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国家自然科学基金(30671995)

作品数:8 被引量:26H指数:3
相关作者:季守平章扬培郑长青宫锋王颖丽更多>>
相关机构:军事医学科学院中国人民解放军总医院第一附属医院解放军第401医院更多>>
发文基金:国家自然科学基金更多>>
相关领域:医药卫生生物学更多>>

文献类型

  • 8篇中文期刊文章

领域

  • 7篇医药卫生
  • 2篇生物学

主题

  • 6篇基因
  • 6篇甲基化
  • 5篇MGMT
  • 4篇启动子
  • 4篇启动子CPG...
  • 4篇脑胶质瘤
  • 4篇胶质
  • 4篇胶质瘤
  • 4篇HMSH2基...
  • 4篇HMLH1
  • 2篇修复基因
  • 2篇药物
  • 2篇肿瘤
  • 2篇转移酶
  • 2篇烷化
  • 2篇烷化剂
  • 2篇细胞
  • 2篇甲基转移酶
  • 2篇DNA修复
  • 2篇MGMT基因

机构

  • 7篇军事医学科学...
  • 3篇中国人民解放...
  • 1篇中国人民解放...
  • 1篇解放军第40...

作者

  • 7篇季守平
  • 6篇郑长青
  • 6篇宫锋
  • 6篇章扬培
  • 5篇王颖丽
  • 4篇檀英霞
  • 4篇李安民
  • 4篇高红伟
  • 4篇李素波
  • 4篇邰军利
  • 2篇常宏宇
  • 1篇鲍国强
  • 1篇张雪
  • 1篇王璇琳
  • 1篇让文亮

传媒

  • 2篇生物技术通讯
  • 2篇医学分子生物...
  • 1篇山东医药
  • 1篇癌症
  • 1篇Chines...
  • 1篇中国医药生物...

