浙江省科技攻关计划(2006C12026)
- 作品数:4 被引量:20H指数:2
- 相关作者:韦强季权安刘燕鲍国连邵泽香更多>>
- 相关机构:浙江省农业科学院山东农业大学更多>>
- 发文基金:浙江省科技攻关计划浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 鸭疫里默氏杆菌和大肠杆菌双型融合菌株的构建被引量:2
- 2010年
- 以耐药标记的鸭疫里默氏杆菌TXRA1(Chlr,Erys)和大肠杆菌ZBO78(Eryr,Chls)作为亲本菌株,在DnaseⅠ始终存在的条件下,采用Lysozyme-EDTA法制备2菌株的原生质体,原生质体制备率分别达到了92.00%和91.94%,再生率分别达到了38.77%和37.29%。通过PEG法进行2菌株原生质体融合,成功获得31株具有双亲本耐药性(Chlr,Eryr)的融合菌株,并应用双重PCR方法对融合株的部分外膜蛋白A(ompA)基因进行扩增,其中有11株融合菌株能够表达2亲本的ompA基因,有20株仅表达亲本大肠杆菌的ompA基因。融合菌株的形态、染色特性和生化特性等介于2亲本菌株之间,连续传15代后融合菌株的上述性状仍能够稳定遗传。
- 王春平韦强鲍国连崔言顺刘燕邵泽香季权安肖琛闻李建亮
- 关键词:鸭疫里默氏杆菌大肠杆菌原生质体融合
- 中药方剂对鸭疫里氏杆菌疫苗的免疫佐剂作用被引量:1
- 2010年
- 选择玉屏风散、四君子汤以及合方玉风君子汤作为口服佐剂,观察其对鸭疫里氏杆菌疫苗免疫的佐剂效果。结果:玉风君子汤能够显著提高受免疫鸭的抗体水平,且对鸭生长没有任何负面影响。
- 肖琛闻鲍国连韦强刘燕季权安
- 关键词:中药佐剂鸭疫里氏杆菌疫苗佐剂
- 鸭疫里默氏菌病和大肠杆菌病多重PCR诊断方法的建立被引量:14
- 2010年
- 参考GenBank中鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的外膜蛋白A(OmpA)基因序列,应用PrimerPremier5.0软件在二者高度保守区设计了2对引物,建立了适合鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的快速检测的多重PCR检测方法。以该方法对已分离并保存的鸭疫里默氏菌和大肠杆菌进行PCR扩增,分别扩增出与试验设计相符的670、408bp的特异性DNA片段。将扩增所得的DNA片段进行克隆测序,测序结果表明分别为鸭疫里默氏菌和大肠杆菌OmpA基因序列。该方法对鸭疫里默氏菌和大肠杆菌的检测下限分别为4×104CFU/mL和3×104CFU/mL。表明所建立的PCR方法具有特异、快速和敏感的特点,可用于诊断鸭疫里默氏菌、大肠杆菌以及两者的混合感染。
- 王春平韦强鲍国连崔言顺刘燕邵泽香季权安肖琛闻李建亮
- 关键词:鸭疫里默氏菌大肠杆菌多重PCR
- Race法扩增4株鸭肝炎病毒3′末端序列及其克隆分析被引量:3
- 2009年
- 利用3’RACE方法扩增并克隆了4株鸭肝炎病毒(DHV)(ZYM株、Z05株、Z07株和Z10株)的基因组的3’末端真实序列,包括部分非结构蛋白(3D)基因以及紧接着3D基因下游的3’端非编码区(untranslated region,UTR)和poly(A)尾巴。测序结果表明,扩增的特异性片段长度为597nt(不包括polyA尾巴)。各毒株3’UTR均为315nt,位于终止密码子TGA之后,比对分析结果表明各毒株间的同源性较高;4株DHV 3’末端核苷酸序列(不包括polyA尾巴)之间的同源性为96.3%~100%,而与参考毒株之间的同源性为93.5%~99.7%。在系统发生进化树上,各毒株亲缘关系较近。
- 邵泽香韦强崔言顺鲍国连刘燕季权安
- 关键词:鸭病毒性肝炎病毒POLY(A)