国家自然科学基金(30872261)
- 作品数：18 被引量：71H指数：5
- 相关作者：杜先智何宗林丁珍珍刘艳群代光明更多>>
- 相关机构：重庆医科大学附属第二医院遂宁市第一人民医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金重庆市卫生局科研项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 耐多药结核病的治疗进展被引量：14
- 2015年
- 耐多药结核病（MDR-TB）指至少耐异烟肼和利福平两种药物的结核病,由于近年来抗结核药物的广泛应用,细菌耐药性明显提高,再加上化疗方案不合理、治疗药物中断或社会因素等原因,其发病率逐年升高,且因其病程长、治疗费用高、治愈率低、复发率高,成为各国突出的公共卫生问题。据国际卫生组织（WHO）/国际防痨和肺病联合会（IUATLD）的最新耐药监测估计,全球每年新出现30~60万MDR-TB患者,
- 郭翠菊杜先智
- 关键词：耐多药结核病化学治疗外科手术介入治疗中药
- 维生素D诱导自噬对巨噬细胞清除结核分枝杆菌的作用被引量：15
- 2015年
- 目的:探讨维生素D诱导巨噬细胞产生自噬并清除巨噬细胞内结核分枝杆菌(Mtb)的作用。方法:使用豆蔻酰佛波醇乙酯(PMA)诱导U937细胞分化使之具有吞噬能力,分化后的U937细胞随机分为阴性对照组、维生素D组、自噬抑制剂(3-MA)+维生素D组、阳性对照(雷帕霉素)组,以Mtb感染U937细胞6 h。感染后第4天,利用半定量RT-PCR检测自噬相关基因ATG5、Beclin-1及LL-37、LC3B mRNA的表达,流式细胞术检测LC3B-Ⅱ+和/或结核分枝杆菌抗原85A+(Ag85A+)的细胞。结果:与对照组相比,维生素D组ATG5、Beclin-1、LL-37、LC3B mRNA的表达增强(P<0.01),LC3B-Ⅱ+-细胞增多,Ag85A+-细胞减少,且LC3B-Ⅱ+-Ag85A--细胞增加(维生素D组38.0%比阴性对照组1.08%)。与维生素D组相比,在自噬抑制剂3-MA+维生素D组中,不但ATG5、Beclin-1、LC3B的mRNA表达受到抑制,LL-37的mRNA表达较维生素D组减少,而且3-MA抑制了细胞LC3B-Ⅱ的表达,同时抑制了1,25(OH)2D3对LC3B-Ⅱ+-Ag85A--细胞增加的作用。结论:维生素D能够诱导巨噬细胞产生自噬作用,并进一步有助于巨噬细胞清除结核分枝杆菌。
- 万春辉杜先智
- 关键词：维生素D自噬结核分枝杆菌巨噬细胞
- 卡介苗与结核分枝杆菌早期分泌靶抗原刺激人γδT细胞分泌细胞因子能力的比较被引量：1
- 2013年
- 目的比较卡介苗(bacillus Calmette-Guerin vaccine,BCG)与结核分枝杆菌早期分泌靶抗原(early secreted antigenic target-6,ESAT-6)刺激人外周血γδT细胞分泌细胞因子的能力。方法采用Ficoll密度梯度离心法分离健康人外周血单核细胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),加入Anti-human gamma-delta TCR-FITC抗体标记γδT细胞,上流式细胞仪进行分离纯化;分别用BCG和ESAT-6刺激γδT细胞,同时,以不加任何刺激因子的γδT细胞作为空白对照,分别于刺激培养后第1、3、6、9和12天取上清,采用ELISA试剂盒检测IL-17、TNF-α及IFNγ的分泌水平;上流式细胞仪检测γδT细胞的增殖水平。结果γδT细胞占PBMC的4.83%,其纯度为88.90%;与空白对照组比较,BCG和ESAT-6刺激的γδT细胞分泌的IL-17、TNF-α及IFNγ水平均明显升高,且ESAT-6组明显高于BCG组(P均<0.05);与空白对照组相比,BCG组和ESAT-6组γδT细胞数量明显增加,且ESAT-6组较BCG组增加明显(P均<0.05)。结论 BCG和ESAT-6均可刺激γδT细胞增殖,并大量分泌IL-17、TNF-α及IFNγ,且ESTA-6的刺激作用强于BCG。