年份

  • 1篇2013
  • 6篇2009
  • 1篇2008
8 条 记 录,以下是 1-8
排序方式:
脑胶质瘤SHG-44细胞MGMT基因甲基化状态及其与细胞对烷化剂药物耐药性关系的研究被引量:1
2009年
目的探讨人脑胶质瘤SHG-44细胞O(6)-甲基鸟嘌呤DNA甲基转移酶(MGMT)基因启动子甲基化状态与其蛋白表达以及细胞对烷化剂药物耐药性的相关性。方法取处于对数生长期的人脑胶质瘤SHG-44和U251细胞,分别加入5-氮-2’脱氧胞苷(5-Aza-CdR)培养6d后收集细胞,同时以未加5-Aza-CdR的正常培养细胞作为对照。提取细胞基因组DNA,采用甲基化特异性PCR(MSP)检测MGMT基因的甲基化状态,并利用蛋白质印迹方法检测MGMT蛋白的表达。将收集的细胞分为3组,分别加入浓度为125、100、75、50、25、15、10μg/ml的尼莫司汀(ACNU)和50、25、15、10、5、2.5、1μg/ml的替莫唑胺(TMZ)以及等量的完全培养液(阴性对照),采用噻唑蓝(MTT)法分别检测细胞对烷化剂药物的敏感性,以细胞存活50%时所对应的药物浓度(IC50值)作为衡量细胞对药物敏感性的指标,实验重复3次。结果正常培养的SHG-44细胞MGMT基因启动子呈甲基化状态,MGMT蛋白表达缺失,对ACNU和TMZ的IC50值分别为30、11μg/ml,表现为对烷化剂药物敏感;用5-Aza-CdR处理后,SHG-44细胞MGMT基因启动子成功脱甲基化,MGMT蛋白恢复表达,其对ACNU和TMZ的IC50值分别升高了2.5和3.1倍(均P<0.05),对烷化剂药物的敏感性发生逆转。而正常培养和5-Aza-CdR处理的U251细胞MGMT基因启动子均呈未甲基化状态,都能表达MGMT蛋白,并且均表现为对ACNU和TMZ烷化剂药物耐药。结论MGMT基因甲基化状态能稳定地反映细胞诱导MGMT蛋白表达的能力,并有可能成为预测肿瘤组织对烷化剂化疗药物敏感性的分子标记。
郑长青季守平宫锋常宏宇王颖丽高红伟李素波檀英霞章扬培
关键词:甲基化
脑胶质瘤患者组织和血清MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化状态检测被引量:3
2009年
目的探讨脑胶质瘤患者组织和血清中MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子CpG岛甲基化发生率及相关性。方法甲基化特异性PCR(MSP)检测39例脑胶质瘤组织样本及32例预处理的脑胶质瘤血清样本中MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态。结果脑胶质瘤组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化发生率分别为46.2%、10.3%和20.5%,肿瘤组织中至少有一种基因甲基化的发生率为64.1%(25/39);在脑胶质瘤患者外周循环血液中检测到了相关基因甲基化系列,并且与组织中基因甲基化发生率明显相关。结论MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化是脑胶质瘤发生过程中常见的分子事件,血清中相关基因DNA甲基化检测有可能为脑胶质瘤诊断和个体化化疗提供一种稳定的无创性检测指标。
郑长青季守平宫锋李安民邰军利王颖丽高红伟李素波檀英霞王璇琳章扬培
关键词:脑胶质瘤启动子CPG岛甲基化MGMT基因
脑胶质瘤MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化状态研究被引量:2
2009年
目的:探讨脑胶质瘤患者O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶基因MGMT和错配修复基因hMLH1、hMSH2启动子CpG岛甲基化状态,及其在烷化剂化疗中的意义。方法:采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测39例脑胶质瘤和6例正常脑组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态,免疫组化方法测定蛋白表达。结果:脑胶质瘤患者组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化发生率分别为46.2%、10.3%和20.5%,3种基因启动子未甲基化模式与其对应蛋白表达模式相似,并与患者性别、年龄、病理类型和病理分级无明显相关性。回顾性分析患者资料,显示39例脑胶质瘤患者中,MGMT基因甲基化的患者生存期显著高于MGMT基因未甲基化患者(P<0.05,Log-rank检验)。结论:MGMT及错配修复基因甲基化是脑胶质瘤发生过程中常见的分子事件,可能与肿瘤的发生有关;检测MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化状态,在判断脑胶质瘤患者预后和预测烷化剂化疗耐药性中可能具有重要意义。
郑长青季守平宫锋李安民邰军利常宏宇王颖丽高红伟李素波檀英霞章扬培
关键词:脑胶质瘤启动子CPG岛甲基化错配修复基因
MGMT基因启动子甲基化检测在脑胶质瘤化疗中的意义被引量:13
2009年
背景与目的:如何预测和克服肿瘤细胞对化疗药物的耐药性,实施个体化治疗是肿瘤化疗急需解决的问题。与基因启动子甲基化密切相关的DNA损伤修复基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(O6-methylguanine-DNA methyltransferase,MGMT)表观沉默与肿瘤对烷化剂药物化疗敏感性密切相关。本研究探讨检测MGMT基因启动子CpG岛甲基化在判断脑胶质瘤患者预后及预测肿瘤对烷化剂药物耐药性中的意义。方法:甲基化特异性PCR(MSP)法检测脑胶质瘤组织及肿瘤细胞株MGMT基因启动子甲基化状态,蛋白印迹和免疫组化法测定蛋白表达,MTT法检测肿瘤细胞株对烷化剂药物敏感性,将患者随访资料针对MGMT甲基化状态绘制Kaplan-Meier生存曲线,并进行log-rank检验分析。结果:39例脑胶质瘤患者组织MGMT基因启动子甲基化发生率为46.2%,蛋白表达阳性率为61.5%,且肿瘤组织中MGMT基因甲基化状态与蛋白表达显著相关(P<0.05);6例正常组织均未检测出基因甲基化。MGMT基因过甲基化的脑胶质瘤SHG-44细胞株用5-Aza-CdR处理后完全脱甲基化,MGMT蛋白恢复了表达,同时细胞株对烷化剂药物敏感性也发生逆转,由敏感转变为耐受。在采用手术、放疗和烷化剂尼莫司汀化疗等综合治疗的39例脑胶质瘤患者中,MGMT基因甲基化的患者生存率显著高于MGMT基因未甲基化患者(P<0.05)。结论:MGMT基因甲基化状态与蛋白表达及肿瘤细胞对烷化剂药物敏感性密切相关,有可能替代MGMT蛋白检测成为判断脑胶质瘤患者预后和预测肿瘤对烷化剂化疗耐药性的标志分子。
郑长青季守平宫锋李安民邰军利章扬培
关键词:脑胶质瘤启动子CPG岛甲基化DNA修复MGMT分子标志物
MGMT基因甲基化在肿瘤发生及个体性化疗中的意义被引量:3
2008年
