浙江省重大科技专项基金(2009C12095)
- 作品数：15 被引量：107H指数：6
- 相关作者：田丹青王炜勇葛亚英刘建新沈晓岚更多>>
- 相关机构：浙江省农业科学院浙江大学吉首大学更多>>
- 发文基金：浙江省重大科技专项基金杭州市种子种苗项目浙江省农业科学院科技创新能力提升工程项目更多>>
- 相关领域：农业科学生物学轻工技术与工程更多>>
- 基因枪介导擎天凤梨遗传转化体系的建立被引量：4
- 2013年
- 擎天凤梨的愈伤组织获取较为困难、而且愈伤分化缓慢且极易死亡,使用农杆菌介导转基因面临着受体难以获得、侵染后愈伤死亡率高、转化时间长以及成本高等问题。使用基因枪介导的转基因方法相对来说更为直接快速,但也面临转化效率不高、插入基因表达定位不清等问题。本研究以擎天凤梨组培苗的茎尖生长组织为材料,以基因枪介导结合GFP荧光蛋白基因,对转化中的主要影响因子进行研究,建立并优化了遗传转化体系,获得了转化再生植株,并利用GFP荧光蛋白基因的荧光特性,分析确定了外源基因的表达定位,为进一步利用分子育种手段培育擎天凤梨新品种打下基础。
- 沈晓岚王炜勇毛碧增俞少华田丹青俞信英
- 关键词：擎天凤梨基因枪遗传转化体系
- 丽穗凤梨杂交后代ISSR鉴定被引量：2
- 2013年
- 使用9条ISSR引物,对由丽穗凤梨‘Chariotte’、‘Margot’、‘Condor’、‘Poelmanii’和‘White Line’为亲本的5对杂交组合获得的13个优异杂交后代指纹进行了分析。结果表明9条ISSR引物共扩增出112个位点,其中多态性位点88个,多态性比例为78.57%,有效等位基因数、Nei＇s基因多样性指数和Shann on信息指数的变异范围分别为1.0579-1.9942、0.0548-0.4985和0.1283-0.6917;亲本及杂交后代存在丰富的遗传多样性,ISSR分子标记能把杂交后代与亲本明显区分开。本研究为丽穗凤梨早期品种鉴定以及品种改良等提供科学依据。
- 葛亚英张飞王炜勇沈晓岚田丹青俞信英郁永明
- 关键词：丽穗凤梨杂交后代ISSR分子鉴定
- 擎天凤梨花器官全长cDNA文库的构建及EST分析被引量：13
- 2009年
- 为了通过基因工程手段来培育花色丰富、花型奇特的擎天凤梨新品种,从擎天凤梨中筛选出花色、花型相关调控基因则是十分必要的。本研究以擎天凤梨属品种Ostara为材料,采用SMART技术成功构建了擎天凤梨花器官的质粒型全长cDNA文库,初始文库滴度为3×106,插入片段平均长度大于1kb;随机挑取2004个阳性克隆进行5'EST测序,获得高质量序列1758条,经拼接获得1365条单基因簇(unigene),其中跨叠群(contig)175个和单条序列(singlet)1195个;经ORF寻找共获得有效ORF1283条;经COG分析EST序列编码的蛋白质被分为22类;经Blast分析后,获得一批花色、花器官发育、花期调控以及其它育种价值基因(包括cDNA全长或片段)。该研究结果为擎天凤梨的花色、花型转基因等育种奠定了基础。
- 刘建新沈福泉田丹青张智葛亚英沈晓岚俞信英王炜勇
- 关键词：擎天凤梨CDNA文库COG
- 擎天凤梨GAPDH基因的克隆及序列分析被引量：6
- 2010年
- 管家基因GAPDH(glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase)常被用作定量、半定量PCR试验的内参,以确定目标基因的相对表达量。基于前期从全长cDNA文库中获得GAPDH基因的EST单克隆,进行PrimerWalking测序,获得一个GAPDH的全长cDNA序列,序列长1 790 bp,编码421个蛋白氨基酸,命名为GoGAP-DH1。采用Blast,ExPASy,ProtParam,SPOMA,Find Conserved Domains(NCBI),ClustalX,MEGA等生物信息学软件对cDNA序列、氨基酸序列、保守区、亲缘关系等特征进行分析。结果表明,GoGAPDH1与玉米的细胞质GAPDH基因源性最高,为82%。初步推断GoGAPDH1可能是一个胞质型GAPDH。
- 刘建新张智丁华侨葛亚英王炜勇
- 关键词：擎天凤梨GAPDH克隆
- 光萼荷属植物SSR反应体系确立与指纹图谱构建被引量：8
- 2012年