- 代光明汪洪郑权杜发旺杜先智
- 关键词：卡介苗结核分枝杆菌靶抗原ΓΔT细胞细胞因子
- 结核分支杆菌感染后树突状细胞发挥的免疫学作用被引量：2
- 2011年
- 世界卫生组织最新统计表明,全世界大约20亿人口被感染结核病,每年超过200万人死于结核病,超过90%的受染人群尽管体内有病原体的长期存在却并不发病,因此研究结核分支杆菌与宿主免疫系统的反应。
- 梅花杜先智
- 关键词：结核分支杆菌感染后免疫学作用树突状细胞结核病免疫系统
- ESAT-6对人外周血γδT细胞IL-17的影响及其信号通路的研究被引量：1
- 2014年
- 目的:观察ESAT-6对人外周血γδT细胞表达IL-17的影响,并对其信号转导机制进行初步探讨。方法:用Ficoll密度梯度离心法从健康人外周血中分离单个核细胞,培养3天后用流式细胞仪分离纯化γδT细胞,并用唑来磷酸及IL-2刺激扩增γδT细胞,12天后用ESAT-6刺激γδT细胞,并给予信号传导及转录激活因子3(STAT3)抑制剂S3I-201,设置未加入ESAT-6及不加任何抑制剂的对照组,用PCR法检测IL-17、STAT-3的基因转录水平,用ELISA法检测细胞培养液中IL-17的含量,用Western blot检测STAT3蛋白的表达。结果:ESAT-6能显著提高STAT3及IL-17的基因转录及蛋白表达(P<0.01),且S3I-201能显著抑制ESAT-6所致的γδT细胞IL-17mRNA的转录及淋巴因子的增加(P<0.01)。结论:ESAT-6能提高外周血γδT细胞IL-17、STAT3的转录及表达,ESAT-6增强γδT细胞IL-17表达的机制可能与STAT3信号通路有关。
- 王娟杜发旺杜先智
- 关键词：ΓΔT细胞白细胞介素17ESAT-6STAT3
- ESAT6在结核病中的最新研究进展被引量：4
- 2011年
- 结核病是由结核分枝杆菌（MTB）引起的人兽共患慢性传染病,是威胁人类的三大传染性疾病之一,目前全世界大约有20亿人感染结核分枝杆菌,每年大约有200～300万的人死于结核[1]。
- 何宗林杜先智
- 关键词：ESAT6
- Toll样受体介导H37Rv诱导的单核细胞趋化蛋白-1表达被引量：4
- 2010年
- 目的探讨Toll样受体2(TLR2)、TLR4介导的免疫调节信号通路在结核分枝杆菌感染诱导的单核细胞趋化蛋白-1(monocyte chemo attractant protein-1,MCP-1)产生中所起的作用。方法建立人型结核分枝杆菌H37Rv感染小鼠模型,获取模型组及对照组小鼠支气管肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid,BALF)及肺泡巨噬细胞(alveolar macro-phage,AM),对BALF中AM进行计数,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定BALF中MCP-1水平,Western免疫蛋白印迹(Western blot)方法检测肺组织中MCP-1蛋白含量,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)测定模型组及对照组AM中TLR2、TLR4mRNA的表达;抗体干预组的AM用TLR2、TLR4抗体预处理并与H37Rv菌株共培养,并设未予以抗体预处理的PBS组及未作任何处理的对照组,分别用ELISA、Western blot法检测AM培养液中及AM中的MCP-1水平,以观察TLR2、TLR4在H37Rv诱导MCP-1生成所起的作用。