中国博士后科学基金(20070420721)
- 作品数：8 被引量：11H指数：2
- 相关作者：王振海谢鹏刘建马彦孔繁元更多>>
- 相关机构：宁夏医科大学附属医院重庆医科大学附属第一医院华北煤炭医学院附属医院更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金宁夏回族自治区自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学更多>>
- 宁夏地区病毒性脑炎中新发博尔纳病病毒感染的研究
- 2010年
- 目的 研究宁夏地区新发博尔纳病病毒（BDV）在病毒性脑炎患者中的感染状况,分析病毒株的核酸序列、编码的氨基酸序列和病毒株的系统发生.方法 套式反转录实时荧光定量PCR检测60例病毒性脑炎患者血液标本;并对前期课题组检测的59例病毒性脑炎患者中BDV p24阳性样本和本实验PCR检测阳性标本使用ELISA法检测其对应脑脊液中p40抗体,对阳性标本进行连接测序,应用MEGA和DnaSP4.0软件对测序结果与国外标准株He/80、H1766、strain V等的核酸和氨基酸序列对比分析,构建病毒基因的系统发生树.结果 PCR检测119份血标本,发现有12份标本BDV p24阳性,阳性检出率为10.08%,7份BDV p40检测阳性,阳性率为5.88%;ELISA检测脑脊液核蛋白抗体,有2份阳性,阳性检出率为1.68%.基因聚合分析显示,7份BDV阳性的核酸序列中有6份与德国马源性的He/80株同源性达100%,1份仅有1个碱基发生同义突变;转录后的氨基酸对比分析显示,7份与He/80株完全一致;重构的基因系统发生树中可见宁夏病毒性脑炎患者BDV核苷酸序列与国外标准株形成一个中国（宁夏）-德国-日本的混合支系.结论 宁夏地区病毒性脑炎患者中可能存在BDV感染,其发生可能与动物的密切接触相关,病毒在种系发生中与德国马源性He/80株有极高的同源性,推断病毒有可能从国外传入本土,不排除病毒株变异的可能.
- 王振海刘建谢鹏
- 关键词：BORNA病病毒反转录聚合酶链反应酶联免疫吸附测定
- 病毒性脑炎患者血液和脑脊液NSE含量测定及其与临床的相关性研究被引量：2
- 2008年
- 目的:为了观察病毒性脑炎急性期和恢复期患者血液和脑脊液的NSE含量变化,探讨其与异常脑电图和影像学低密度灶体积等方面的相关性。方法:将42例病毒性脑炎住院患者作为观察组,25例与观察组相匹配的阑尾或胆囊摘除手术病人以及健康体检者作为对照组;采用ELISA法,检测其血液及脑脊液NSE浓度;并应用SPSS13.0统计软件包进行统计学分析。结果:病毒性脑炎急性期患者血液和脑脊液NSE浓度显著高于恢复期患者和对照组(P<0.01);血液和脑脊液NSE浓度与低密度灶体积均呈显著正相关(rcsf=0.736,P<0.01;r血液=0.685,P<0.01);轻度、中度及重度异常脑电图患者脑脊液NSE浓度均高于血液(P<0.01);重度、中度异常脑电图患者血液及脑脊液NSE浓度均高于轻度(P<0.01)。结论:脑脊液或血清中的NSE浓度,反映了神经细胞和神经胶质细胞的损害程度,也是脑组织破坏后较合适的生化标记物。
- 王振海陈建红马斌武谢鹏孔繁元
- 关键词：神经元特异性烯醇化酶病毒性脑炎酶联免疫吸附法
- BDV核蛋白在少突胶质细胞内表达定位的基础研究
- 2010年
- 目的 研究博尔纳病病毒核蛋白在转染的少突胶质细胞（oligodendroglial cell,OL）内的表达定位及其对细胞活性的影响.方法 应用RT-PCR检测转染细胞内BDVp40的基因片段,应用激光共聚焦显微镜和Western blot的方法观察核蛋白在细胞内的表达定位.应用MTT方法观察核蛋白对OL活性的影响.结果 在转染BDVp40基因片段的荧光表达质粒的OL内检测到BDVp40的基因片段;激光共聚焦显微镜提示核蛋白存在于细胞质和细胞膜中;Western blot的结果显示在细胞膜蛋白中存在核蛋白,而在细胞质中未检测到该蛋白;MTT法检测BDV核蛋白对OL活性具有明显的抑制作用.结论 通过研究转染的OL内稳定表达了BDV核蛋白,并将其定位在细胞的结构蛋白中,尤其在细胞膜中含量更为丰富,说明其可能在细胞的信号转导或介导病毒感染人胞过程中发挥关键作用.BDV核蛋白对OL的活性有抑制作用,这可能是BDV导致中枢神经系统损伤的机制之一.
