广州市重大科技攻关项目(2009A1-E021)
- 作品数：3 被引量：8H指数：2
- 相关作者：杨博王卫飞王永华罗日明陈华勇更多>>
- 相关机构：华南理工大学更多>>
- 发文基金：广州市重大科技攻关项目广东省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：化学工程轻工技术与工程生物学更多>>
- 寄生曲霉脂肪酶的全基因合成、原核表达及其结构分析被引量：3
- 2011年
- 根据寄生曲霉脂肪酶基因序列(GenBank登录号:AF404488)及大肠杆菌密码子的偏爱性,应用重叠延伸PCR技术,人工合成了寄生曲霉脂肪酶基因lip AP。将基因克隆到pFL-B13cl载体上获得重组质粒pFL-B13cl/Lip AP,并在大肠杆菌BL21(DE3)中进行优化表达。融合蛋白Sumo-LipAP在0.1 mmol/L IPTG、37℃条件下诱导6 h表达量最高。SDS-PAGE分析显示融合蛋白His-Sumo-LipAP以包涵体形式表达,大小约为53 kD。复性后透析处理,大部分融合蛋白转化为正确构象且具有催化活性,经一步疏水层析其纯度可达98%。生物信息学工具预测和分析发现,LipAP空间结构保守,具有催化三联体(Ser173-Asp226-His288)、活性部位盖子(S111YSIRNWVTDAT122)及保守五肽(GHSLG)3个功能域。
- 连英丽蓝东明杨博王永华
- 关键词：密码子优化原核表达生物信息学
- 以隐甲藻油富集合成高含量DHA-甘油酯被引量：1
- 2012年
- 隐甲藻油中含有34.72%的DHA,通过乙酯化、尿素包合富集,酶催化甘油解转化得到更高含量的DHA-甘油酯。通过对隐甲藻油碱法催化乙酯化,其酯化率达到92.60%;对得到的脂肪酸乙酯再经尿素包合分离浓缩,所得DHA-乙酯的含量达63.30%。运用酶催化将DHA-乙酯转化成DHA-甘油酯,通过实验优化,所得最优条件是:甘油与DHA-乙酯摩尔比1∶4,NOV 435酶加量2%(占总底物的质量分数),50℃抽真空(100 Pa),DHA-乙酯转化率达到80.85%。研究结果表明,通过物理、化学和酶催化相结合能得到高含量的DHA-甘油酯。
- 杨春芳王卫飞王永华杨博
- 关键词：酶催化
- 高纯度共轭亚油酸的制备被引量：4
- 2011年
- 以红花籽油为原料,比较了2种高纯度共轭亚油酸(CLA)的制备方法:(1)碱法异构化-尿素包合、(2)皂化-尿素包合-碱法异构化。针对每种方法确定了尿素包合和碱法异构化的最佳工艺条件,并对所得的CLA异构体组成进行了分析。研究表明:按照方法(2)先获得高纯度亚油酸(LA),再对其碱法异构化制备CLA可以得到纯度更高的产品。该方法在最佳反应条件下,制备得到的CLA的纯度为97.22%,收率为32.08%,其中c9t11-CLA含量为45.14%,t10c12-CLA含量为49.12%。
- 徐达陈华勇罗日明王卫飞杨博
- 关键词：共轭亚油酸尿素包合
