山东省自然科学基金(Y2006C22)
- 作品数：7 被引量：41H指数：5
- 相关作者：毛伟征赵宝成李辉刘希春安岗更多>>
- 相关机构：青岛大学医学院附属医院青岛大学山东省青岛疗养院更多>>
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- 抗原致敏树突细胞增强细胞因子诱导杀伤细胞抗胃癌的效应被引量：5
- 2008年
- 目的观察抗原致敏树突细胞（DC）与细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）共培养体内外抗胃癌（SGC-7901）的效应。方法取健康供者外周血体外诱导培养DC和CIK，应用噻唑蓝（MTT）法测定比较（每组n=3）单纯CIK（CIK组）、DC诱导CIK（DC—CIK组）和经胃癌抗原致敏的DC诱导CIK（抗原-DC-CIK组）体外对SGC-7901的杀伤活性，并利用SGC-7901建立胃癌裸鼠模型，设立PBS对照组，比较各组（每组n=5）瘤体体积、抑瘤率和肿瘤坏死面积评分。结果成熟DC与CIK共培养第7天时，DC—CIK扩增倍数为17．8±2．0，约为单纯CIK扩增倍数（10．9±1．8）的1．63倍（P〈0．05）；抗原-DC-CIK组、DC—CIK组、CIK组，体外实验中效靶比为20：1时对SGC-7901的杀伤活性分别为：（72．3±0．5）％、（53．9±0．7）％、（46．4±0．4）％（P均〈0．01）；体内动物实验中抑瘤率分别为30．02％、18．11％、15．94％（P均〈0．01）。结论SGC-7901抗原致敏DC能增加CIK的扩增数量，增强CIK对SGC-7901的杀伤作用。
- 安岗毛伟征代震波牛兆建刘希春解西河赵宝成
- 关键词：胃肿瘤树突细胞抗原
- 细胞因子诱导杀伤细胞杀伤胃癌的特异性与非特异性研究被引量：5
- 2010年
- 目的观察特异性与非特异性杀伤在细胞因子诱导的杀伤细胞（CIK）体外杀伤胃癌细胞（SGC-7901）中所起的作用。方法从正常人外周血单个核细胞诱导树突状细胞（DC）、CIK细胞，用人胃癌细胞SGC-7901提取肿瘤抗原致敏DC，用DC诱导CIK生成DC诱导CIK细胞（DC—CIK）和经胃癌抗原致敏的DC诱导CIK细胞（抗原-DC—CIK）。培养的第14天，用流式细胞仪检测CIK、DC—CIK、抗原-DC—CIK细胞表型CD3、CD3／CD8和CD3／CD56。以CIK、DC—CIK和抗原-DC—CIK为效应细胞，以经主要组织相容性复合体（MHC）分子阻断的SGC-7901细胞和未经MHC分子阻断的SGC-7901细胞为靶细胞，效靶比分别为5：1、10：1、20：1，用噻唑蓝（MTT）比色法分别检测各组杀伤效应（每组n=3）。结果（1）培养的第14天，抗原-DC—CIK中CD3＋CD56＋和CD3＋CD8＋双阳性细胞的比例较DC—CIK和单独培养CIK明显增高（P均〈0．01）。（2）效靶比为20：1时，CIK组、DC—CIK组、抗原-DC．CIK组对SGC-7901的杀伤活性分别为：（46．6±2．2）％、（52．6±1．6）％、（72．5±2．1）％（P均〈0．01）；对经MHC分子阻断的SGC-7901的杀伤活性分别为：（44．3-4-1．1）％、（49．9±0．9）％、（50．4±1．9）％。抗原-DC—CIK中特异性杀伤占总杀伤效力的比例明显高于DC-CIK和CIK。结论CIK杀伤胃癌细胞以非特异性杀伤为主，特异性杀伤仅占总杀伤效力的4．9％；未致敏的DC诱导CIK后，总杀伤效力增强，以非特异性杀伤为主，特异性杀伤效力增加不明显，占总杀伤效力的5．1％；抗原致敏的DC诱导CIK后，杀伤仍以非特异性杀伤为主，特异性杀伤效力大幅度增加，占总杀伤效力的30．5％。
