国家自然科学基金(30872268)
- 作品数：8 被引量：37H指数：4
- 相关作者：顾恒陈旭张青松鞠梅李新宇更多>>
- 相关机构：中国医学科学院北京协和医学院常熟市新区医院天津医科大学总医院更多>>
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- 中波紫外线诱导人皮肤成纤维细胞自噬对凋亡影响的初步研究被引量：12
- 2012年
- 目的探讨不同剂量中波紫外线（UVB）照射人皮肤成纤维细胞诱导的自噬对细胞凋亡活性的影响。方法人皮肤成纤维细胞来自于23岁健康男性环切术后包皮的原代培养，连续传代培养后取第3～10代的细胞进行实验。通过单丹酰戊二胺（MDC）染色和免疫荧光标记微管相关蛋白1轻链3（LC3）的方法，确定不同剂量3-甲基腺嘌呤（3-MA）对自噬的抑制作用。UVB照射后立即加入0．5mmol／L3-MA孵育细胞4h作为自噬的抑制方法。Hoechst和碘化丙啶（PI）染色结合AnnexinV-异硫氰酸荧光素（FITC）和PI标记细胞后流式细胞仪检测作为细胞凋亡的定性和定量方法。结果0．5mmol／L3-MA能明显抑制人皮肤成纤维细胞自噬活性（饥饿诱导组自噬细胞阳性百分数为63．037％±5．876％，3-MA孵育后下降至34．425％±5．183％）。空白对照组、30、50、100mJ／cm。UVB照射组标记LC3绿色荧光信号逐渐增强，照射后立即对上述4组加入3-MA孵育4h则LC3蛋白表达差异不明显。0．5mmol／L3-MA对细胞活性影响最小。50mJ／cmzUVB照射下加入3-MA孵育较未加3-MA孵育细胞强Hoechst和强PI双染细胞增多；100mJ／cm2UVB照射后加3-MA孵育较未加3-MA孵育细胞强Hoechst和强PI双染细胞减少。AnnexinV—FITC和PI标记细胞后流式细胞仪分析显示，在50mJ／cmzUVB照射下，抑制自噬的细胞中晚期凋亡水平[（10．933±0．839）％]较未抑制细胞[（7．267±0．473）％]上升，两者之间差异具有统计学意义（t=5．20，P〈0．05）；而在100mJ／cmzUVB照射下，抑制自噬的细胞中晚期凋亡水平[（7．100±0．781）％]较未抑制细胞[（10．133±0．681）％]下降，两者之间差异具有统计学意义（t=6．29，P〈0．05）。结论50mJ／cm。UVB照射诱导人皮肤成纤维细胞自噬通过抑制凋亡对细胞起到保护作用，而在100mJ／cm。UVB照射下发生的较高水平自噬可能诱导了自噬．I生细�
- 陈旭张青松鞠梅任发亮黄丹齐蓓陈崑常宝珠李新宇顾恒
- 关键词：紫外线成纤维细胞自噬
- 角质形成细胞中的自噬现象被引量：3
- 2012年
- 自噬是细胞内溶酶体降解胞内大分子或细胞器的过程。最近研究提示，角质形成细胞中存在自噬现象。自噬参与角质形成细胞的分化过程，也是老化的角质形成细胞的死亡方式。部分上皮源性肿瘤中自噬被诱导，可能与其侵袭性、转移有关。自噬减轻角质形成细胞中的炎症。某些药物如卡泊三醇、氨基酮戊酸、5-氟尿嘧啶可诱导自噬而发挥相关作用，自噬还可能参与角质形成细胞、黑素细胞中巨大黑素颗粒或巨大黑素小体的形成。概述自噬在角质形成细胞中的作用。
- 任发亮黄丹陈旭顾恒
- 关键词：角质形成细胞自噬细胞分化
- 皮肤免疫系统与光致癌被引量：3
- 2011年
- 随着全球环境的剧烈变化,人类生存活动受到紫外线照射的威胁日益加剧,特别是皮肤光致癌已成为迫切需要关注的问题.光致癌（photocarcinogenesis）指由于长期接受紫外线照射而引发皮肤恶性肿瘤,主要包括鳞状细胞癌、基底细胞癌和恶性黑素瘤等.
