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云南省自然科学基金(2012FD090)

作品数：1 被引量：0H指数：0
相关作者：陈宏王运来刘均李懿更多>>
相关机构：成都军区昆明总医院中国人民解放军总医院更多>>
发文基金：云南省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
相关领域：医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇凋亡
  • 1篇印记基因
  • 1篇增敏
  • 1篇增敏作用
  • 1篇肉瘤
  • 1篇肉瘤细胞
  • 1篇细胞
  • 1篇细胞凋亡
  • 1篇基因
  • 1篇骨肉瘤
  • 1篇骨肉瘤细胞
  • 1篇过表达
  • 1篇放射增敏
  • 1篇放射增敏作用

机构

  • 1篇成都军区昆明...
  • 1篇中国人民解放...

作者

  • 1篇李懿
  • 1篇刘均
  • 1篇王运来
  • 1篇陈宏

传媒

  • 1篇中华放射医学...

年份

  • 1篇2014
共 1 条 记 录，以下是 1-1
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排序方式：
印记基因PHLDA2过表达对骨肉瘤细胞的放射增敏作用及机制研究
2014年
目的探讨印记基因PHLDA2过表达对骨肉瘤放射敏感性的影响及相关分子机制。方法通过基因转染技术，将真核表达质粒pEGFP—C3一PHLDA2导入骨肉瘤U20S细胞，经G418持续筛选获得稳定高表达PHLDA2蛋白的亚克隆细胞。实验分为3组：不转染的空白对照组，U20S；稳定转染pEGFP—C3质粒的阴性对照组，U20S—neo；pEGFP—C3-PHLDA2质粒的稳定转染组，U20S—PHLDA2。采用CKK8比色法测定4和8Gyx射线照射后细胞的增殖活性；克隆形成实验观察0～8Gy照射后细胞的存活能力；AnnexinV／PI染色法检测8Gy照射后的细胞凋亡；Westernblot测定蛋白的表达变化。建立人骨肉瘤裸鼠移植瘤模型，观察10Gy照射后PHLDA2基因的体内增敏效应。结果经筛选获得的骨肉瘤亚克隆U20S—PHLDA2细胞中PHLDA2蛋白表达上调（t=13．73，16．28，P〈0．05）。与U20S和U20S-neo组相比，PHLDA2高表达组在4和8Gy的增殖能力明显降低（t=5．00～8．23，P〈0．05），2～8Gy的克隆形成能力明显降低（t=2．52～-1．26，P〈0．05）；同时照后裸鼠移植瘤的生长抑制作用显著提高（t=3．27、2．91，P〈0．05）。8Gy照后，PHLDA2高表达组的凋亡率为（17．97±1．69）％，高于U20S组的（6．47±1．01）％和U20S—neo组的（7．15-t-O．96）％（t=10．11、9．61，P〈0．05）；同时Caspase-3活性明显提高（t=11．26、10．72，P〈0．05）。结论外源性PHDLA2基因在U20S细胞中稳定过表达能够提高骨肉瘤对x射线的敏感性，其机制可能是通过增强Caspase．3的活性、促进射线诱导的细胞凋亡作用实现的。
李懿王运来刘均李继聪陈宏
关键词：骨肉瘤印记基因细胞凋亡
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