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排序方式：

人胶质细胞源性神经营养因子基因片段克隆及其在大肠杆菌中的表达: 2011年; 目的在大肠杆菌中表达具有生物活性的人胶质细胞源性神经营养因子（glial cell linederived neurotrophic factor, GDNF）蛋白。方法从人胶质瘤组织中提取总RNA，采用逆转录聚合酶链反应（reverse transcription PCR，RT—PCR）方法扩增出GDNFDNA片段，并将经双酶切后的GDNF基因片段直接与表达载体pET28a＋连接，构建重组表达载体pET28a＋GDNF，再将其转入大肠杆菌BL21中进行异丙基-β—D一硫代半乳糖苷诱导表达；采用分子筛层析法对表达产物进行纯化；用十二烷基硫酸钠一聚丙烯酰胺凝胶电泳（SDS—PAGE）对其纯度进行鉴定。结果酶切和测序证实，PCR扩增出GDNF基因片段为GDNF成熟肽编码序列；表达产物的SDS—PAGE显示，相对分子质量16000处有一新增蛋白带。结论本研究所构建的原核表达系统可表达人GDNF。; 刘亚珍施雨露王友联刘永茂万全; 关键词：神经生长因子类基因表达逆转录聚合酶链反应

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吉林省科技发展计划基金(20050403-2)