中国博士后科学基金(20060390294)
- 作品数：4 被引量：12H指数：2
- 相关作者：喻春钊王伟林李泉骆霞岗王兴伟更多>>
- 相关机构：南京医科大学第二附属医院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家自然科学基金江苏省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 过表达Plk-1对gemcitabine诱导的胰腺癌细胞化疗敏感性的影响
- 2013年
- 目的观察Plk-1基因过表达对gemcitabine诱导胰腺癌细胞AsPC-1化疗敏感性的影响。方法①将携带有人外源性Plk-1基因的真核表达质粒转染AsPC-1细胞系设为处理组,转染空载体设为对照组,无处理组设为空白组,转染24 h后,提取细胞总RNA和总蛋白,利用RT-PCR法及Western blot鉴定AsPC-1细胞内Plk-1基因和蛋白表达水平。②采用流式细胞术检测转染组细胞凋亡的改变。③不同浓度gemcitabine作用于转染细胞,MTT法测定转染48 h后细胞增殖能力。结果①测序结果表明成功的从AsPC-1细胞总RNA中扩增Plk-1基因。RT-PCR结果表明:未转染组AsPC-1细胞组、转染空载体pcDNA3.1组及pcDNA3.1/Plk-1组24 h各组细胞内Plk-1 mRNA相对量分别为(2.14±0.16)、(2.18±0.15)、(2.58±0.18),转染pcDNA3.1/Plk-1组与其他各组相比,差异有高度统计学意义(P<0.01)。Western blot结果显示:未转染组AsPC-1细胞组、转染空载体pcDNA3.1及pcDNA3.1/Plk-1组24 h各组细胞内Plk-1基因的蛋白表达水平为(0.989±0.018)、(1.022±0.021)、(1.243±0.143),转染pcDNA3.1/Plk-1组与其他各组相比,差异有高度统计学意义(P<0.01)。②在gemcitabine作用下,pcDNA3.1/Plk-1转染组细胞凋亡率明显低于未转染组及空载体转染组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。③AsPC-1/Plk-1转染组细胞的生长抑制率亦明显高于未转染组及空载体转染组,差异有高度统计学意义(P<0.01)。结论胞浆过表达Plk-1活性分子可明显降低gemcitabine诱导的AsPC-1细胞凋亡,增强其对化疗药物的耐受性。
- 余翔王兴伟李泉骆霞岗王伟林喻春钊
- 关键词：GEMCITABINE胰腺癌
- 吉西他滨对胰腺癌细胞增殖、凋亡及保罗样激酶-1表达的影响被引量：5
- 2014年
- 目的 观察吉西他滨对胰腺癌细胞增殖、凋亡及保罗样激酶-1（PLK-1）表达的影响.方法 采用不同浓度的吉西他滨处理胰腺癌AsPC-1细胞,在电镜下观察细胞的形态,噻唑蓝（MTT）法测定细胞生长抑制情况;不同浓度（2、5 μmol/L）的吉西他滨处理细胞12、24、48、72 h后,流式细胞分析法检测细胞凋亡,以半定量逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）和Western blot检测PLK-1 mRNA及PLK-1蛋白的表达.结果 MTT结果示随吉西他滨浓度增加,细胞增殖率明显下降（P＜0.05）;流式细胞分析法检测凋亡结果示：处理组凋亡率较空白对照组明显增加（P＜0.05）;RT-PCR和Western blot检测PLK-1 mRNA及PLK-1蛋白的表达结果显示,不同时间点PLK-1 mRNA相对表达量分别为：对照组0.70 ±0.15、0.65 ±0.27、0.72 ±0.13、0.68±0.30;2 μmnol/L组：0.88 ±0.58、0.95±0.53、2.36±0.57、3.53 ±0.89;5 μmol/L组：0.89 ±0.60、1.02±0.32、3.95±1.84、4.52 ±2.25及PLK-1蛋白的表达水平分别为：对照组：0.82 ±0.41、0.78 ±0.46、1.01 ±0.05、0.88±0.25;2 μmol/L组：0.89±0.28、1.61 ±0.88、1.66 ±0.18、3.28±1.33;5μ.mol/L组：0.85±0.36、1.89±0.18、2.73±0.78、4.32±2.13,也相应升高（P＜0.05）.结论 吉西他滨能诱导AsPC-1细胞凋亡,其机制可能与细胞内的PLK-1水平改变有关.PLK-1基因表达水平与胰腺癌化疗药物敏感性密切相关.
