浙江省教育厅重点资助项目(Z200804057)
- 作品数：5 被引量：23H指数：2
- 相关作者：许传莲邹文韬彭钰芳徐珏张因皎更多>>
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- 杭白菊中黄酮类化合物及其抑制人源肿瘤细胞增殖活性的研究被引量：14
- 2010年
- 目的分离和鉴定杭白菊中黄酮类化合物并对其进行抗肿瘤活性研究。方法利用系统溶剂萃取法、聚酰胺柱色谱、半制备型高效液相色谱法分离。通过理化性质和IR、UV、MS、1H-NMR、13C-NMR等光谱数据鉴定化合物。采用MTT法测定化合物对人肿瘤细胞增殖的影响,并以氟尿嘧啶(5-FU)作为阳性对照,比较其对正常细胞的毒性作用。流式细胞术检测细胞周期分布的改变。结果分离得到8个黄酮化合物单体,分别鉴定为木犀草素(Ⅰ),木犀草素7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅱ),木犀草素7-O-β-D(6″-O-丙二酸单酰)-葡萄糖苷(Ⅲ),芹菜素(Ⅳ),芹菜素7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅴ),芹菜素7-O-β-D-(6″-O-丙二酸单酰)-葡萄糖苷(Ⅵ),香叶木素(Ⅶ),香叶木素7-O-β-D-葡萄糖苷(Ⅷ)。MTT法测定木犀草素抑制乳腺癌MDA-MB-231细胞和肝癌SMMC-7721细胞的IC50分别为56.67和72.92μmol·L-1。结论化合物Ⅲ和Ⅵ首次从杭白菊中分离得到。木犀草素能抑制MDA-MB-231和SMMC-7721增殖,阻滞其细胞周期于G2/M期,且对正常细胞无毒性。
- 彭钰芳邹文韬许传莲
- 关键词：杭白菊黄酮抑制增殖
- HPLC法测定不同产地杭白菊中3种抑制血管紧张素转化酶活性的黄酮化合物含量被引量：4
- 2010年
- 目的:建立高效液相色谱法测定不同产地杭白菊中抑制血管紧张素转化酶(ACE)活性的黄酮类化合物。方法:以本实验室从杭白菊中分离获得的3种黄酮化合物单体芹菜苷(apigenin 7-O-β-D-glucoside)、木犀草素7-O-(6″-O-丙二酸单酰)-β-D-葡萄糖苷(Luteolin 7-O-(6″-O-malonyl)-β-D-glucoside)、芹菜素7-O-(6″-O-丙二酸单酰)-β-D-葡萄糖苷(apigenin 7-O-(6″-O-malonyl)-β-D-glucoside)作为对照品,它们对ACE抑制活性筛选结果表明均有显著抑制作用。用反相高效液相色谱测定不同产地杭白菊中这3种黄酮化合物的含量,采用Agilent zorbax SB-C18色谱柱(4.6mm×150mm,5μm),流动相为0.1%乙酸溶液-乙腈,梯度洗脱60min,流速1.0mL·min-1,检测波长330nm,进样量20μL。结果:芹菜苷、木犀草素7-O-(6″-O-丙二酸单酰)-β-D-葡萄糖苷、芹菜素7-O-(6″-O-丙二酸单酰)-β-D-葡萄糖苷的线性范围分别为10.9～350μg·mL-1(r=0.9992),16.8～540μg·mL-1(r=0.9991),16.2～520μg·mL-1(r=0.9994)。平均回收率分别为100.2%,97.8%,98.2%。日内、日间精密度RSD分别为1.5%,0.6%,3.3%和1.3%,2.5%,2.9%。结论:此方法操作简便、灵敏、准确,重复性好,适用于杭白菊中具有血管紧张素转化酶抑制作用的黄酮化合物含量测定。
- 张因皎赵钰岚邹文韬房晓敏周志明许传莲
- 关键词：杭白菊黄酮类化合物血管紧张素转化酶
- 黄酮类化合物抑制肿瘤细胞增殖活性及构效关系被引量：2
- 2011年
- 通过MTT法分析比较了12种黄酮类化合物对乳腺癌细胞(MCF-7L,MDA-MB-231)、肝癌细胞(SMCC-7721)、结肠癌细胞(HCT-15)增殖抑制和细胞形态变化。根据12种化合物对癌细胞增殖抑制作用及其构效关系发现化合物FB4的A环6位羟基化能显著提高黄酮苷元化合物对癌细胞的增殖抑制作用。这些结果为改造黄酮化合物的结构,从而增强其抑制癌细胞增殖活性提供了重要依据。
- 彭钰芳许传莲
- 关键词：黄酮类化合物抑制增殖
- 毕赤酵母高密度发酵表达血管紧张素转化酶C-结构域被引量：2
- 2010年
- 血管紧张素转化酶(ACE,EC3.4.15.1)在调节血压方面具有重要作用。研究证实,ACE的C结构域(ACE-C)是使血管紧张素I(AngI)分解的主要活性位点。在5L发酵罐中,对重组毕赤酵母表达ACEC-结构域的发酵工艺进行优化,探讨温度、pH、甲醇浓度等主要因素对重组蛋白表达量和酶活力的影响。结果表明,当工业培养基添加2%蛋白胨为氮源时,ACEC-结构域的降解现象得到了有效控制;采用诱导温度为26℃,pH5.5,甲醇含量为1.5%的表达条件,ACEC-结构域表达量和酶活力分别达到446mg/L和38.2U/ml,比活力达到86U/mg,是Sigma公司ACE标准品比活力的2倍,为大规模制备ACEC-结构域蛋白,筛选专一性更强的ACEC-结构域抑制剂奠定了基础。
- 徐珏许传莲杜方尧
- 关键词：毕赤酵母ACE蛋白降解
- 人源血管紧张素转化酶-C结构域在毕赤酵母中的表达被引量：2
- 2010年
- 血管紧张素转化酶(ACE,EC3.4.15.1)在调节血压方面具有重要作用,研究证实,ACE-C结构域是体内使血管紧张素I(AngI)分解的主要活性位点。PCR扩增ACE-C结构域基因片段,克隆至分泌表达载体pPIC9K,转化毕赤酵母GS115,阳性克隆再次电转,用G418筛选高拷贝的酵母菌落进行表达条件优化,获得0.5g/L的蛋白表达量及7.178U/mL的酶活力。经Ni+亲和层析纯化,获得纯度大于97%的目的蛋白。Captopril对酶的抑制试验证明ACE-C结构域可望成为新一代抗高血压药物ACE抑制剂筛选的理想酶靶。
- 赵钰岚徐珏许传莲
- 关键词：血管紧张素转化酶催化结构域毕赤酵母卡托普利