结果模型组BALF中AM计数及MCP-1蛋白含量显著高于对照组(P<0.05);模型组小鼠肺组织中MCP-1蛋白含量显著高于对照组(P<0.05);模型组AM内TLR2、TLR4mRNA表达显著高于对照组(P<0.05);模型组BALF中MCP-1水平与AM数目呈正相关(r=0.92,P<0.05),并分别与TLR2、TLR4mRNA表达呈正相关(r=0.88,P<0.05;r=0.82,P<0.05)。PBS组AM及其培养上清液中MCP-1蛋白水平显著高于对照组(P<0.05);TLR2、TLR4抗体干预组AM及其培养上清液中MCP-1蛋白水平均显著低于PBS组(P<0.05)。结论在结核宿主免疫中,MCP-1参与诱导单核细胞聚集到感染部位这一过程,AM膜上的TLR2、TLR4受体通道介导了人型结核分枝杆菌H37Rv所诱导的MCP-1表达。
- 李敏超杜先智周向东
- 关键词：肺泡巨噬细胞TOLL样受体MCP-1
- 应用抑制消减杂交技术构建结核分枝杆菌差异表达基因消减cDNA文库被引量：4
- 2010年
- 目的:构建结核分枝杆菌H37Rv与H37Ra的差异表达基因消减文库,分离结核分枝杆菌差异表达cDNA片段。方法:利用抑制性消减杂交技术分析结核分枝杆菌强毒株H37Rv和弱毒株H37Ra的基因组mRNA的表达差异,并进行两轮消减杂交和两次PCR,将第二次PCR产物与pGEM-T载体相连,电击转化大肠杆菌E.coliDH5α进行文库扩增和蓝白斑筛选,RT-PCR鉴定差异表达文库。结果:以结核分枝杆菌强毒株H37Rv的cDNA为检测子的正相杂交和以弱毒株H37Ra的cDNA为检测子的反相杂交各自高表达或特异性表达的片段都得到选择性扩增,成功构建了差异表达cDNA文库A库和B库。所长出的菌落中90%为白色克隆,其中单一条带的克隆占75%和80%,片段大小集中在100～800bp之间。结论:利用SSH技术成功构建了结核分枝杆菌强毒株H37Rv和弱毒株H37Ra差异表达基因消减cDNA文库,该消减文库的建立为进一步筛选、克隆这两种菌株之间差异表达的新基因奠定了基础。
- 刘艳群杜先智
- 关键词：分枝杆菌结核抑制性消减杂交CDNA文库
- 结核分枝杆菌相关毒力基因的研究进展
- 2010年
- 在结核病的发生过程中,毒力起着重要的作用,因为只有毒力菌株才可致病.结核菌的毒力可以理解为其引起结核病的能力,而致病性与毒力因子总是联系在一起的.结核菌是典型的胞内寄生菌,但只有有毒株才能在细胞内存活和繁殖.毒力因子在毒力株的巨噬细胞复制中起关键作用,目前对毒力相关基因及毒力因子作用机制知之甚少.本文将对几个研究较多的毒力相关基因作一综述.
- 丁珍珍杜先智
- 关键词：结核分枝杆菌毒力基因
- 结核分枝杆菌sigma因子的功能和调节机制被引量：1
- 2010年
- 肺结核病目前仍是威胁人类健康甚至是生命的重要传染病,其致病病原体——结核分枝杆菌的毒力,以及与宿主细胞的共存,依赖于多种基因的复杂的表达调控.而在这些表达调控过程中,sigma因子起了重要作用.本文就sigma因子在结核分枝杆菌中调控作用、功能的最新研究,及其在结核病防治中的重要意义作一综述.
- 许瑞杜先智
- 关键词：结核分枝杆菌
