国家自然科学基金(30471892)
- 作品数：22 被引量：53H指数：5
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- 不同浓度骨髓基质细胞修复大鼠牙周组织缺损的实验研究被引量：5
- 2010年
- 目的探讨不同浓度骨髓基质细胞(BMSCs)对牙周组织再生的影响。方法将BMSCs以不同浓度(5×105,5×106,5×107mL-1)与胶原膜BME-10X复合培养后,复合物和空白胶原膜BME-10X分别植入SD大鼠牙周缺损部位,并覆盖膨体聚四氟乙烯膜(e-PTFE膜),以缺损处只覆盖e-PTFE膜为对照组,4周后取材,H-E染色观察牙周组织再生情况。结果各实验组新生牙槽骨面积与对照组相比有明显增加(P<0.05),5×106,5×107mL-1组的新生牙槽骨量与5×105mL-1和空白BME-10X组比较,差别有统计学意义(P<0.05),而5×106,5×107,5×105mL-1与空白BME-10X组组间比较则无统计学意义(P>0.05);各组新生牙骨质面积之间差别无统计学意义(P>0.05)。结论 BMSCs浓度可影响其体内成骨能力,高浓度BMSCs能有效促进牙周组织再生。
- 李艳芬赵欣闫福华骆凯郭建斌江俊
- 关键词：牙周组织骨髓细胞胶原
- 人骨形成蛋白-7真核表达质粒的构建及其在骨髓基质细胞的表达被引量：4
- 2007年
- 目的利用基因工程原理构建pIRES2-EGFP-hBMP-7真核表达质粒并检测其在Beagle犬骨髓基质细胞(BMSC)的表达。方法利用DNA重组技术,将hBMP-7片段克隆到真核表达载体pIRES2-EGFP中,EcoRⅠ单酶切、PCR及序列分析鉴定获得的重组质粒;脂质体介导的方法转染Beagle犬BMSC;免疫组织化学染色检测hBMP-7基因的表达。结果hBMP-7被定向插入到真核表达载体pIRES2-EGFP中,转染BMSC 24 h后可观察到转染的BMSC表达绿色荧光蛋白,48 h后转染效率达到31%。免疫组织化学染色证实重组pIRES2-EGFP-hBMP-7在BMSC中的表达。结论利用基因工程原理成功构建真核表达质粒pIRES2-EGFP-hBMP-7,并可在BMSC中表达。
- 李艳芬闫福华江一平骆凯赵欣
- 关键词：骨形态发生蛋白质类真核细胞骨髓细胞
- 不同冻存方法对骨髓基质细胞生物学活性的影响被引量：6
- 2005年
- 目的:比较不同冻存方法对骨髓基质细胞(BMSc)增殖分化能力的影响。方法:从Beagle犬股骨抽取骨髓,培养,传代,至第4代时将其以不同细胞浓度(1×107/L、1×108/L、1×109/L)、不同浓度冻存保护剂DMSO(5%、10%、15%)、不同降温方式以及消化或原位等方法进行冻存,细胞复苏后传至第7代,观察冻存对其增殖分化能力的影响。结果:各种方法冻存的BMSc均保持了较高的增殖、分化能力。高细胞浓度、10%DMSO的冻存保护剂有利于细胞活性的保存(P<0.05),3种降温方式对BMSc的生物特性的影响没有显著差别。-80℃原位冻存时BMSc仍保存了较高的增殖、分化能力。结论:较高的冻存细胞浓度、选用含10%DMSO的冻存保护剂、适宜的降温方式有利于冻存。-80℃原位冻存可作为BMSc短期的保存方法。
- 李厚轩闫福华刘建国林敏魁詹暶赵欣
- 关键词：骨髓基质细胞冻存增殖分化
- 自体移植冻存骨髓基质细胞修复犬牙周缺损的实验
- 2008年
- 目的观察冻存对骨髓基质细胞（bone marrow stromal cells，BMSC）体内形成牙周支持组织能力的影响。方法在5只Beagle犬的26个实验牙位制备牙周缺损。区组随机法分成3组，空白组（8颗）植入载体胶原膜，未冻存组（9颗）和冻存组（9颗）接种未冻存或冻存细胞与胶原膜复合物，8周后观察牙周组织再生情况。结果冻存组和未冻存组牙槽骨再生百分比分别为（83．7±10．6）％、（85．0±6．8）％，两组新生牙骨质和牙周膜百分比均为100％，差异无统计学意义（P〉0．05）；空白组牙槽骨再生百分比为（24．7±9．2）％，牙骨质再生百分比为（21．0±4．8）％，牙周膜再生百分比为（24．8±5．4）％，均较冻存组和未冻存组显著减少，差异有统计学意义（P〈0．05）。结论冻存对BMSC体内分化形成牙周组织的能力无显著影响。
