国家自然科学基金(81302146)
- 作品数：6 被引量：8H指数：1
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- 稳定过表达hB7-H3基因的人胰腺癌PANC1细胞株的构建
- 2017年
- 目的构建稳定过表达hB7-H3基因的人胰腺癌PANC1细胞株，为研究hB7-H3基因的功能提供基础工具。
方法将hB7-H3基因片段插入携带绿色荧光蛋白（GFP）的慢病毒质粒GV287，构建重组hB7-H3-GV287质粒，转染293T细胞，荧光显微镜下观察GFP的表达，蛋白质印迹法检测hB7-H3蛋白表达；通过慢病毒包装后测定病毒滴度。将表达hB7-H3的病毒感染人胰腺癌PANC1细胞，应用流式细胞仪检测GFP及hB7-H3阳性表达率；实时PCR及蛋白质印迹法检测感染细胞的hB7-H3 mRNA及蛋白表达。以自身环化的GV287质粒作为阴性对照（NC）。
结果重组质粒的PCR扩增片段约1 368 bp，NC质粒无扩增产物，重组质粒DNA测序结果与设计的片段完全一致，表明重组hB7-H3-GV287质粒构建成功。重组质粒转染后293T细胞表达hB7-H3蛋白，而NC质粒转染后细胞无hB7-H3蛋白表达。重组hB7-H3质粒经慢病毒包装后的病毒滴度为2×108 TU/ml。慢病毒感染人胰腺癌PANC1细胞后，细胞hB7-H3阳性表达率、hB7-H3 mRNA及蛋白表达分别为94.3%、5.09±0.24、2.85±0.27，较NC慢病毒感染的18.5%、1.28±0.53、0.44±0.69显著增加，差异均有统计学意义（P值均〈0.01）。
结论稳定过表达hB7-H3基因的人胰腺癌PANC1细胞株的构建成功。
- 李东宝李德春赵华赵鑫
- 关键词：慢病毒感染
- 表皮生长因子样结构域7通过上皮一间充质转化促进胰腺癌PANC-1细胞侵袭转移
- 2015年
- 表皮生长因子样结构域7（EGFL7）是新发现的在进化中高度保守的基因，在血管生成的成管过程中发挥重要作用。近年来的研究表明，EGFL7的表达与胰腺癌分期和不良预后密切相关。本研究旨在观察EGFL7对胰腺癌PANC-1细胞侵袭转移的促进作用，探讨上皮．间充质转化（EMT）是否是该作用的重要机制。
- 王运良周进沈笑春李智赵鑫支巧明张子祥朱兴国孥穗春
- 关键词：PANC-1细胞表皮生长因子胰腺癌间充质结构域上皮
- Rho-GDI2在胰腺癌中的表达及其临床意义
- 2014年
- 目的探讨鸟嘌呤核苷酸解离抑制因子2（Rho—GDI2）基因在胰腺癌组织中的表达及其临床意义。方法运用RT-PCR技术和免疫组化技术检测60例胰腺癌组织及配对的癌旁组织中Rho—GDI2mRNA和蛋白的表达，分析胰腺癌Rho-GDI2的表达与临床病理参数间的关系。结果胰腺癌组织及相应癌旁组织中Rho-GDI2mRNA表达量分别为0．661±0．021和0．199±0．023；Rho—GDI2蛋白阳性表达率分别为73．3％（44／60）和41．7％（25／60），癌组织的表达均显著高于癌旁组织，差异有统计学意义（P值均〈0．01）。胰腺癌组织Rho-GDI2蛋白表达与患者性别、年龄及肿瘤部位无相关性，而与肿瘤大小、分化程度、病理分期、淋巴结转移、血管侵犯等相关（P值均〈0．05）。结论Rho-GDI2在胰腺癌组织中过表达，且与胰腺癌的恶性生物学行为密切相关。
- 易彬张逸周健宋世铎赵鑫李德春
- 关键词：胰腺肿瘤病理学免疫组织化学
- 40例原发性胃肠道弥漫大B细胞淋巴瘤临床诊疗分析被引量：8
- 2017年
- 目的 探讨原发性胃肠道弥漫大B细胞淋巴瘤（PGI-DLBCL）的临床特点、诊治方法及预后.方法 对经手术治疗的40例PGI-DLBCL患者的临床资料进行回顾性分析.结果40例PGI-DLBCL患者中,首发症状以腹痛[15例（37.5%）]、腹部包块[6例（15.0%）]、腹部不适[5例（12.5%）]、腹胀[5例（12.5%）]、呕血黑便[5例（12.5%）]为主.误诊为胃癌15例,肠癌5例,消化道溃疡4例,总误诊率为60.0%（24/40）.1、2、3年生存率分别为62.3%、57.5%、52.6%.单因素分析结果显示,临床分期、国际预后指数（IPI）和治疗方法与生存率有关（P〈0.01）,性别、年龄和原发部位与生存率无关（P〉0.05）.临床分期Ⅰ~Ⅱ期患者3年生存率明显高于Ⅲ~Ⅳ期患者（68.0%比13.3%）,IPI 0~2分患者3年生存率明显高于3~5分患者（66.7%比7.6%）,手术联合术后化疗患者3年生存率明显高于单纯手术患者（75.0%比20.0%）,差异有统计学意义（P〈0.01）.结论 PGI-DLBCL患者临床特征不典型,极易误诊.IPI、临床分期、术后是否化疗是预后的影响因素.