- 李辉毛伟征安岗刘超赵宝成
- 关键词：胃肿瘤树突状细胞杀伤细胞
- 新城疫病毒对胃癌细胞抗原修饰作用的研究被引量：2
- 2009年
- 目的研究新城疫病毒(NDV)的抗原修饰作用在抗原致敏树突细胞(DC)与细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)共培养NDV体外杀伤胃癌(SGC-7901)细胞中所发挥的影响。方法从正常人外周血单个核细胞诱导DC、CIK细胞,用胃癌细胞SGC-7901抗原致敏DC。致敏DC与CIK共培养,制备经胃癌抗原致敏的DC诱导CIK细胞(抗原-DC-CIK)。MTT法检测抗原-DC-CIK对经与未经NDV作用的SGC-7901细胞的杀伤效应,并观察阻断靶细胞表面非主要组织相容性复合体(MHC)后靶细胞杀伤效应的变化。结果效靶比为20:1时,联合应用NDV前后,抗原-DC-CIK对胃癌细胞SGC-7901杀伤活性分别为(69.3±1.5)%和(89.0±1.4)%,差异有显著意义(t=24.49,P<0.01);阻断靶细胞MHC分子后,抗原-DC-CIK对经与未经NDV作用的SGC-7901细胞杀伤活性分别降低了30.8%和21.1%,与NDV修饰胃癌抗原的作用直接相关的特异性杀伤细胞对胃癌的杀伤效力约为9.7%。结论抗原-DC-CIK并NDV是一种有效的抗胃癌生物治疗方式,NDV可对胃癌细胞抗原进行修饰,从而增强肿瘤细胞的抗原免疫反应性。
- 李辉王震毛伟征李雪萍牛冬光
- 关键词：胃肿瘤树突细胞杀伤细胞新城疫病毒
- NDV联合负载胃癌细胞抗原DC-CIK对胃癌细胞的杀伤效果及机制被引量：8
- 2009年
- 目的探讨新城疫病毒(NDV)联合负载胃癌细胞抗原(Ag)的树突状细胞(DC)及细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)对胃癌细胞的杀伤效果及机制。方法用人外周血单个核细胞诱导培养DC及CIK,体外培养人胃癌细胞SGC-7901,反复冻融法制备胃癌细胞Ag悬液冲击致敏DC,CIK与负载胃癌细胞Ag的DC共培养。建立胃癌裸鼠模型,将其随机分为四组各6只。PBS组瘤内注射PBS 100μl/只;NDV组瘤内注射NDV0.25 ml/只;Ag-DC-CIK组瘤内注射负载抗原的DC诱导的CIK细胞0.2 ml/只;NDV+Ag-DC-CIK组先瘤内注射NDV0.25 ml/只,1 d后再注射负载抗原的DC诱导的CIK细胞0.2 ml/只;各组均隔日注射1次,共3次。14 d后测量肿瘤体积,计算抑瘤率。观察肿瘤坏死情况并评分。结果NDV+Ag-DC-CIK组肿瘤平均体积小于NDV组和Ag-DC-CIK组,抑瘤率、肿瘤坏死面积评分高于NDV组和Ag-DC-CIK组;P均<0.05。结论NDV和负载胃癌细胞Ag的DC-CIK能协同杀伤胃癌细胞,杀伤效果强于二者单用效果;其机制为NDV可增加胃癌细胞的抗原性,为CIK细胞提供更多靶点。
- 马琳毛伟征安岗赵宝成刘超李辉
- 关键词：新城疫病毒树突状细胞
- 负载抗原DC-CIK细胞对NDV修饰抗原胃癌细胞杀伤作用被引量：6
- 2010年