- 李厚轩阎福华雷浪刘建国
- 关键词：引导组织再生牙周骨髓基质细胞
- hBMP-7基因转染大鼠骨髓基质细胞促进骨质疏松大鼠牙周组织再生的实验研究被引量：4
- 2011年
- 目的探讨人骨形成蛋白-7(hBMP-7)基因修饰的大鼠骨髓基质细胞(BMSCs)在骨质疏松(PMO)大鼠牙周组织再生中的作用。方法通过去除双侧卵巢构建SD大鼠绝经后骨质疏松(PMO)模型,在大鼠右侧下颌第一二磨牙颊侧制备牙周缺损模型。将转染有hBMP-7基因的假手术(SHAM)大鼠的BMSCs和去卵巢(OVX)大鼠的BMSCs,以及未转染的SHAM大鼠的BMSCs和OVX大鼠的BMSCs分别与胶原膜BME-10X构建复合物后植入牙周缺损内。单纯e-PTFE膜组仅覆盖e-PTFE膜。术后4周H-E染色观察牙周组织再生情况。结果 OVX组和SHAM组大鼠的BMSCs均能促进新生牙槽骨的形成,且差异无显著性;经过hBMP-7基因修饰后的BMSCs促进新生牙槽骨修复生成的效果则优于未转染的BMSCs,且在基因修饰后的OVX组和SHAM组BMSCs之间不存在显著性差异;负载BMSCs的组织工程化复合物促进新生牙槽骨修复生成的效果优于单纯胶原膜组。结论 hBMP-7基因修饰后的的BMSCs能更有效地促进PMO大鼠牙周组织缺损的修复,OVX-BMSCs和SHAM-BMSCs具有相似的骨再生能力。
- 闫福华江俊骆凯林敏魁钟泉赵欣
- 关键词：骨形态发生蛋白质类骨质疏松牙周再生
- hBMP-7基因瞬时转染绝经后骨质疏松大鼠骨髓基质细胞的表达及对其生物学活性的影响被引量：4
- 2011年
- 目的观察hBMP-7基因瞬时转染对去卵巢(OVX)大鼠的骨髓基质细胞(BMSCs)生物学特性的影响。方法通过去除双侧卵巢构建SD大鼠绝经后骨质疏松模型后,全骨髓法培养大鼠BMSCs,通过重组腺病毒将hBMP-7基因转染入OVX大鼠BMSCs。观察转染后细胞形态及生长情况以及碱性磷酸酶(ALP)变化。结果荧光显微镜下,转染24h后即可见大量绿色荧光蛋白表达阳性的细胞,基因转染效率高于70%。转染后细胞形态无明显改变,细胞增殖能力没有明显改变,ALP活性明显增高。免疫细胞化学染色结果表明,hBMP-7基因在OVX大鼠BMSCs中得到了有效的表达。结论重组腺病毒能够有效地将hBMP-7基因转染到OVX大鼠BM-SCs中,且hBMP-7能有效表达。基因转染对OVX大鼠BMSCs的增殖无明显影响,转染可促进OVX大鼠BMSCs向成骨细胞分化。
- 江俊闫福华骆凯钟泉李艳芬赵欣
- 关键词：骨形态发生蛋白质类腺病毒科转染牙组织
- 比格犬骨髓基质细胞和牙周韧带成纤维细胞体外再生组织能力的比较被引量：2
- 2011年
- 目的通过比较比格犬牙周韧带成纤维细胞(PDLFs)和骨髓基质细胞(BMSCs)体外促进牙周相关组织再生潜能,为牙周组织的再生治疗提供依据。方法通过体外ELISA、免疫细胞化学染色、Von Kossa染色分别比较BMSCs和PDLFs这两种细胞的碱性磷酸酶(ALP)、骨保护素(OPG)和胶原Ⅻ、形成的钙化结节,用实时定量PCR比较这两种细胞的OPG和胶原Ⅻ基因的表达。结果 Realtime PCR检测和免疫细胞化学染色结果均发现PDLFs中胶原Ⅻ表达量高于BMSCs(P<0.05);而ALP活性检测、OPG染色及Von Kossa染色等结果都表明其成骨能力低于BMSCs(P<0.05)。结论 PDLFs体外成骨能力低于BMSCs,但有较高的牙周韧带形成潜力。
- 林敏魁黄永玲钟泉江俊赵欣闫福华
- 关键词：骨髓细胞成纤维细胞牙周组织
