海南省耐盐作物生物技术重点实验室开放基金
- 作品数：6 被引量：33H指数：4
- 相关作者：范吉星罗越华邓用川林栖凤黄惜更多>>
- 相关机构：海南大学中国热带农业科学院更多>>
- 发文基金：海南省重点科技项目海南省自然科学基金海南省重点学科建设基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学理学更多>>
- 木榄质膜型Na^+/H^+逆向转运蛋白的基因克隆与序列分析被引量：2
- 2012年
- 根据已发表的胡杨、毛白杨、蓖麻、番杏、番茄、盐角草等逆向转运蛋白基因的保守区设计兼并引物,通过RT-PCR和RACE技术,从木榄(Bruguiera gymnorrhiza)中克隆出Na+/H+逆转运蛋白的cDNA全长序列,长度为3 703 bp,其中,开放阅读框3 462 bp,编码1 154个氨基酸,含12个跨膜区。序列同源性分析表明,该氨基酸序列与毛果杨、蓖麻、胡杨、葡萄等Na+/H+逆向转运蛋白氨基酸序列具有很高的同源性(70%以上),表明该序列确属Na+/H+质膜型逆向转运蛋白的家族基因。
- 郭庆水于伟徐立新袁潜华
- 关键词：木榄跨膜同源性
- 胡萝卜ISSR反应体系优化的研究被引量：6
- 2010年
- 以改良CTAB法提取胡萝卜基因组DNA作为ISSR-PCR模板,通过单因素试验建立了一套适合胡萝卜ISSR-PCR的优化的反应体系,即25μL反应液中含10×buffer2.5μL,2.0mmol.L-1Mg2+,200μmol·L-1dNTPs,Taq酶1.5U,引物0.5μmol·L-1,DNA模板20ng。PCR扩增程序为:94℃预变性4min,94℃变性40s,48～58℃退火45s,72℃延伸2min,进行35个循环,72℃延伸8min,在16℃保存。应用该优化反应体系筛选出了24条有效引物。
- 邱丰艳邓用川林栖凤刘国民
- 关键词：胡萝卜ISSR
- 一种快捷有效的构建cDNA文库的方法
- 2009年
- 构建cDNA文库是研究基因组功能基因一种有效的手段，传统的建库方法通常需要在双链cDNA两端分别加上带限制性酶切位点的接头序列，通过酶切使之产生与质粒匹配的粘性末端，然后与质粒连接构成文库。本文介绍一种简单而且不需要核酸内切酶的构建cDNA文库的方法。该方法的主要步骤包括：（1）通过反转录合成cDNA第一条链，通过置换底物的方式在cDNA3’末端合成接头序列。（2）利用cDNA两端的接头引物，通过TaqDNA合成酶PER扩增合成cDNA第二条链。（3）将PCR产生的双链cDNA直接与T-载体连接。（4）将连接物转化大肠杆菌，得到cDNA文库。利用本方法，我们成功构建红树植物红海榄的cDNA文库。PCR结果显示插入的片段分布在O．5～3．0kb之间，大部分cDNA的长度在500—1000bp之间，表明cDNA具有较好的完整性。本方法具有操作简单、高效率、低成本、RNA模板需要量少的特点，而且适用于任何高等生物RNA样品。
- 徐远峰黄文峰高艳梅翟金玲黄惜
- 关键词：红海榄CDNA文库
- 红海榄根部总蛋白质提取方法的改进和双向电泳体系的建立被引量：12
- 2008年
- 分别采用TCA-丙酮沉淀法、酚法、尿素法、周涵韬法和笔者建立的酚改良法,提取红海榄根部总蛋白质,并进行了SDS-PAGE分析和双向电泳体系的优化.结果表明,酚改良法提取红海榄根部总蛋白质的纯度最高,质量最好,为建立双向电泳分析体系提供了较为理想的蛋白样品,获得了良好的双向电泳图谱.该结果为盐生植物,尤其是盐生木本植物,建立了一套可靠的蛋白提取和双向电泳方法.
- 范吉星邓用川黄惜林栖凤罗越华
- 关键词：红海榄蛋白质双向电泳
- 红海榄根部盐胁迫反应的比较蛋白质组学分析被引量：10
- 2009年
- 红海榄（Rhizophora stylosa）是一种典型的红树林盐生植物.本研究利用蛋白组学技术对淡栽（R0）和3%NaCl盐栽（R3）处理后的红海榄根部总蛋白进行了比较研究.双向电泳图谱的结果表明,R0和R3分别有981和972个蛋白点,蛋白点主要集中在分子量28-70 kD,等电点4.0-8.5之间.R0和R3之间差异明显的有15个蛋白点.其中,8个蛋白的表达量在R0中表达增高（10倍）,而在R3中相对下降.另外,7个蛋白的表达量在R0中较低,而在R3中表达量显著增高.对这15个蛋白点进行肽质量指纹图谱分析,10个蛋白点找到匹配蛋白.功能预测分析发现,在盐水栽培上调的蛋白质一般与逆境胁迫有关,淡水栽培上调的蛋白质一般与基本代谢有关.这些研究结果为进一步研究红海榄的耐盐机理提供了有意义的线索.
- 范吉星邓用川黄惜林栖凤罗越华
- 关键词：红海榄双向电泳质谱
- 分子标记辅助育种研究被引量：5
- 2008年
- 综述了分子标记选育技术的原理、基本条件、策略及应用。
- 范吉星邓用川
- 关键词：分子标记育种