MGMT作为一种DNA修复蛋白,能够移除DNA上鸟嘌呤O6位点的能致突变毒性和细胞毒性的烷基加合物,从而保护细胞对抗烷化基团的损害,是肿瘤耐受烷化剂药物的主要原因。MGMT在不同的肿瘤和肿瘤细胞系中沉默,MGMT基因启动子CpG岛过甲基化是其表观沉默的主要机制。启动子过甲基化相关的MGMT基因沉默与很多人类肿瘤密切相关。首先,MGMT基因沉默可导致肿瘤相关基因转换突变的累积;其次,MGMT基因过甲基化与肿瘤增强对烷化剂药物敏感性之间呈正相关。这些新发现揭示了MGMT基因甲基化在肿瘤的发生、发展和肿瘤治疗中的重要作用。
郑长青季守平章扬培
关键词:O^6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶DNA修复药物耐受
MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子甲基化状态对脑胶质瘤预后的影响被引量:8
2009年
目的探讨脑胶质瘤DNA修复基因O6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶(MGMT)和错配修复基因(MMR)(hMLH1、hMSH2)启动子甲基化状态及其对患者预后和烷化剂化疗敏感性的影响。方法采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测39例脑胶质瘤和6例正常脑组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区的甲基化状态,免疫组化方法测定其蛋白表达。绘制Kaplan-merier生存曲线。结果脑胶质瘤组织MGMT、hMLH1和hMSH2基因启动子区甲基化发生率分别为46.2%、10.3%和20.5%,而正常脑组织相应基因启动子区未发生甲基化;三种基因启动子未甲基化模式与其对应蛋白表达模式相似。MGMT基因甲基化的脑胶质瘤患者存活率显著高于未甲基化者(P<0.05);MMR基因甲基化患者中MGMT基因甲基化与未甲基化者的生存期无统计学差异(P>0.05)。结论hMLH1、hMSH2及MGMT甲基化是脑胶质瘤发生过程中常见的分子事件;联合检测MGMT、hMLH1和hM-SH2基因启动子甲基化状态可判断脑胶质瘤患者的预后及其对烷化剂化疗的敏感性。
郑长青季守平宫锋李安民邰军利王颖丽章扬培
关键词:脑胶质瘤启动子CPG岛甲基化错配修复基因
Aberrantly Methylated MGMT,hMLH1 and hMSH2 in Tumor and Serum DNA of Gliomas Patients
2009年
OBJECTIVE This study is to investigate the prevalence ofpromoter CpG island methylation of O^6-methylguananine-DNAmethyltransferase (MGMT), mismatch repair genes (hMLH1 andhMSH2) in both tumor and serum samples of gliomas.METHODS Methylation-specific PCR (MSP) was employed todetect promoter CpG island methylation of the MGMT, hMLH1and hMSH2 genes in 39 samples taken from surgery and 32samples of pretreatment serum all from the patients with gliomas.RESULTS Promoter CpG island methylation of MGMT, hMLH1and hMSH2 was detected and the results were 46.2%, 10.3% and20.5%, respectively in tumor DNA of the cases with gliomas,and 40.6%, 9.4% and 18.8%, respectively in serum DNA of thecases. The methylation pattern in primary tumor and serum wasfound to be concordant in matched tissue and serum samplesof 21 patients. In the cases with positive result of methylationfor MGMT, hMLH1 and hMSH2 in tumor tissues, the results ofdetection for those in the paired serum sample were 77.8% (7/9),66.7% (2/3) and 75.0 % (3/4), respectively. False positive resultswere not obtained in any of the patients who did not exhibitmethylation. No association was found between the promotermethylation of MGMT, hMLH1, and hMSH2 genes in primarygliomas and gender, age, localization, grade of malignant or tumorstage.CONCLUSION Promoter CpG island methylation is a frequentevent in gliomagenesis. Methylation analysis appears to bea promising predictive factor of the prognosis for the gliomapatients treated with alkylating drugs and a noninvasive tumormarker in serum DNA.
Changqing ZhengShouping JiFeng GongAnming LiJunli TaiSubuo LiYingli WangHongyu ChangHongwei GaoYangpei Zhang
关键词:HMSH2基因HMLH1血清DNA肿瘤DNAMGMT
抑制ATR基因可提高HeLa细胞对烷化剂的敏感性被引量:1
2013年
目的:探讨ATR基因的表达对HeLa细胞对烷化剂敏感性的影响。方法:采用RNA干扰技术抑制HeLa细胞ATR基因的表达,观察ATR被阻断后HeLa细胞对烷化剂敏感性的变化,从而确定ATR基因的作用。结果:筛选到表达针对ATR基因的短发夹RNA(shRNA)阳性克隆,Western印迹结果显示ATR基因表达受到明显抑制;HeLa细胞对烷化剂的敏感性实验提示,ATRshRNA+HeLa细胞对烷化剂的敏感性明显增强。结论:抑制ATR基因可明显提高HeLa细胞对烷化剂的敏感性。
王颖丽让文亮张雪檀英霞李素波鲍国强高红伟宫锋季守平
关键词:烷化剂HELA细胞
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