- 余翔王兴伟李泉毛永欢骆霞岗竺慧沈佳佳王伟林喻春钊
- 关键词：胰腺癌吉西他滨脱噬作用
- β-catenin和Wnt-1在食管癌组织中的表达及其临床意义的研究被引量：5
- 2013年
- 目的研究β-catenin和Wnt-1在食管癌组织中的蛋白表达水平及其与肿瘤病理参数和预后的关系。方法 2012全年选取江苏省人民医院病理科保存的40例手术切除食管癌蜡块标本和10例癌旁组织,将其分为实验组和对照组,应用免疫组化方法检测其β-catenin和Wnt-1的蛋白表达水平,采用JD-801病理图像分析系统,利用计算机技术对病灶影像定量分析其光密度参数、灰度分布。使用Stata 9.0(USA)软件包,参考值选用10例癌旁组织的蛋白表达水平,将肿瘤组织中的表达水平与参考值进行比较,分为高表达组和低表达组,分析两组生存率是否存在差别采用Kaplan-meier法。结果 Wnt-1的表达与食管癌预后的关系:高表达组生存率比低表达组高,差异有统计学意义(P=0.0177)。β-catenin的表达与食管癌预后的关系:高表达组生存率比低表达组高,但差异无统计学意义(P=0.1010)。结论 Wnt-1和β-catenin作为Wnt信号通路的相关蛋白,与食管癌发展、侵袭和预后等方面有密切关系。
- 王丹喻春钊
- 关键词：食管癌免疫组化Β-CATENINWNT-1
- RNAi沉默Plk1对胰腺癌细胞系AsPC-1侵袭转移的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨RNAi沉默Plk1基因表达与胰腺癌细胞侵袭转移能力的关系。方法根据Plk1基因特点,设计并用化学方法合成了4个小干扰核糖核酸分子(siRNA)(shplk1-1、shplk1-2、shplk1-3、shplk1-4),脂质体转染法将短链siRNA转入AsPC-1细胞;细胞分为:未处理组为对照组、空质粒组、shplk1-1组、shplk1-2组、shplk1-3组、shplk1-4组。采用RT-PCR和Western blot法检测siRNA对Plk1表达的抑制效果;采用Transwell法检测转染后细胞侵袭能力;采用划痕实验检测转然后细胞迁移能力。结果 RT-PCR和Western blot结果示所设计的4个siRNA均能明显抑制AsPC-1细胞Plk1 mRNA水平,以shplk1-3效果最好,与对照组、空质粒组及其他三组比较,转染shplk1-3组Plk1 mRNA和蛋白的表达水平显著降低(P<0.01);以转染shplk1-3处理AsPC-1细胞后与对照组、空质粒组比较,Transwell侵袭实验证实:细胞转染24 h后,正常对照组、空质粒组和shplk1-3组穿过人工基底膜的侵袭细胞数分别为(195±16)、(176±13)、(83±5)个,侵袭能力明显降低,差异有高度统计学意义(P<0.01);细胞划痕实验证实:shplk1-3组迁移能力明显降低。结论抑制胰腺癌细胞Plk1基因,侵袭迁移能力明显降低,能够为胰腺癌的治疗提供新的策略。
- 喻春钊余翔王兴伟骆霞岗李泉竺慧王伟林
- 关键词：PLK1RNAI胰腺癌