- 陈旭齐蓓黄丹顾恒
- 关键词：皮肤免疫系统皮肤恶性肿瘤鳞状细胞癌恶性黑素瘤基底细胞癌全球环境
- 西罗莫司和3-甲基腺嘌呤对人皮肤成纤维细胞自噬水平及分泌基质金属蛋白酶1、3影响的研究被引量：1
- 2011年
- 目的研究西罗莫司和3一甲基腺嘌呤（3-MA）对人皮肤成纤维细胞自噬水平及分泌基质金属蛋白酶1（MMP一1）、MMP一3的影响。方法取健康男性环切术后的包皮进行人皮肤成纤维细胞的原代培养，分别用浓度为20、50、100、250nmol／L的西罗莫司和浓度为0．5、2．0、5．0、10．0mmol／L的3-MA进行处理，并设立空白对照，然后测定各组细胞自噬体的水平，并用ELISA法测定各组细胞分泌MMP一1和MMP一3的量。结果0、20、50、100、250nmol／L西罗莫司各组自噬阳性细胞百分比分别为59．075％±6．884％、76．350％±5．226％、85．063％4-6．002％、86．288％±5．558％、96．825％±l，500％，除50nmol／L组与100nmol／L组差异无统计学意义（P〉0．05）外，其余各组间差异均有统计学意义（P〈0．01）。0,0．5、2．0、5．0、10．0mmol／L3-MA各组的自噬阳性细胞百分比分别是63．037％±5．876％、34．425％±5．183％、19．700％±3．028％、12．900％±3．334％、7．775％．4-2．293％，各组间差异均有统计学意义（P〈0．01）。而250nmol／L西罗莫司组和10．0mmol／L3-MA组MMP-1及MMP-3的水平明显上升，与对照组之间差异有统计学意义（P〈0．05）。结论西罗莫司可以明显上调人皮肤成纤维细胞自噬水平，低浓度时对MMP的影响尚不明确，高浓度时使MMP的分泌增加；而3-MA则抑制自噬的水平，使MMP的分泌增加，并与其浓度有一定相关性。
- 张青松鞠梅陈昆李新宇常宝珠顾恒
- 关键词：成纤维细胞自噬基质金属蛋白酶1基质金属蛋白酶3西罗莫司
- 自噬在老化及抗老化效应中的作用被引量：1
- 2009年
- 自噬的主要作用是收集并降解细胞浆内的无用的细胞器及大分子物质,用于细胞结构的重建和修复,及在饥饿时给机体提供营养来源。研究发现自噬功能会随着年龄增长而衰退。这种衰退可能是由于不限制饮食而发生年龄相关的细胞结构改变及功能下降所致。热限制及拮抗胰岛素类信号可以上调自噬。同时发现,终生给予抗脂质分解类药物可以降低葡萄糖和胰岛素的水平,诱导自噬并加强抗老化效应。
- 张青松鞠梅顾恒
- 关键词：自噬抗老化
- 培养的人皮肤成纤维细胞光老化模型中自噬水平的研究被引量：12
- 2010年
- 目的 研究人皮肤成纤维细胞的光老化模型中细胞自噬功能的变化.方法 通过UVB多次照射培养的人皮肤成纤维细胞,制作光老化人皮肤成纤维细胞模型,同时设立不用UVB照射的对照组.用β-半乳糖苷酶法测定未照射的对照组及光老化组细胞的老化程度,并分别测定两组细胞的自噬体表达水平.结果 经UVB重复照射后的光老化人皮肤成纤维细胞大多变形、扭曲,部分细胞死亡.光老化组与对照组β-半乳糖苷酶表达阳性细胞的百分率分别为50.60%±5.04%、14.58%±2.69%,两组间差异有统计学意义（P＜0.01）.光老化组与正常对照组自噬体阳性细胞百分率分别为14.91%±4.59%、68.45%±8.25%,两组间差异有统计学意义（P＜0.01）.结论 人皮肤成纤维细胞光老化模型形态明显异常,生长基本停滞,老化程度明显高于正常细胞,而自噬水平则明显低于正常对照组细胞.
- 张青松鞠梅陈崑李新宇常宝珠顾恒
- 关键词：自噬皮肤衰老成纤维细胞
- 皮肤光老化模型构建的评价被引量：4
- 2010年
- 皮肤光老化是由于长期紫外线照射引起的一系列皮肤病理生理改变，临床表现为皮肤干燥粗糙、色素沉着、皱纹形成、弹性改变、毛细血管扩张、紫癜和皮肤肿瘤发病率增高等。其发生机制目前尚不完全清楚，可能涉及皮肤的各组成部分（包括细胞、间质、血管和基底膜）的DNA、蛋白和脂质等物质的损伤、变性。近年来很多学者致力于光老化的研究，光老化的防护更是其中的热点。选择准确的模型对于光老化相关研究至关重要，一个完整模型的建立应包括选择相应的研究对象、合理地施加光损伤和准确的评价方法。
- 陈旭顾恒
- 关键词：皮肤光老化模型构建毛细血管扩张病理生理改变皮肤干燥色素沉着
- 慢性紫外线损伤小鼠模型皮肤角质形成细胞中Bax和Caspase-3的表达被引量：5
- 2012年
- 目的观察对照组小鼠与慢性紫外线(Ultraviolet,UV)损伤组小鼠背部皮肤组织角质形成细胞中凋亡相关蛋白(Bax)与半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)的表达情况,分析UV对小鼠慢性UV损伤中两指标表达变化的生物学意义。方法应用UV治疗仪对实验小鼠进行照射,建立慢性UV损伤小鼠模型,应用免疫组化PV二步法检测UV照光前、后小鼠皮肤角质形成细胞中Bax和Caspase-3表达的变化情况并进行对比。结果对照组小鼠实验前Bax和Caspase-3阳性率分别为30%和20%,实验后均为30%,差异均无统计学意义(P均>0.05)。慢性UV损伤组小鼠实验前Bax和Caspase-3阳性率分别为30%和20%,实验后均为100%,慢性UV损伤组小鼠显著高于对照组,且实验前、后两者差异均有统计学意义(P均<0.05)。造模后慢性UV损伤组小鼠表皮角质形成细胞内的Bax和Csapase-3的表达水平均明显增加,且二者增加程度有相关性(r=0.487,P<0.05)。结论重复UV照射可以诱导小鼠表皮角质形成细胞中Caspase-3表达上调和凋亡活性上升,且这种凋亡活性的上升与Bax的表达上调密切相关。
- 王莹陈旭姜鹏爽郭新云顾恒周之海
- 关键词：BAXCASPASE-3紫外线
