山东省科技发展计划项目(2006GG3202008)
- 作品数：1 被引量：3H指数：1
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- 利用RNAi技术抑制Bcl-2基因表达增强肺腺癌A549细胞放射敏感性被引量：3
- 2009年
- 目的利用RNAi技术抑制Bcl-2基因的表达,观察其对肺腺癌A549细胞凋亡和放射敏感性变化的影响。方法构建Bcl-2基因的干扰质粒pBcl-2-siRNA,稳定转染人肺腺癌A549细胞,同时设立转染无意义链组、空载体组和未转染组。采用Real time RT-PCR和Western blot方法,观察Bcl-2基因在mRNA和蛋白水平表达的变化。采用流式细胞术和克隆形成方法,检测RNA干扰对A549细胞放射敏感性的影响。结果成功构建bcl-2 siRNA质粒,转染A549细胞,获得稳定转染细胞株A549/Bcl2-Ins;Bcl-2mRNA、Bcl-2蛋白表达明显降低;A549/Bcl2-Ins凋亡率[(10.11±0.92)%]明显高于对照组,6Gy X线照射后凋亡率[(28.81±1.10)%]明显高于对照组及未照射组;A549/Bcl2-Ins的D0和Dq值分别为1.399和1.298,明显低于转染无意义序列细胞株A549/Bcl2-Neg(1.695和2.480)、转染空载体细胞株A549/SD(1.706和2.227)和空白对照细胞A549(1.816和2.777)。结论RNAi技术可以有效抑制肺腺癌A549细胞Bcl-2基因的表达,增强A549细胞对X线的放射敏感性。
- 高晖刘芳马道新程玉峰
- 关键词：基因辐射耐受性RNA干扰
