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环境化学物雄激素干扰活性检测方法的建立被引量：3: 2011年; 目的:建立雄激素受体(AR)介导的荧光素酶(Luc)报告基因试验方法,为化学物拟/抗雄激素活性的检测提供研究工具。方法:构建受雄激素反应元件调控的荧光素酶报告基因质粒pMMTV-Luc,将该质粒与表达AR的质粒AR/pcDNA3.1和阳性对照质粒phRL-tk共转染CV-1细胞,建立AR报告基因试验。以5α-双氢睾酮(5α-DHT)为阳性对照检测该方法的筛选效率。CV-1转染后用受试化学物染毒,根据Luc表达的变化,判断化学物的雄激素干扰活性。结果:5α-DHT对共转染三种质粒的CV-1的诱导作用表现为:10-10M的5α-DHT显著诱导Luc的表达,10-7M时达最大值,诱导倍数为61.83倍,计算其半数效应浓度EC50为3.65 nM。糖皮质激素受体(GR)激动剂地塞米松(dexamethasone)不诱导Luc的表达。AR拮抗剂氟他胺(flutamide)在10-7M～10-5M浓度范围内显著拮抗1nM的5α-DHT诱导的Luc的表达,其半数抑制浓度(IC50)为3.49μM。BPA在10-6M和10-5M时能拮抗1 nM 5α-DHT诱导的Luc的表达,其IC50为2.14μM。结论:本研究建立的AR报告基因试验具有较高的灵敏度和特异性,化学物BPA具有抗雄激素活性。; 孙宏司朝宗甄世祺陈晓东陈连生; 关键词：内分泌干扰物

氯菊酯经IGF-I信号通路对类固醇激素合成的影响: 2012年; 目的首次探讨氯菊酯影响类固醇激素合成与IGF-I信号通路之间的关系。方法以小鼠睾丸间质瘤细胞株(MLTC-1)为染毒模型,讨论IGF-I信号通路在氯菊酯干扰孕酮合成中的作用。结果随着氯菊酯染毒剂量增加,IGF-ImRNA表达量明显降低;在人绒毛膜促性腺激素(HCG)刺激下,氯菊酯显著抑制孕酮合成,且呈剂量-反应关系;培养液中加入IGF-I下游通路的抑制剂:LY294002(PI3kinase/Akt通路抑制剂),孕酮合成趋势与不加抑制剂一致;U0126(MEK1/2通路抑制剂),可明显抑制孕酮合成的下降趋势。结论氯菊酯干扰类固醇激素的合成可能涉及IGF-I信号通路。; 费娟郑浩于洋孙宏丁震陈晓东王彩生; 关键词：氯菊酯

改良的环境化学物雌激素干扰活性检测方法的建立和应用: 2012年; 目的建立雌激素受体(ER)介导的荧光素酶(Luc)报告基因试验方法,为化学物拟(抗)雌激素活性的检测提供研究工具。方法将受雌激素反应元件调控的荧光素酶报告基因质粒pERE-aug-Luc和表达ER的质粒rERα/pCI转染Vero细胞,建立ER报告基因试验。以雌激素(E2)为阳性对照检测该方法的筛选效率。Vero转染后用受试化学物染毒,根据Luc表达的变化,判断化学物的雌激素干扰活性。结果雌激素对转染两种质粒的Vero的诱导作用表现为:10-7 mg/L的雌激素显著诱导Luc的表达,最大诱导倍数为100.959倍,半数效应浓度EC50为3.57×10-6 mg/L。化学物BPA可诱导Luc的表达,其中在0.01mg/L时即可显著性的诱导Luc表达,未发现BPA具有雌激素拮抗作用。结论本研究建立的ER报告基因试验具有较高的灵敏度和特异性,化学物BPA具有拟激素活性。; 司朝宗孙宏甄士祺杨海兵陈晓东王彩生; 关键词：内分泌干扰物

环境化学物雄激素干扰活性检测方法的建立: 目的建立雄激素受体(AR)介导的荧光素酶(Luc)报告基因试验方法,为化学物拟/抗雄激素活性的检测提供研究工具。方法构建受雄激素反应元件调控的荧光素酶报告基因质粒pMMTV-Luc,将该质粒与表达AR的质粒AR/pcDN...; 孙宏司朝宗甄世祺陈晓东陈连生; 关键词：内分泌干扰物; 文献传递

二甲基甲酰胺毒性的研究进展被引量：22: 2011年; 二甲基甲酰胺(N,N-dimethylformamide,DMF)因其溶解能力强而被广泛应用于工业企业。DMF可经呼吸道和皮肤进入机体,损害肝脏、肾脏、胃以及生殖系统、免疫系统等多个器官(系统)。不同人群对DMF毒性的易感性不同,这可能与基因多态性有关。该文综述了DMF对各个器官(系统)的损害机制,为岗前筛选和DMF职业中毒的防护提供理论依据。; 夏玉婷陈晓东王彩生束长亮汪旸; 关键词：二甲基甲酰胺代谢基因多态性

邻苯二甲酸二丁酯对青春期大鼠雄性生殖系统的影响被引量：5: 2010年; 目的:探讨邻苯二甲酸二丁酯(DBP)对青春期大鼠雄性生殖系统的影响。方法:5周龄雄性SD大鼠用DBP灌胃染毒30d,染毒剂量包括:10、100、500mg/(kg.d),对照组仅给予溶剂(玉米油)。染毒结束后,检测睾丸、附睾、垂体、肝脏重量及脏器系数。苏木精-伊红(HE)染色法检测睾丸、附睾组织病理改变。放免法测定血清中黄体生成素(LH)、卵泡刺激素(FSH)、睾酮(T)水平。实时定量反转录PCR测定类固醇激素合成急性期调节蛋白(StAR)、增殖细胞核抗原(PCNA)、细胞色素P450胆固醇侧链裂解酶(P450scc)、清道夫受体(SR)mRNA的相对表达变化。结果:500mg/(kg.d)组中,睾丸及附睾重量明显减轻,垂体、肝脏的重量没有明显改变。100mg/(kg.d)和500mg/(kg.d)DBP导致了睾丸组织病理学改变。500mg/(kg.d)DBP组中血清T、LH水平降低,血清FSH升高。10mg/(kg.d)DBP组血清LH及FSH水平升高。500mg/(kg.d)DBP抑制了StAR、PCNAmRNA的表达。10mg/(kg.d)DBP提高了P450sccmRNA的表达水平,SRmRNA表达水平没有明显改变。结论:高剂量DBP对雄性生殖系统有明显毒性效应,较低水平的DBP改变了血清中促性腺激素LH的水平,并有可能以此来改变睾丸中P450sccmRNA的表达。; 满孝明秦珩陈敏健张成香宋玲王玉邦; 关键词：邻苯二甲酸二丁酯精子发生细胞增殖

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国家自然科学基金(30901222)