国家自然科学基金(30971250)
- 作品数：7 被引量：21H指数：3
- 相关作者：孙爱军葛均波邹云增王克强范凡更多>>
- 相关机构：复旦大学山东大学同济大学附属东方医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 微量氯化钴法与普通SDS缓冲液裂解法提取缺氧诱导因子-1α(HIF-1α)蛋白效率的比较
- 2013年
- 目的通过引入微量氯化钴作为稳定剂,建立一种更加简便有效提取HIF-1α蛋白的方法。方法取8只体重在22±2克之间雄性8周龄的C57BL/6小鼠,对其左侧下肢行股动脉段离断术制成下肢缺血模型,并分别以右侧下肢为对照;术后1天采用激光多普勒技术检测下肢血流灌注;术后3天取小鼠双侧股四头肌,分别用微量氯化钴法和普通SDS裂解液裂解法来提取总蛋白;用Western Blot对HIF-1α蛋白水平进行检测。结果 8只小鼠手术均成功;术后1天激光多普勒检测结果显示,小鼠缺血下肢血流灌注/健侧肢血流灌注为15.4±4.8%,下肢缺血手术成功;Western Blot显示,使用普通SDS裂解液法,缺血组HIF-1α条带较浅淡,而使用微量氯化钴法,可以清楚地观察到HIF-1α蛋白水平升高。结论微量氯化钴法能够有效稳定HIF-1α蛋白,其提取物用于后续蛋白水平实验显著优于普通的SDS裂解液法。
- 刘湘玮范书霞王聪范凡马鑫申程朱洪曹全王鹏邹云增葛均波孙爱军
- 关键词：下肢缺血
- 解酒药改善心肌梗死后心力衰竭大鼠心脏功能的观察研究被引量：1
- 2011年
- 目的观察使用解酒药是否能改善心肌梗死后心力衰竭大鼠的心脏功能。方法将60只体重相近的成年雄性SD大鼠采用冠状动脉结扎法建立急性心肌梗死模型后,随机分为4组,灌胃不同药物,分别为阴性对照生理盐水组(0.3ml/(kg.d)),阳性对照依那普利组(10mg/(kg.d)),解酒药组(0.3g/(kg.d))以及解酒药和依那普利联合用药组(0.3g/(kg.d)解酒药加10mg/(kg.d)依那普利)。所有大鼠术后每组每天定时进行药物干预,并每周定时测量体重。术后4周采集超声心动图各参数(室间隔厚度、后壁厚度、左室舒张末内径、左室收缩末内径、左室短轴缩短率、左室射血分数)来评价大鼠的心功能。结果与术前相比,术后4周解酒药组和联合用药组大鼠的体重无明显变化,而依那普利组和生理盐水组大鼠体重上升。术后4周心脏超声结果显示:与生理盐水组比较,依那普利组、解酒药组和联合用药组的左室射血分数、左室短轴缩短率均有升高(P<0.05),但三组间无显著性差异;而室间隔厚度、后壁厚度、左室舒张末内径、左室收缩末内径等参数,四组间无显著性差异。结论解酒药能有效改善心肌梗死后心力衰竭的大鼠心功能。
- 赵静静俞佳艳刘湘玮王克强邹云增葛均波孙爱军
- 关键词：心力衰竭乙醛脱氢酶2依那普利
- 辛伐他汀保护缺血-再灌注损伤心肌的线粒体蛋白质组学研究被引量：4
- 2010年
- 目的建立大鼠心肌缺血-再灌注损伤模型,通过蛋白质组学的方法研究辛伐他汀对大鼠缺血-再灌注损伤心肌线粒体代谢的保护作用。方法将大鼠随机分为辛伐他汀干预组(n=14)和生理盐水对照组(n=14),建立缺血-再灌注损伤模型,通过伊文思蓝和TTC染色评估梗死面积,提取大鼠左心室心肌线粒体蛋白行双向凝胶电泳,应用质谱分析鉴定差异蛋白点。结果辛伐他汀组和对照组相比,梗死区与危险区(梗死区+缺血区)的比值有统计学差异(29.4%±8.4%vs57.7%±6.5%,P<0.0001);梗死面积与左室面积的比值有统计学差异(15.9%±5.6%vs29.0%±8.9%,P=0.012)。双向凝胶电泳图谱分析有19个蛋白点的表达有差异,质谱鉴定了9种差异蛋白,相比对照组,辛伐他汀组4个蛋白表达上调:三功能酶亚基α(线粒体前体)、电子转移黄素蛋白脱氢酶、肌动蛋白α(心肌)、细胞色素c氧化酶亚基5A亚单位(线粒体前体);5个蛋白表达下调:L-乳酸脱氢酶B链、异柠檬酸脱氢酶[NAD]α亚基(线粒体前体)、α晶状体蛋白B链、内膜蛋白(线粒体)、肌动蛋白类似物(细胞质)。结论辛伐他汀组大鼠心肌在缺血-再灌注损伤后,心肌梗死面积显著减少,辛伐他汀改变线粒体呼吸链、能量代谢等途径上的蛋白,为阐明辛伐他汀保护缺血再灌注损伤提供了理论依据。
- 陈学颖孙爱军弭守玲弭守玲徐磊徐磊赵吉王克强邹云增
- 关键词：辛伐他汀缺血-再灌注损伤线粒体蛋白质组
- 姜黄素对大鼠肺微血管平滑肌细胞周期和增殖能力的影响被引量：2
- 2010年