- 王振海刘建谢鹏
- 关键词：博尔纳病病毒核蛋白少突胶质细胞
- 宁夏地区牛脑组织博尔纳病病毒的感染状况
- 2010年
- 目的分析宁夏地区牛脑组织博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)的感染状况,探讨阳性基因扩增片段与德国马源性标准病毒株He/80同源性。方法采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)、荧光定量巢式逆转录酶聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)分别检测宁夏地区145例健康牛脑组织中BDVp40、BDVp24基因片段,对BDVp24阳性扩增产物进行基因序列测定,并应用BLAST和DNAsist 5.0软件对测序结果进行分析。结果 145例牛脑组织中4例BDVp40、BDVp24均阳性,阳性率为2.759%,且阳性BDVp24片段的核苷酸序列与He/80同源性最高,所编码氨基酸序列相同。结论宁夏地区牛脑组织中可能存在动物源性BDV的自然感染,阳性BDV p24核苷酸序列与He/80具有高度同源性,所编码的氨基酸序列相同。
- 杨娟刘建王振海
- 关键词：博尔纳病病毒
- 病毒性脑炎的诊断及博尔纳病病毒p24基因片段的检测被引量：5
- 2009年
- 目的探讨脑脊液(CSF)、脑电图(EEG)、MRI对于病毒性脑炎的诊断价值,并检测病毒性脑炎患者外周血单个核细胞(PBMCs)中博尔纳病病毒(BDV)p24基因片段,探讨病毒性脑炎与BDV感染的关系。方法回顾性分析病毒性脑炎患者的CSF、EEG、MRI的阳性检出率并进行比较,用荧光定量巢式逆转录聚合酶链反应(FQ-nRT-PCR)方法检测病毒性脑炎患者及对照者PBMCs中BDVp24基因片段,并总结阳性患者的临床特征。结果CSF、EEG、MRI检查结果比较,CSF高于MRI检查结果阳性率(χ2=9.6,P<0.01);CSF高于EEG检查结果阳性率(χ2=7.58,P<0.01);MRI检查阳性率高于EEG(χ2=5.82,P<0.01)。PBMCs中BDVp24基因片段检测结果显示实验组4例阳性,对照组均为阴性。4例BDVp24基因片段阳性患者主要以发热、头痛、颅内压增高症状为主。结论脑脊液、MRI对病毒性脑炎的诊断价值优于EEG,部分病毒性脑炎的发生与BDV感染有关,主要以发热、头痛、颅内压增高为临床特征。
- 马彦王振海孔繁元
- 关键词：病毒性脑炎脑脊液博尔纳病病毒
- 宁夏地区人畜BDVp24基因系统发生树构建和序列分析被引量：3
- 2010年
- 目的了解宁夏及其周边地区博尔纳病病毒（BDV）的感染状况和基因特征及其种系发生来源。方法采用巢式反转录实时荧光定量聚合酶链反应（FQ—nRT-PCR），检测119例病毒性脑炎（VE）患者和其密切接触的患病或健康牛205头、绵羊978只及脑血管病患者46例、多发硬化患者13例的外周血单核细胞BDVp24片段，检出的阳性序列连同前期检出的宁夏绵羊、VE患者和抑郁症患者阳性BDVp24基因序列与GenBank中5个国家7个动物种属29例BDVp24基因序列进行比对，分析其核苷酸和氨基酸序列的同源性，重新构建基因系统发生树。结果23例阳性检测标本连同3例前期检测序列基因聚合分析显示核苷酸之间的同源相似度为96．5％-100．0％，氨基酸的同源相似度为95_3％～100．O％。与德国马源性标准株HE80同源相似度较高。构建基因的系统发生树发现宁夏绵羊、VE患者和抑郁症患者同德国马和绵羊、奥地利马都各自形成了独立的支系，其余样本形成混合支系，其中宁夏的vE患者、牛、绵羊同德国马、日本绵羊形成德国-中国宁夏-日本混合支系。结论宁夏及其周边地区人和动物BDV的感染，存在区域源性BDV独立株和国外传人基因保守株的多源状态。
- 刘建柳英王振海谢鹏
- 关键词：博尔纳病病毒病毒性脑炎绵羊
- 宁夏地区绵羊博尔纳病病毒自然感染状况研究被引量：1
- 2010年
- 目的探讨中国宁夏地区绵羊博尔纳病病毒(Borna disease virus,BDV)的自然感染状况,并分析比较中国宁夏地区绵羊自然感染BDVp24基因序列与国外人和动物来源BDV分离株及其标准株StrainV和He/80的同源性。方法采用巢式逆转录荧光定量PCR(FQ-nRT-PCR技术)检测了中国宁夏地区268例绵羊PBMCs中BDVp24基因片段,对阳性标本FQ-PCR产物进行基因序列测定,测序结果应用BLAST软件以及DNAsist5.0软件对测序结果分析,与国外人与动物来源的BDV分离株以及标准株StrainV和He/80进行序列比较。结果268例中4例绵羊外周血BDVp24基因片段阳性,阳性率为1.49%;测序分析结果表明,宁夏地区绵羊感染的BDVp24的核苷酸序列与马源性病毒株H3575同源性最近,同源性为98.84%(85/86),与标准株StrainV和He/80同源性为94.19%和100%。并且它们编码的氨基酸序列相同。结论宁夏地区绵羊中可能存在动物源性的BDV自然感染,该地区感染的BDVp24核苷酸序列与马源性病毒株H3575、标准株StrainV和He/80存在高度的同源性,其感染来源可能相同亦或存在相互之间感染的可能。
- 刘建马彦王振海谢鹏
- 关键词：BORNA病病毒
- 中枢神经系统感染性疾病的差异蛋白质组学研究现状被引量：1
- 2010年
- 中枢神经系统感染是各种生物病原体侵犯脑或脊髓实质、被膜和血管等,引起急、慢性炎症（或非炎症）性疾病。根据特异性致病因子及受累部位不同可分为病毒性脑炎、细菌性脑膜炎、真菌性脑膜炎和脑寄生虫病等。
- 赵莉郑鹏王振海谢鹏
- 关键词：中枢神经系统感染性疾病差异蛋白质组学细菌性脑膜炎真菌性脑膜炎脑寄生虫病慢性炎症
