福建省科技计划重点项目(2010Y0022)
- 作品数：4 被引量：17H指数：3
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- 建立PCR熔解曲线法检测HBV基因型被引量：6
- 2011年
- 目的建立检测HBV基因型的PCR熔解曲线法,并验证该方法临床应用的可靠性。方法依据文献报道的HBV B、C型全基因组序列,分别设计B、C型的特异引物序列,建立HBV基因分型的PCR熔解曲线法。用该法检测186例HBV DNA阳性血清样本,并从中选取51例样本,用商品化的HBV基因分型试剂盒进行检测,用Kappa一致性检验对两法检测结果进行比较。结果 186例标本中,PCR熔解曲线法检测到B型133例(71.5%),C型37例(19.9%),B/C混合型16例(占8.6%)。选取的51例样本中,熔解曲线法与市售试剂盒检测B型符合率100%,C型符合率100%,B/C混合型符合率81.25%,总符合率94.1%(Kappa=0.909,P<0.05)。结论建立的PCR熔解曲线法操作简便,与商品试剂盒的检测结果有较高的符合率,可用于临床上HBV B、C以及B/C混合型的检测。
- 商红艳程祖建欧启水
- 关键词：乙型肝炎病毒基因型熔解曲线法聚合酶链反应
- 分支DNA技术定量检测HBV DNA的临床意义被引量：4
- 2013年
- HBV DNA是反映病毒量及复制活跃程度的重要指标。临床上常用实时荧光定量（fluorescence quantitative，FQ）-PCR法检测HBV DNA，该方法具有特异度好和敏感度高的特点。新近发展的分支DNA技术（branched DNA，bDNA）以微孔形式对杂交信号级联放大，实现特异性核酸扩增，并通过化学发光或其他显色系统显示检测结果。
- 刘辉江凌商红艳杨滨欧启水
- 关键词：HBVDNADNA技术实时荧光定量
- 乙型肝炎病毒基因诊断进展被引量：4
- 2011年
- 乙型肝炎病毒（hepatitis B virus,HBV）是引起中国急、慢性肝炎的主要病原体,感染后会引起慢性乙型肝炎、肝硬化,最后甚至发展成肝癌。快速、准确、特异地诊断乙型肝炎对于其治疗、预后及转归至关重要,其中基因诊断技术起关键作用。
- 商红艳欧启水
- 关键词：基因突变
- HBVDNA定量与基因分型双重分子信标实时PCR方法的建立及初步应用被引量：3
- 2013年
- 目的研究建立同时进行HBVDNA定量与基因分型检测的双重分子信标实时PCR法（以下简称“定量与分型PCR法”），并探讨其应用价值。方法构建B、c基因型重组质粒作为标准品，通过设计B、c基因型特异性引物和分子信标（B、c基因型分子信标5’端分别标记FAN和Hex荧光基团），建立在1个反应体系中同时定量与分型PER法。然后，用10倍梯度稀释的B、c基因型标准品（10。～1011 kIU／L）评价其检测线性范围和灵敏度；用丙型肝炎病毒感染者、单纯疱疹病毒感染者、人类乳头瘤病毒感染者、健康志愿者血清各5份评价其检测特异性；用高、中、低3份不同浓度的B、c基因型质粒标准品（10、106、104 kIU／L）进行同批次和不同批次各10次重复检测，分别计算批内及批间ct值的变异系数（CV）评价其检测重复性。然后，以湖南圣湘生物科技有限公司HBV核酸定量测定试剂盒为HBVDNA定量参照方法，申友公司HBV基因分型试剂盒为HBV基因分型参照方法，同定量与分型PCR法平行检测132例HBV感染者血清标本，评价自建定量和分型PCR法的准确性。最后，将132例HBV感染者分为无症状携带组（21例）、慢性乙型肝炎组（77例）、肝硬化组（25例）、肝癌组（9例），分析评价基因型、疾病进展的不同阶段与DNA载量间的相关性。结果用自建定量与分型PCR法检测B、c基因型的灵敏度均为103 kIU／L；线性范围均为103一1011 kIU／L；检测B基因型批内CV为1．51％～1．80％，批间CV为2．11％～3．03％，检测C基因型批内CV为1．79％～1．95％，批问CV为2．53％～2．91％；对其他病毒感染者和健康志愿者血清检测结果均为阴性。定量与分型PCR法检On．0132例HBV感染者的基因分型结果与HBV测序分型试剂盒总符合率为90．9％（120／132，Kappa=0．832，P〈0．05）；其DNA定量结果[5．07（3．89～6．33）lgkIU／L]与HBV
- 王炜陈晓江凌刘灿商红艳欧启水杨滨
- 关键词：肝炎病毒乙型病毒聚合酶链反应
