山东省自然科学基金(Y2006C33)
- 作品数：3 被引量：3H指数：1
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- GFP转基因鼠咀嚼肌卫星细胞的培养及影响因素
- 2006年
- 探索骨骼肌卫星细胞作为组织工程种子细胞的可能性。取新生绿色荧光蛋白(GFP)转基因鼠面部咀嚼肌,分离出肌卫星细胞,体外进行原代和传代培养,建立GFP转基因小鼠肌卫星细胞系。通过倒置显微镜观察肌卫星细胞的形态、生长曲线测定等,观察肌卫星细胞的增殖与分化能力,荧光显微镜观察GFP荧光的保持及表达,并观察不同浓度的FBS,IGF-1以及不同种植密度对肌卫星细胞生长的影响。结果表明:体外培养的咀嚼肌卫星细胞增殖速度快,15%的FBS,接种密度在5×104 cells/ml,IGF-1在100ng/ml有显著的促进增殖作用。荧光显微镜观察发现,肌卫星细胞经传代后仍然保持其特有的GFP荧光表达。
- 张风河卞翠荣黄萍杨丕山
- 关键词：小鼠转基因肌卫星细胞体外培养
- 绿色荧光蛋白转基因鼠咀嚼肌肌卫星细胞的分离、体外培养、鉴定及生物学特性的研究被引量：1
- 2007年
- 目的探讨绿色荧光蛋白(GFP)转基因鼠咀嚼肌肌卫星细胞体外培养及传代对咀嚼肌肌卫星细胞GFP荧光保持的影响,从而探讨GFP转基因鼠咀嚼肌肌卫星细胞移植入野生型小鼠后是否可以作为追踪细胞转归的有效方法。方法取新生GFP转基因鼠面部咀嚼肌,分离出肌卫星细胞,体外进行原代和传代培养,建立GFP转基因小鼠肌卫星细胞系。通过倒置显微镜观察肌卫星细胞的形态、测定生长曲线等方法观察肌卫星细胞的增殖与分化能力;荧光显微镜观察GFP荧光的保持及表达;免疫细胞化学法对所获得的细胞进行骨骼肌肌动蛋白及结蛋白鉴定;DAPI进行细胞核的标记,检测培养细胞的纯度。结果体外培养的咀嚼肌肌卫星细胞增殖速度快,荧光显微镜观察发现肌卫星细胞经传代后仍然保持其特有的GFP荧光表达。骨骼肌肌动蛋白单抗及抗结蛋白免疫细胞化学染色显示体外培养的咀嚼肌肌卫星细胞呈阳性表达。DAPI免疫细胞化学染色显示经分离及培养后肌卫星细胞纯度较高。结论体外培养的GFP转基因鼠咀嚼肌肌卫星细胞有很强的增殖分化能力及良好的GFP荧光表达,能够作为追踪细胞来源及归宿的示踪细胞。
- 张风河魏奉才黄萍孙树洋王克涛
- 关键词：转基因肌卫星细胞体外培养
- 腺病毒介导的骨形态发生蛋白2基因转染肌卫星细胞诱导成骨的动物实验研究被引量：2
- 2007年
- 目的观察腺病毒介导的BMP-2基因转染肌卫星细胞后体内骨诱导能力。方法采用动物实验方法,将转染BMP-2基因的绿色荧光蛋白(GFP)转基因鼠肌卫星细胞吸收到胶原支架上,然后将细胞胶原支架复合物移植入野生型129sv小鼠的后小腿肌肉中,应用X线片观察、组织学检查及荧光显微镜观察转染细胞的诱导成骨能力。结果用BMP-2基因转染的肌卫星细胞复合胶原支架移植入野生型小鼠后小腿筋膜下肌肉后会产生异位骨形成,移植2周后其中有GFP阳性的成骨细胞和骨细胞,3周后形成良好的骨组织,4周时已形成成熟的骨组织,而且骨组织具有GFP荧光。对照组用胶原支架和未转染的肌卫星细胞移植,未出现诱导性异位骨形成。结论Ad-BMP2转染的肌卫星细胞以胶原为支架可以在肌肉内诱导骨组织形成。
- 张风河黄萍魏奉才孙树洋
- 关键词：骨诱导肌卫星细胞骨形态发生蛋白-2
