安徽高校省级自然科学研究基金(KJ2011A161)
- 作品数：4 被引量：20H指数：2
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- 相关机构：安徽医科大学第一附属医院安徽医科大学安徽省寿县县医院更多>>
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- p38MAPK信号通路对骨骼肌胰岛素抵抗模型GLUT4表达的研究被引量：11
- 2012年
- 目的通过建立棕榈酸(PA)诱导的大鼠L6肌细胞胰岛素抵抗模型,并探讨P38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)信号通路对胰岛素抵抗模型葡萄糖转运蛋白4(GLUT4)表达的影响。方法不同浓度的棕榈酸(PA)分别培养不同时间已分化的L6肌细胞,用葡萄糖氧化酶法分别检测各组培养液中剩余葡萄糖浓度,并以此判断胰岛素抵抗形成与否。L6肌细胞胰岛素抵抗模型建立后,给予不同条件干预,用Western blot方法检测胰岛素抵抗组(IR组)和吡格列酮干预组(IR+PIO组)中p-p38MAPK和GLUT4蛋白表达水平。结果通过葡萄糖氧化酶法检测培养皿上清液中葡萄糖含量发现,0.4 mmol·L-1的棕榈酸在作用24～36 h或0.6～0.8 mmol·L-1棕榈酸作用8～24 h后,其上清液中葡萄糖含量和对照组相比,明显高于对照组(P<0.05)。据此可以认为胰岛素抵抗模型建立。Western blot结果显示:和IR组相比I,R+PIO组p-p38MAPK和GLUT4水平明显增加,差异有统计学意义(P<0.05)。结论通过一定浓度和作用时间的PA的刺激可以建立大鼠L6成肌细胞胰岛素抵抗模型。p38MAPK信号通路可能是影响GLUT4表达的重要信号通路之一。吡格列酮作为PPARγ激动剂,其改善胰岛素敏感性的机制之一可能是通过激活p38MAPK信号通路。
- 陈冬陈明卫杨宁宁王佑民
- 关键词：胰岛素抵抗P-P38MAPKPPARΓ激动剂GLUT4
- 棕榈酸致大鼠L6肌细胞胰岛素抵抗与JNK1活化的关系被引量：5
- 2012年
- 目的建立棕榈酸(PA)诱导的大鼠L6肌细胞胰岛素抵抗模型,初步探讨其机制与C-jun氨基末端激酶1(JNK1)活化的关系。方法不同浓度PA分别培养已分化的L6肌细胞2、4、8、12、24、36 h,用葡萄糖试剂盒分别检测各组培养液中剩余葡萄糖浓度,观察不同浓度PA对骨骼肌细胞葡萄糖摄取的影响。MTT法检测棕榈酸对L6细胞活性的影响。建立L6肌细胞胰岛素抵抗模型,Western blot检测正常组(NG组)和胰岛素抵抗组(IR组)的JNK1和p-JNK1的蛋白表达水平。结果 0.4 mmol/L的PA孵育24～36 h与0.6、0.8 mmol/L的PA孵育8～24 h后细胞上清液葡萄糖浓度明显高于NG组(P<0.05),MTT结果显示0.8、1.0 mmol/L的PA作用24、36 h时对细胞的活性有影响。Western blot结果显示:NG组JNK1和p-JNK1的表达量较低,IR组JNK1和p-JNK1的表达量上升,其中p-JNK1表达量上升较JNK1明显,但与NG组比较,IR组的JNK1表达差异无统计学意义,p-JNK1、p-JNK1/JNK1表达差异均有统计学意义(P<0.05)。结论通过一定浓度和时间的PA刺激可导致大鼠L6成肌细胞胰岛素抵抗的形成,其机制可能和JNK1的活化有一定关系。