- 利用正交试验设计优化并确立光萼荷属(Aechmea)植物SSR反应体系,构建部分光萼荷属植物的SSR分子指纹图谱。结果表明:光萼荷属植物的最佳SSR反应体系为10μL总体积包括1×PCR buffer、Mg2+2.0 mmol.L-1、dNTPs 200μmol.L-1、引物2.5μmol.L-1、模板DNA 90 ng和Taq DNA聚合酶1.5 U。利用该体系和6对SSR引物对15份光萼荷属植物进行扩增反应和电泳检测,其中M1、M3、M4等3对SSR引物扩增图谱清晰、多态性较高,均能将该15份光萼荷属植物鉴别出来,初步建立了15份光萼荷属植物的SSR分子指纹图谱,进一步证明该SSR反应体系稳定可靠,可以有效用于光萼荷属植物种质资源鉴定。
- 张飞王炜勇张智田丹青刘建新刘晓静
- 关键词：SSR正交实验设计反应体系优化指纹图谱
- 丽穗凤梨属观赏凤梨形态性状描述标准和观测记载方法被引量：3
- 2011年
- 根据多年的试验研究,提出了凤梨科丽穗凤梨属最能表现品种特性的42个形态性状(包括植株性状3个,叶片性状12个,花序和苞片性状23个,生育特性4个)的描述标准和观察记载方法。
- 俞信英俞少华王炜勇张智沈晓岚
- 关键词：丽穗凤梨形态性状
- 红掌抗寒相关AnCAT基因的克隆及表达分析被引量：1
- 2014年
- 红掌为原产热带的观赏花卉,低温易受冷害。在低温胁迫下,植物体会产生大量活性氧,清除活性氧的过氧化氢酶基因(AnCAT)在植物抗寒过程中起着重要作用。本文以天南星科花烛属红掌‘阿拉巴马’品种叶片提取的总RNA为模板,通过RT-PCR与RACE扩增,获得了一个1 704 bp的过氧化氢酶(catalase,CAT)基因的cDNA序列,其基因编码区共1 476 bp,编码492个氨基酸,命名为AnCAT(GenBank登录号:JX163298)。用低温胁迫处理红掌植株,叶片最大光化学效率Fv/Fm随着低温胁迫处理时间的延长而逐渐下降,当6℃处理达到36 h时Fv/Fm开始急剧下降,叶片也出现萎蔫状态,表明红掌叶片受到极大的伤害;使用实时荧光定量PCR,对不同低温处理时间下CAT基因在红掌植物叶片中的表达量进行测定分析,结果表明:低温胁迫处理12 h后,AnCAT基因明显上调表达,且表达量达到最高点,表明该基因与红掌抗低温胁迫有一定的关系。
- 刘慧春朱开元马广莹邹清成周江华
- 关键词：红掌ANCA低温胁迫
- 垂吊植物口红花叶片对低温胁迫的生理响应被引量：5
- 2012年
- 以‘圆叶红花’口红花为试材,研究不同低温胁迫(昼/夜温度16℃/12℃、12℃/8℃、8℃/4℃、4℃/0℃)、胁迫时间及温度回升过程中叶片相关生理指标的变化规律,旨在探讨口红花叶片在低温逆境下的生理响应。结果表明:昼/夜温度在12℃/8℃以上对口红花叶片影响不大,4℃/0℃以下低温会造成口红花叶片死亡,其耐寒性鉴定可选在昼/夜低温8℃/4℃下进行;在昼/夜低温8℃/4℃胁迫下,各测定指标与相对电导率(REC)和叶片含水量均呈显著或极显著相关性,叶绿素含量与超氧化物歧化酶(SOD)活性呈极显著正相关,丙二醛(MDA)含量与过氧化氢酶(CAT)活性呈极显著负相关;REC、MDA含量、叶片含水量、叶绿素含量、SOD和CAT活性是影响和评价口红花耐寒性的重要指标。
- 葛亚英田丹青郁永明潘刚敏刘晓静夏宜平
- 关键词：口红花低温胁迫生理响应
- 外源ABA对低温胁迫下蝴蝶兰叶片生理指标的影响被引量：14
- 2013年
- 为研究脱落酸(ABA)对蝴蝶兰抗寒性的影响,以蝴蝶兰中苗为试材,叶面喷施50 mg.L-1脱落酸(ABA)1 d后,于6℃低温胁迫4 d,以清水喷施为对照,在低温处理0,1,2,3和4 d后测定叶片相对电导率、丙二醛(MDA)含量、脯氨酸(Pro)含量、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)活性。结果表明:喷施ABA可以延缓蝴蝶兰叶片的相对电导率和MDA含量的上升,减少Pro的累积量,提高CAT和SOD的活性。说明喷施ABA提高了蝴蝶兰叶片的抗氧化酶活性,减少了膜脂过氧化产物的积累,降低了细胞膜透性,从而减轻了低温胁迫的伤害。
- 田丹青葛亚英刘晓静潘刚敏沈晓岚潘晓韵郁永明
- 关键词：低温胁迫相对电导率脯氨酸抗氧化酶
- 浙江省丽穗凤梨标准化生产技术
- 2011年
- 通过多年来的引种、栽培研究和生产实践,从生产条件、品种选择、栽培管理、环境控制、催花技术、病虫害防治和包装贮运等7个方面提出了一整套丽穗凤梨标准化生产技术。
- 王炜勇郁永明俞少华俞信英赵张建
- 关键词：丽穗凤梨栽培催花