- 目的探讨姜黄素对肺微血管平滑肌细胞增殖的影响,及其分子机制。方法原代SD雄性大鼠肺微血管平滑肌细胞的培养、鉴定、传代,MTT法检测细胞增殖,流式细胞术分析细胞周期,RT-PCR检测mRNA的表达,Westernblot检测蛋白表达。结果姜黄素以浓度依赖的方式抑制肺微血管平滑肌细胞增殖,使细胞周期停滞在G0/G1期。姜黄素处理后细胞内p21和p53的mRNA、蛋白水平表达增高、p300的蛋白表达以及p300介导的乙酰化H3和p53蛋白表达降低。结论姜黄素能够抑制肺微血管平滑肌细胞的增殖,使细胞周期停滞在G0/G1期。其作用可能是通过下调p300活性和上调p53相关信号通路来实现的。
- 廖华张鹏孙爱军张红旗
- 关键词：姜黄素乙酰化
- 乙醛脱氢酶2基因Glu487Lys多态性与冠心病相关性的研究被引量：5
- 2011年
- 目的观察汉族人群中,乙醛脱氢酶2(ALDH2)基因Glu487Lys多态性与罹患冠心病危险性之间的关联。方法收集经冠脉造影检查明确诊断且冠脉狭窄≥50%的490名冠心病患者(冠心病组)及明确排除的433名非冠心病患者(对照组),共923例纳入本项研究。ALDH2的Glu487Lys基因多态性由TaqManPCR技术测得,比较ALDH2各基因型在冠心病组与对照组的分布,并根据冠心病危险因素,对该研究进行了亚组分析。结果在所有研究对象中,ALDH2各基因型在冠心病组和对照组分布差异无统计学意义(P=0.22)。但亚组分析显示,在无饮酒史,无吸烟史,无高血压史,BMI<25(kg/m2)4个亚组中,ALDH2各基因型的分布在冠心病组和对照组中差异有统计学意义(P<0.05)。结论 ALDH2基因多态性与中国人群罹患冠心病无显著关系,在单纯无饮酒史,无吸烟史,无高血压史或BMI正常的中国汉族人群中,ALDH2基因AA型与其罹患冠心病可能存在关联。
- 夏光张春瑜葛均波邹云增王克强金雪娟孙爱军
- 关键词：冠心病乙醛脱氢酶2基因多态性
- 解酒药对大鼠心肌急性缺血再灌注损伤的保护作用及其机制的初步研究
- 2013年
- 目的通过大鼠心肌缺血再灌注模型研究解酒药对缺血再灌注(IR)损伤的保护作用。方法雄性SD大鼠分为IR+生理盐水对照组、IR+解酒药组、IR+解酒药+cyanamide(乙醛脱氢酶2抑制剂,氨基氰,CH2N2)组。伊文思蓝和TTC染色评估心肌梗死面积,TUNEL法测定缺血再灌注区域心肌细胞凋亡情况,Western blot测定分析内质网应激相关蛋白Grp78和Chop含量变化以及凋亡相关蛋白Caspase12含量变化。结果解酒药减轻心肌梗死面积,而cyanamide的加入部分抵消了解酒药对心肌缺血再灌注的保护作用[IR+生理盐水对照组:(57.72±6.52)%;IR+解酒药组:(35.59±5.77)%;IR+解酒药+cyanamide组:(46.83±5.96)%;IR+生理盐水对照组vs.IR+解酒药组,P<0.01;IR+生理盐水对照组vs.IR+解酒药+cyanamide组,P<0.01;IR+解酒药组vs.IR+解酒药+cyanamide组,P<0.01]。Grp78、Chop、Caspase12蛋白水平于IR+生理盐水对照组、IR+解酒药组、IR+解酒药+cyanamide组中均无统计学差异(P>0.05)。结论在心肌缺血再灌注损伤早期,解酒药对心肌缺血再灌注损伤具有保护作用,且抑制ALDH2后此作用消失,但其机制可能不是通过调控ALDH2参与的内质网应激而实现的。
- 赵航天陈学颖范凡刘湘玮王聪申程马鑫朱洪孙爱军葛均波
- 关键词：再灌注损伤内质网解酒药乙醛脱氢酶2
- 乙醛脱氢酶2基因多态性在上海市与山东省汉族人群中的分布差异被引量：9
- 2011年
- 目的：了解乙醛脱氢酶2（aldehyde dehydrogenase 2,ALDH2）基因多态性在上海市与山东省汉族人群中的分布。方法：随机采集无血缘相关的601例上海市和617例山东省健康汉族人群的静脉血,提取DNA后应用变性高效液相色谱（denatu-ringhigh-performance liquid chromatography,DHPLC）技术检测研究对象的ALDH2基因型,并进行相应等位基因频率的比较。结果：上海市汉族人群ALDH2＊1/ALDH2＊1、ALDH2＊1/ALDH2＊2和ALDH2＊2/ALDH2＊2,3种基因型分别为65.4%,29.8%,4.8%;ALDH2＊1和ALDH2＊2等位基因的频率分别为80.3%和19.7%。山东省汉族人群ALDH2＊1/ALDH2＊1、ALDH2＊1/ALDH2＊2和ALDH2＊2/ALDH2＊2,3种基因型分别为72.1%、26.3%、1.6%;ALDH2＊1和ALDH2＊2等位基因的频率分别为85.3%和14.7%。基因型和等位基因的频率两个人群比较,差异均有统计学意义（P〈0.001）。结论：上海市汉族人群ALDH2~＊2等位基因的频率高于山东省汉族人群。
- 弭守玲范凡李纪明付明强孙爱军葛均波
- 关键词：乙醛脱氢酶2变性高效液相色谱基因多态性等位基因
