin对乳腺癌细胞产生细胞毒作用,且在SKBR3细胞中更明显,小剂量rapamycin联合小剂量cerulenin即达到较大细胞毒作用。结论:PI3K/AKT/mTOR通路参与调控乳腺癌细胞FASN的过表达,mTOR通路抑制剂联合FASN抑制剂有望成为高侵袭性乳腺癌新的治疗方法。
- 陈衍韩晟刘文超
- 关键词：乳腺癌脂肪酸合成酶哺乳动物雷帕霉素靶蛋白