- 杨宁宁王佑民陈冬陈明卫
- 关键词：胰岛素抵抗JNK棕榈酸
- 二甲双胍对肥胖大鼠骨骼肌脂肪异位沉积的干预作用被引量：2
- 2013年
- 目的观察二甲双胍对高脂饲料诱导的SD肥胖大鼠骨骼肌组织中脂肪异位沉积和骨骼肌细胞膜脂肪酸转运蛋白(FAT/CD36)表达的干预作用。方法选用4周龄雄性SD大鼠50只,随机分为普通饮食对照组(NC组,n=14)和高脂饮食组(HF组,n=36)。HF组喂养12周高脂饲料,筛选出成功建立肥胖大鼠模型32只,再随机分为肥胖模型组(OB组,n=12)、二甲双胍高剂量组(H-Met组,n=10)和二甲双胍低剂量组(L-Met,n=10),干预期间3组继续给予高脂饮食。H-Met和L-Met组分别以200、100 mg/(kg.d)的二甲双胍灌胃,6周后空腹取血进行相关代谢指标测定;取骨骼肌组织检测肌束间甘油三酯(TG)含量,油红O染色了解脂肪异位沉积程度,免疫荧光染色检测骨骼肌FAT/CD36蛋白表达。结果 OB组大鼠体重、血脂[TG、胆固醇(CHOL)、低密度脂蛋白(LDL-C)]、空腹血糖(FBG)、空腹胰岛素(FINS)、骨骼肌内TG含量均明显高于NC组(P<0.05),H-Met、L-Met组血中TG、LDL的含量均较OB组下降(P<0.05);仅H-Met组观察到大鼠体重增加趋势减缓,差异有统计学意义(P<0.05);二甲双胍能明显改善肌肉组织中TG沉积(P<0.05),下调骨骼肌组织FAT/CD36的表达(P<0.05),且这些作用在H-Met组更明显(P<0.05)。结论高脂饮食可以诱导建立肥胖大鼠模型,二甲双胍可以剂量依赖性的改善肥胖大鼠血糖血脂水平,减轻骨骼肌组织的脂肪异位沉积,下调骨骼肌细胞膜的FAT/CD36的表达。
- 夏同佳王佑民
- 关键词：肥胖二甲双胍FATCD36
- 脂联素影响骨骼肌胰岛素抵抗模型中葡萄糖转运蛋白4表达的研究被引量：2
- 2014年
- 目的：通过建立骨骼肌L6细胞胰岛素抵抗模型，探讨骨骼肌L6细胞中脂联素（ APN）的分泌，以及脂联素对骨骼肌胰岛素抵抗模型中葡萄糖转运蛋白4（GLUT4）表达的影响。方法（1）体外培养大鼠L6成肌细胞，诱导分化后，给予不同浓度的棕榈酸（PA），测定不同时间细胞培养上清液葡萄糖浓度，观察PA对L6细胞摄取葡萄糖的影响，建立胰岛素抵抗模型；（2）根据实验条件的不同分为三组：NC组（正常对照组，即骨骼肌L6细胞组）；IR组（胰岛素抵抗模型组）；IR＋PIO组（胰岛素抵抗模型＋吡格列酮组）。应用Western blot方法分别测定上述三组APN和GLUT4表达水平。结果（1）0．4 mmol· L^-1的棕榈酸在作用12、24、36 h以及0．6～0．8 mmol· L^-1棕榈酸作用8～36 h后，细胞培养上清液中葡萄糖含量，明显高于对照组。胰岛素抵抗模型建立；（2）Western blot结果显示：①与NC组比较，IR组APN和GLUT4表达均减少，差异有统计学意义；②与IR组比较，IR＋PIO组其APN和GLUT4表达均增加，差异有统计学意义。结论（1）大鼠L6成肌细胞培养并诱导分化后，经过一定条件下PA刺激，可以建立胰岛素抵抗模型；（2）大鼠L6细胞可分泌和表达脂联素，骨骼肌源性脂联素上调L6细胞GLUT4的表达；（3）吡格列酮作为PPAR-γ激动剂，可增加大鼠L6细胞脂联素的分泌，进而改善胰岛素敏感性。
- 陈冬孙宏陈明卫王佑民
- 关键词：脂联素胰岛素抵抗模型PPAR-Γ激动剂葡萄糖转运蛋白4
