国家自然科学基金(81072348)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- HIV-1 Vpu蛋白的原核表达、鉴定和纯化被引量：1
- 2013年
- 目的:克隆、表达、纯化人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)Vpu蛋白,为其功能及免疫学研究奠定基础。方法:PCR扩增Vpu基因,纯化、酶切后克隆到原核表达载体pET32a中,转化大肠杆菌BL21(DE3)菌株获得表达工程菌株,IPTG诱导蛋白表达,免疫印迹鉴定目的蛋白,亲和层析纯化蛋白。结果:构建了HIV-1 Vpu蛋白的原核表达载体Vpu-pET32a,并在大肠杆菌中高效表达,目的蛋白呈可溶性形式存在,免疫印迹检测显示为目的蛋白,经Ni-NTAAgarose纯化获得了高纯度的目的蛋白。结论:在原核表达系统中表达了可溶性HIV-1 Vpu蛋白,为进一步进行HIV-1 Vpu蛋白的免疫原性和功能研究奠定了基础。
- 隋洪帅贾磊韩婧婉孙长荣李天一刘永健李敬云李林
- 关键词：原核表达
- 我国云南部分HIV-1感染者黏合素蛋白基因单核苷酸多态性研究
- 2013年
- 目的分析我国云南地区部分HIV-1感染者体内黏合素蛋白基因单核苷酸多态性,为了解我国人群HIV感染与病程进展相关的遗传因素提供基础数据。方法在云南省收集HIV-1感染者静脉血,分离外周血淋巴细胞,提取基因组DNA,PCR扩增目的基因后行Sanger测序,BioEdit软件分析序列以确定多态性位点的存在情况,Haploview v4.2软件确定多态性位点连锁情况。结果获得了来自18个民族的HIV-1感染者体内黏合素蛋白基因序列95条,检出多态性位点19个,频率>5%的位点13个,其中外显子区域6个、内含子区域4个、非翻译区3个;连锁不平衡分析显示符合Hardy-Weinberg平衡分布,g.2170、g.2305、g.2504和g.2770间任意两位点呈高度连锁,g.2305、g.2504、g.2736和g.2770间任意两位点呈高度连锁(r2≥0.8)。统计学分析显示,上述多态性位点与民族、传播途径、CD4细胞计数及病毒载量间无显著相关性。结论首次获得中国人群黏合素蛋白基因多态性数据,为进一步分析其与HIV-1感染及进程的关系奠定了基础。
- 隋洪帅韩婧婉杨绍敏贾磊刘永健李敬云李林
- 关键词：HIV-1
