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表达人CD4分子的逆转录病毒基因转移体系的建立被引量：1: 2007年; 目的构建表达人CD4(hCD4)分子pLXIN-hCD4载体的基因转移体系,使hCD4分子在小鼠T淋巴细胞白血病细胞系L615中长久、稳定地表达。方法将目的基因hCD4亚克隆到真核细胞表达载体pLXIN上,构建重组质粒pLXIN-hCD4。将该质粒用PloyFect脂质体转染到PT67包装细胞,获得病毒颗粒;用病毒颗粒感染体外培养的小鼠T淋巴细胞白血病细胞系L615。收集筛选后的细胞(L615-hCD4),以抗CD4单抗标记后用流式细胞术(FCM)检测其细胞膜hCD4分子的表达情况。PI-FCM法检测L615细胞和L615-hCD4细胞的细胞周期。结果菌落PCR鉴定及酶切鉴定显示hCD4基因成功地插入pLXIN载体中;hCD4分子可在L615-hCD4细胞膜表面稳定表达,而野生型L615细胞膜表面无hCD4分子表达。L615-hCD4与野生型L615的细胞周期比较无差异。结论成功构建了能在真核细胞上表达hCD4分子的重组质粒pLXIN-hCD4。L615-hCD4细胞能长期稳定表达hCD4分子,其细胞周期无改变。; 曾惠胡俊斌刘黎琼周浩; 关键词：逆转录病毒载体

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国家自然科学基金(30671980)