- 王飞翟敏武亚运张海涛赵鑫
- 关键词：胃肠道
- HIF-2、Twist在胰腺癌组织中的表达及其临床意义
- 2016年
- 目的探讨缺氧诱导因子2(HIF-2)和Twist在胰腺癌组织中的表达及其临床意义。方法采用免疫组化SP法检测56例胰腺癌及其癌旁组织中HIF-2和Twist的表达,分析其与临床病理指标的关系。结果 HIF-2阳性染色主要定位于细胞质,HIF-2在胰腺癌组织中阳性表达率高于癌旁组织(76.8%vs.28.6%)(P<0.01)。Twist阳性染色定位于细胞质或细胞核,Twist在胰腺癌组织阳性表达率高于癌旁组织(69.6%vs.21.4%)(P<0.01)。HIF-2阳性表达与肿瘤大小、临床分期、淋巴结转移及血管侵犯密切相关(P<0.01或P<0.05)。Twist阳性表达与淋巴结转移及血管侵犯密切相关(P<0.01)。HIF-2与Twist在胰腺癌组织中的表达呈正相关(r=0.65,P<0.01)。结论 HIF-2和Twist在胰腺癌组织中高表达;HIF-2和Twist的表达与肿瘤侵袭和转移密切相关,可能成为潜在的抗肿瘤治疗靶点。
- 沈敏捷苗乃棣朱东明赵鑫
- 关键词：胰腺癌缺氧诱导因子TWIST
- 靶向PD-L1分子的RNAi增强树突状细胞疫苗对胰腺癌治疗作用的实验研究
- 2018年
- 目的:研究通过RNA干扰敲减程序性死亡受体配体1(programmed death receptor ligand 1,PD-L1)分子能否增强树突状细胞疫苗对胰腺癌的治疗作用。方法:免疫组化法检测42例胰腺癌及对应胰腺组织中PD-L1的表达差异;纯化CD8+T细胞和制备成熟的树突状细胞(DC),将低表达PD-L1的Panc-1细胞Panc-1/PD-L1-RNAi、阴性对照Panc-1/LV-Control细胞以及野生型Panc-1细胞分别与CD8+T细胞+DC疫苗共同培养,检测细胞上清中干扰素(IFN)-γ表达水平;3组肿瘤细胞分别建立人源化严重免疫缺陷(severe combined immunodeficiency,SCID)小鼠胰腺癌皮下移植瘤模型,以DC疫苗为治疗手段进行尾静脉注射,观察肿瘤生长情况。结果:免疫组化实验显示,胰腺癌组织较胰腺组织中PD-L1高表达,差异有统计学意义(P<0.001)。T细胞反应实验显示,PD-L1敲减肿瘤细胞组与DC和CD8+T细胞共同培养的上清中IFN-γ表达水平明显高于其他2个对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。人源化SCID小鼠体内荷瘤实验显示,敲减PD-L1表达与应用DC疫苗治疗胰腺癌皮下移植瘤具有协同作用。结论:胰腺癌较胰腺组织中PD-L1高表达,敲减胰腺癌细胞PD-L1表达与应用DC疫苗治疗可能是胰腺癌免疫治疗的有效策略。
- 蒋浩海赵鑫赵华朱新国李德春
- 关键词：胰腺癌PD-L1树突状细胞
