国家教育部博士点基金(20102104120027)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
- 相关作者：王业林韩阳唐娜于涓瀚苗原更多>>
- 相关机构：中国医科大学中国医科大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- X射线诱导NSCLC组织Axin表达并通过p53或JNK途径促进细胞凋亡被引量：3
- 2012年
- 目的研究X-射线对非小细胞肺癌(non-smallcelllungcancer,NSCLC)组织中Axin表达的作用,以及X射线上调Axin表达的机制。方法应用Westernblot、RT-PCR方法检测15例经过X射线照射后NSCLC组织中Axin在蛋白水平及RNA水平的表达变化情况以及caspase-3活化情况。转染Axin及AxinΔp53ΔHIPK2至A549、BE1细胞中,并施加p53或JNK抑制剂,细胞经X线照射后用流式细胞仪(FCM)检测细胞凋亡,研究Axin上调细胞凋亡的机制。结果经X射线照射后,在15例NSCLC肺癌组织中,有8例Axin在RNA水平和蛋白水平上表达上调,与Axin未上调组相比,细胞凋亡显著增加(P<0.05)。转染Axin能使A549、BE1细胞凋亡明显增加,AxinΔp53ΔHIPK2不能上调A549细胞凋亡,p53抑制剂和JNK抑制剂分别抑制A549和BE1细胞凋亡。结论 X射线诱导部分NSCLC组织Axin表达增加并促进细胞凋亡,Axin通过p53或JNK途径促进X射线诱导的细胞凋亡。检测NSCLC组织中是否存在p53基因突变并不能作为判定是否对X射线敏感的指标。
- 韩阳张勇于涓瀚苗原王亮王恩华
- 关键词：X-射线AXINJNK抑制剂
- 黏附调节因子p120ctn 1A细胞核定向表达质粒的构建及鉴定被引量：3
- 2012年
- 目的:构建并鉴定p120ctn 1A细胞核定向表达质粒pCMV/p120ctn 1A。方法:采用PCR的方法扩增人p120ctn 1A活性片段,将其插入细胞核定向表达载体pCMV/myc/nuc/GFP,构建重组质粒pCMV/p120ctn 1A,经脂质体介导转染肺癌细胞系SPC-A-1,用荧光显微镜观察绿色荧光信号,免疫细胞化学及蛋白质印迹法鉴定其在肺癌细胞SPC-A-1中的表达与定位,用Transwell小室法监测细胞侵袭能力的变化。结果:限制性双酶切及DNA测序分析结果显示,插入pCMV/p120ctn 1A的片段为2 798bp左右,与预期p120ctn 1A基因片段大小相同。转染pCMV/p120ctn 1A质粒后,荧光显微镜观察到绿色荧光信号特异性定位于细胞核内。免疫细胞化学结果显示,SPC-A-1细胞核内p120ctn的表达量显著增强。蛋白质印迹法检测证实,转染pCMV/p120ctn 1A质粒后的p120ctn 1A蛋白表达量显著上调。体外侵袭实验结果证实,转染后SPC-A-1细胞的侵袭能力明显增强。结论:成功构建了p120ctn 1A细胞核定向表达载体pCMV/p120ctn 1A,为深入研究p120ctn的核内功能提供了有力的实验工具。
- 唐娜朱华倩曹红一王业林林旭勇戴顺东
- 关键词：P120CTN重组质粒
