广西科技创新能力与条件建设项目(11217028)
- 作品数：4 被引量：10H指数：3
- 相关作者：黄仕训骆文华唐文秀代文娟盘波更多>>
- 相关机构：广西壮族自治区中国科学院广西植物研究所广西师范大学桂林理工大学更多>>
- 发文基金：广西科技创新能力与条件建设项目国家科技基础条件平台建设计划广西壮族自治区自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 正交设计优化广西火桐ISSR-PCR反应体系被引量：3
- 2013年
- 以广西火桐DNA为模板,利用正交试验分别对ISSR-PCR反应的MgCl2浓度、dNTPs浓度、TaqDNA聚合酶浓度、模板DNA浓度进行了优化,并通过梯度PCR确定最佳退火温度和循环次数,最终确定广西火桐最佳反应体系及扩增条件。25μL体系中1×PCR buffer,2.5 mmol/L MgCl2,0.15 mmol/L dNTPs,0.06 U/μL TaqDNA聚合酶,3 ng/μL DNA模板,0.2μmol/L引物;最佳扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性45 s,52℃退火45 s,72℃延伸1.5 min,共30个循环;72℃最后延伸7 min。扩增后的PCR产物在4℃保存。应用该ISSR体系对10个广西火桐样品进行了扩增,证实了该体系的适用性和稳定性。
- 代文娟骆文华马虎生符支宏唐文秀赵博盘波黄仕训
- 关键词：正交设计
- 狭叶坡垒RAPD-PCR反应体系优化被引量：2
- 2013年
- 以濒危物种狭叶坡垒硅胶干燥的叶片为材料,研究其RAPD-PCR体系优化条件。结果表明,优化的狭叶坡垒RAPD-PCR反应体系为:25μL体系中1×PCR buffer,3 mmol/L Mg2+,0.2 mmol/L dNTPs,0.5 U/25μL Taq聚合酶,0.4μmol/L引物,5 ng/μL DNA模板;最佳扩增程序为:94℃预变性5 min;94℃变性1 min,35℃退火1 min,72℃延伸1.5min,35个循环;72℃最后延伸7 min。
- 代文娟黎乾坤骆文华唐文秀赵博盘波黄仕训
- 关键词：RAPD
- 广西火桐基因组DNA提取方法的研究被引量：3
- 2013年
- 以广西火桐[Erythropsis kwangsiensis(Hsue)Hsue]叶片为试料,比较了改良CTAB法、试剂盒法和改良SDS法提取基因组DNA的提取效果及对干燥叶和鲜叶提取的基因组DNA进行了比较研究。结果表明,改良CTAB法和试剂盒法提取的基因组DNA质量较好、杂质少,适合广西火桐基因组DNA的提取。改良SDS法提取的基因组DNA无完整条带,质量较差,不适合广西火桐基因组DNA提取。硅胶干燥90 d的叶样和新鲜叶样所得的基因组DNA纯度相当,产率前者多于后者。
- 骆文华黄仕训马虎生符支宏代文娟唐文秀盘波赵博
- 关键词：基因组DNA
- 狭叶坡垒迁地保护种群的RAPD多样性分析被引量：3
- 2013年
- 采用RAPD分子标记技术对2个迁地保护的狭叶坡垒种群进行遗传多样性分析,结果表明,10条引物共扩增出69个位点,其中36条具有多态性,多态位点比例为52.17%,其中,西双版纳种群的多态位点百分比为36.23%;桂林种群为15.94%。2个迁地保护种群的Shannon平均值为0.1178,Nei's多样性指数平均值为0.0757,遗传分化系数G st为0.634 0,63.41%的遗传变异存在于种群间。
- 代文娟黎乾坤骆文华唐文秀赵博盘波黄仕训
- 关键词：RAPD种群迁地保护