- 碱性成纤维细胞生长因子基因修饰的组织工程化复合物促进牙龈组织再生实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)基因修饰的组织工程化复合物对牙龈组织缺损再生的影响。方法本研究于2007年7月至2009年1月在福建省高校口腔医学重点实验室进行。利用bFGF基因转染Beagle犬牙龈成纤维细胞(GFs),并将其接种于脱细胞真皮基质(ADM)形成组织工程化复合物,植入Beagle犬的人工牙周组织缺损区,通过对治疗前后牙周指标测量分析,评价该组织工程化复合物对牙龈组织再生的影响。结果实验前后附着丧失差值测定显示GFs与ADM复合物组及转染bFGF基因的GFs复合物组之间无显著性差异,与空白对照组相比均有明显增加(P<0.05)。角化龈宽度差值,6周时转染基因组有明显增加,12周时两实验组均比空白对照组明显增加(P<0.05)。结论复合GFs的ADM可能有助于改善附着丧失的程度及角化龈宽度,而bFGF的作用并不肯定。组织工程技术能有效促进牙龈组织再生。
- 陈欣戬钟泉赵欣骆凯闫福华
- 关键词：碱性成纤维细胞生长因子牙龈成纤维细胞脱细胞真皮基质
- 人骨形成蛋白-7基因转染犬骨髓基质细胞促进牙周组织再生的实验研究被引量：5
- 2010年
- 目的 探讨人骨形成蛋白-7（Hbmp-7）基因修饰的骨髓基质细胞（BMSC）在牙周组织再生中的作用,为基因治疗与组织工程联合应用于牙周组织缺损再生治疗奠定基础.方法 人工构建5只Beagle犬慢性Ⅱ度根分叉病变模型,将转染Hbmp-7基因的BMSCs与未转染BMSCs分别以1×107个/ml接种于胶原膜BME-10X,植入牙周缺损内,对照组仅植入胶原膜,12周后HE染色观察牙周组织再生情况.结果 各实验组和对照组均可见不同程度的牙周组织再生,实验组新生牙槽骨面积百分比和新生牙骨质长度百分比与对照相比有明显增加（P〈0.05）;转染细胞复合胶原膜组新生牙槽骨面积百分比（81.8%±7.8%）与未转染细胞复合胶原膜组（67.3%±10.3%）相互比较差异有统计学意义（P〈0.05）;而其新生牙骨质长度百分比（79.1%±8.6%与75.6%±7.3%）比较差异无统计学意义（P〉0.05）.结论 Hbmp-7基因强化的组织工程技术是修复牙周组织缺损的一种较好的方法,有很好的临床应用前景.
- 李艳芬闫福华钟泉赵欣
- 关键词：牙周组织骨髓细胞基因疗法骨形成蛋白-7
- hbFGF基因及hBMP-7基因修饰的组织工程化复合物联合应用促进牙槽骨再生动物实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的观察人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)基因及人骨形成蛋白-7(hBMP-7)基因修饰的组织工程化复合物联合应用对牙槽骨缺损再生的影响。方法利用hbFGF基因转染Beagle犬牙龈成纤维细胞(GFs),并将其接种于脱细胞真皮基质(ADM)形成组织工程化复合物,同时以hBMP-7基因转染Beagle犬骨髓基质细胞(BMSCs),将其与胶原膜BME-10X复合,共同植入Beagle犬的人工牙周组织缺损区,通过组织学观察和测量分析,评价其对牙槽骨再生的影响。结果术后6、12周,光镜下观察可见转染GFs复合ADM组和未转染GFs复合ADM组均较单纯BMSCs复合BME-10X组有更多的新生牙槽骨、新生牙周膜和新生牙骨质样组织生长;术后12周各组相对于术后6周的各组有更多的新生牙槽骨、新生牙周膜和新生牙骨质样组织。新生牙骨质与新生牙槽骨测量显示,转染hbFGF的GFs/ADM复合物的联合应用能显著提高hBMP-7基因修饰的组织工程化复合物修复牙周组织缺损的程度。结论转染bFGF的GFs/ADM复合物有助于促进hBMP-7基因修饰的组织工程化复合物对牙周组织缺损的修复。
- 陈欣戬李艳芬钟泉赵欣骆凯闫福华
- 关键词：牙龈成纤维细胞骨形成蛋白-7牙槽骨牙骨质