- 目的探讨负载SGC-7901细胞抗原的DC-CIK细胞对新城疫病毒(NDV)修饰SGC-7901细胞的杀伤作用,探索胃癌新的治疗方法。方法取健康成人外周血分离单个核细胞,用于诱导培养树突状细胞(DC)及细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK细胞)。用反复冻融法制备胃癌细胞抗原,用于致敏DC细胞。然后分以下4组进行试验:CIK组、DC-CIK组、CIK+NDV组、DC-CIK+NDV组,同时设单独的靶细胞对照(SGC-7901)和效应细胞对照(CIK、NDV、DC-CIK)。并与化疗药(氟尿嘧啶、顺铂)对SGC-7901细胞的杀伤作用进行比较。结果用NDV修饰抗原后,无论是CIK细胞还是DC-CIK细胞对SGC-7901细胞的杀伤率均增高。其中负载胃癌细胞抗原的DC-CIK细胞杀伤率最高,效靶比为20∶1时,达到83.4%。化疗药物作用48 h时的疗效也不如单纯CIK细胞作用24 h的疗效。结论负载SGC-7901细胞抗原的DC-CIK细胞对经NDV修饰抗原的SGC-7901细胞的杀伤效果最佳。胃癌的生物治疗效果优于普通化疗。
- 刘希春江海涛毛伟征
- 关键词：树突细胞杀伤细胞新城疫病毒
- 体外扩增CIK细胞杀伤胃癌细胞SGC-7901被引量：19
- 2007年
- 目的：观察CIK细胞增殖情况，了解扩增后的最佳应用时机，并观察体外对SGC-7901的杀伤作用。方法：健康人外周血单核细胞（PBMC）在体外条件下经过多种细胞因子的共同刺激诱导成CIK细胞，计数培养不同时间的CIK细胞，用流式细胞术检测CIK细胞的表型特征。用MTT法检测杀伤活性，对比CIK细胞与5-FU对SGC-7901的杀伤作用，并观察了两者联合应用的效果。结果：CIK细胞随体外培养时间的延长，数量及杀伤活性均增加。体外培养20d增殖124倍，CD3^＋、CD56^＋双阳性细胞的比例达66．1％，其后两者数量增长缓慢；体外实验显示CIK细胞对胃癌SGC-7901细胞株有明显的杀伤作用，最高杀伤效率为73．13％，其杀伤作用优于5-FU，P〈0．05。二者联合应用杀伤作用降低。结论：CIK细胞具有较强的抗胃癌细胞活性；体外培养15～20d时应用较为合适；联合应用时5-FU可降低CIK细胞的杀伤效率。
- 代震波毛伟征牛兆建曹永献隋爱华刘希春吕振华
- 关键词：细胞因子诱导杀伤细胞胃癌细胞株SGC-7901
- 细胞因子诱导杀伤细胞对裸鼠胃癌移植瘤的靶向抑制作用被引量：3
- 2009年
- 目的:探讨细胞因子诱导杀伤细胞(cytokine-induced killer cell,CIK)对裸鼠胃癌移植瘤的靶向抑制作用。方法:将人胃癌细胞SGC-7901注射到裸鼠腹股沟皮下建立胃癌移植瘤裸鼠模型,荷瘤裸鼠随机分为CIK细胞组与成纤维细胞组,分别注射荧光染料SP-DiI标记的CIK细胞与成纤维细胞(HFL-I)于裸鼠种植瘤对侧腹股沟皮下,观察其在荷胃癌裸鼠体内各种组织中的分布情况;同时观察CIK治疗后肿瘤的体积大小并计算抑瘤率,病理观察肿瘤的坏死面积。结果:SP-DiI标记的CIK细胞注射后10d主要浓集在荷瘤裸鼠的肿瘤组织,注射局部、肝脏、脾脏和肺脏组织中无CIK细胞或分布极少(P<0.01);标记的成纤维细胞没有出现在肿瘤组织、肝脏、脾脏和肺脏组织,主要集中于注射局部。CIK细胞治疗后裸鼠的移植瘤体积显著小于对照组(P<0.05),其抑瘤率为29.82%;移植瘤组织坏死面积评分显著高于对照组(P<0.01)。结论:CIK细胞对裸鼠胃癌移植瘤有良好的靶向性和杀伤性。
- 刘超毛伟征赵宝成李辉
- 关键词：细胞因子诱导杀伤细胞胃癌移植瘤靶向杀伤
