国家自然科学基金(30471851)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
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- 人视网膜微血管内皮细胞的培养及HIV-1 gp120受体研究被引量：2
- 2008年
- 目的原代培养人视网膜微血管内皮细胞(HRCECs),并探索其是否具有HIV-1gp120结合细胞的主要受体:CD4、CXCR4和CCR5。方法原代培养HRCECs,采用免疫组织化学和免疫荧光法鉴定特征性的第Ⅷ因子相关抗原,以及CD4、CXCR4和CCR5受体的表达情况。结果原代培养的HRCECs,通过免疫组化和免疫荧光的方法,均可见其特征性的第Ⅷ因子相关抗原的表达,而CD4受体为阴性,但CXCR4和CCR5受体在细胞浆上均有阳性分布。结论原代培养可获得高纯度的HRCECs,均有特征性的第Ⅷ因子相关抗原表达,且有HIV辅助受体CXCR4和CCR5阳性分布,可能为HIV-1gp120侵犯HRCECs破坏血视网膜屏障提供靶点。
- 林浩添张振平余秋蓉吴文捷晏丕松柏凌叶少碧
- 关键词：艾滋病GP120细胞培养
- HIV-1gp120蛋白对人血-视网膜屏障细胞的毒性作用
- 2009年
- 目的探索HIV-1gp120蛋白侵犯人血-视网膜屏障的机制。方法原代培养人血-视网膜屏障细胞（HBRBC），包括人视网膜微血管内皮细胞（HRCEC）、人视网膜微血管周细胞（HRCPC）、人视网膜色素上皮细胞（HRPE），以培养基作为对照。用MTT法观察7种不同浓度（0．01～0．15mg／L）的HIV-1gp120蛋白作用24h和0．08mg／LHIV-1gp120蛋白作用不同时间（4～72h）对3种细胞的生长抑制作用。0．08、0．1、0．12、0．15mg／L的HIV-1lgp120蛋白作用24h后，用流式细胞仪检测其对3种细胞凋亡率和线粒体膜电位（△ψm）的影响；用Western免疫印迹检测Cleavedcaspase-9蛋白的活化情况。用透射电镜观察经0．08mg／LHIV-1gp120蛋白处理24h前后3种细胞超微结构的变化。结果HIV-1gp120蛋白作用24h，低浓度（〈0．08mg／L）对3种细胞的活性均没有明显影响，而当浓度超过0．08mg／L时，对细胞的增殖活性有明显的抑制作用，呈浓度依赖性（HRCEC：r=-0．763，P〈0．01；HRCPC：r=-0．804，P〈0．01；HRPE：r=-0．698，P〈0．01）。HIV-1gp120蛋白（0．08mg／L）作用12h即可显著抑制细胞的增殖活性，24、48和72h抑制效应更明显，相对增殖率分别为HRCEC：84％、70％、41％、22％，HRCPC：80％、69％、38％、18％，HRPE：86％、73％、45％、26％，抑制效应呈时间依赖性（HRCEC：r=-0．833，P〈0．01；HRCPC：r=-0．784，P〈0．01；HRPE：r=-0．701，P〈0．01）。HIV-1gp120蛋白作用24h后与对照组相比，各浓度组3种细胞凋亡率增加、△ψm明显降低以及Cleavedeaspase-9蛋白表达增强，均呈浓度依赖性。透射电镜示0．08mg／LHIV-1gp120蛋白处理24h后，3种细胞均出现了线粒体肿胀、溶酶体增多等早期凋亡的微观改变。结论HIV-1gp120蛋白能够抑制人血-视网膜屏障细胞的增殖并具有诱导凋亡的作用，破坏线粒体的结构和功能是其可能的机制。
- 林浩添张振平余秋蓉晏丕松汪琪磷柏凌
- 关键词：血视网膜屏障细胞毒性实验
- Inducible nitric oxide synthase is involved in the oxidation stress induced by HIV-1 gp120 in human retina pigment epithelial cells被引量：5
- 2008年
- 背景人的免疫不全 virus-1 (HIV-1 ) 信封 glycoprotein gp120 在联系爱滋病的 retinopathy 的发展被含有。现在的学习测试了 gp120 可以导致氧化应力在可诱导的氮的氧化物 synthase (iNOS ) 和 malondialdehyde (MDA ) 和氮的氧化物的生产的规定上面包括的假设(没有) 调停在网膜的颜料的 retinopathy 上皮(RPE ) 房间。方法人的 RPE 房间线 D407 与 gp120 有教养、对待。HIV-1 gp120 蛋白质导致了类脂化合物 peroxidation 产品 MDA。没有生产和 iNOS 表示被 spectrophomtometry 在 vitro 检验，即时 PCR，西方的弄污，并且共焦的显微镜。gp120 的结果增加能导致 RPE 不生产的房间和在时间依赖者和剂量依赖者礼貌(P0.05 ) 的 MDA。同样， gp120 在在时间依赖者和剂量依赖者礼貌的 D407 房间也能够起来调整的 iNOS mRNA 和蛋白质。结论 Gp120 由刺激 MDA 和没有生产在 D407 房间导致氧化应力，它被起来调整的 iNOS 表示调停。Gp120 可以调停在联系爱滋病的 retinopathy 的氧化应力。
- YU Qiu-rongZHANG Zhen-pingZHANG HuiLIN Hao-tianLI Xiu-meiBAI LingCAI Wei-bin
- 关键词：HIV-1GP120色素上皮细胞
